留学生病理学教学实践与探索

针对留学生病理教学的特殊性,结合病理学学科特点,从因材施教,确定教学目标、选择合适的教材和优秀的教师、合理安排教学内容、采用多媒体教学手段、重视实验教学、严格教学管理等方面探讨优化病理学教学设计的方法,以提高全英文教学的质量。

肺癌VEGF和MMP_2的表达与临床病理特征的关系

①目的 探讨血管内皮生长因子 (VEGF)、基质金属蛋白酶Ⅱ (MMP2 )在肺癌中的表达与肺癌临床病理特征的关系。②方法 对 75例经手术切除并具有完整随访记录的人体肺癌标本 (术前均未行放、化疗 ) ,采用免疫组化PowerVisionTM PV90 0 0法检测VEGF、MMP2 的表达。③结果 VEGF及MMP2 的阳性率分别为6 1 .33%、6 5 .33% ,其表达强度随组织学分级的升高而增加 (Hc=2 0 .91 2、1 0 .6 93,q =4 .0 2 3～ 1 3.6 6 4 ,P <0 .0 1 ) ;淋巴结有转移组两者的表达强度显著高于淋巴结无转移组 (Hc=2 .990、2 .4 5 0 ,P <0 .0 5 ) ;1年内死亡组、1～ 5年死亡组及 5年生存组间两者的表达强度差异亦均有显著意义 (Hc=1 6 .94 3、1 0 .6 5 0 ,q =3.84 7～ 6 .81 7,P <0 .0 1 )。两者在肺癌组织中的表达与病人年龄、性别、原发瘤大小及组织病理类型均无关。VEGF与MMP2 在肺癌中的表达呈极显著性正相关 (r =0 .4 5 7,P <0 .0 0 1 )。④结论 VEGF、MMP2 在肺癌组织中的表达均与肺癌细胞分化程度、淋巴结转移及病人生存期有关 ;两者在肺癌组织中的表达具有相似性并呈极显著性正相关 ;

肿瘤组织与正常组织对比切片在病理实验教学中应用

目的探讨肿瘤组织与正常组织对比切片在病理实验教学中的应用价值。方法分别应用常规染色(HE染色)、特殊染色和免疫组化技术,对50例肿瘤组织及相应的正常组织标本进行染色。结果镜下观察切片正常组织与肿瘤组织3种染色对比明显,HE染色切片可见肿瘤组织细胞的形态、排列与正常组织明显不同,癌细胞胞核大而不规则,核质比例变小;特殊染色可见正常组织与肿瘤组织的弹性纤维、网状纤维及胶原纤维的分布和含量不同;免疫组化染色可见正常组织不或极低表达P53和增殖细胞核抗原(PCNA),CD34阳性标记细胞少、规则,肿瘤组织P53和PCNA表达显著增多,CD34阳性标记细胞多,且分布、排列等不同于正常组织。结论肿瘤组织与正常组织对比切片易于观察、比较和分析,提高了病理学实验教学的效果。

子宫内膜腺癌组织中MVD与临床病理因素及细胞增殖关系

目的探讨子宫内膜腺癌组织中微血管密度(MVD)与临床病理因素和细胞增殖的关系。方法应用免疫组化EnviSion法检测20例正常子宫内膜和70例子宫内膜腺癌组织中CD34和细胞增殖指标Ki-67的表达情况。结果子宫内膜腺癌组织中MVD明显高于正常子宫内膜组织(t=12.67,P<0.001),MVD与病人年龄、病理分级无关(t=1.673,F=2.09,P>0.05),而与手术-病理分期、子宫肌层浸润深度及淋巴结转移均有关(F=5.77,t=5.650、6.445,P<0.01、0.001);子宫内膜腺癌中Ki-67阳性组MVD值显著高于Ki-67阴性组,差异有统计学意义(t=2.522,P<0.05)。结论子宫内膜腺癌组织中MVD与肿瘤的生长、浸润和转移有密切关系,联合检测MVD和Ki-67可作为一种衡量子宫内膜腺癌生物学行为和判断预后的指标。

肺癌组织中KDR的表达及其临床病理意义

①目的 探讨肺癌组织中血管内皮生长因子受体KDR的表达与临床病理因素的关系。②方法应用免疫组织化学PicTureTM PV90 0 0法 ,测定 75例肺癌标本中血管内皮生长因子受体KDR的表达。③结果KDR在肿瘤细胞中的阳性表达率高于间质纤维母细胞 ,差异有显著性 (χ2 =5 .88,P <0 .0 5 )。肿瘤细胞及纤维母细胞中KDR的阳性表达率在不同年龄、不同性别及不同病理类型、不同病理分级之间差异均无显著性 (χ2 =0 .6 6 8～3.2 34,P >0 .0 5 ;P =0 .786 )。KDR在不同大小的肿瘤组间肿瘤细胞中的表达差别有显著性 (χ2 =7.2 88,P <0 .0 5 ) ,而在纤维母细胞中的差别无显著性 (χ2 =2 .5 5 8,P >0 .0 5 )。淋巴结有转移组的肿瘤细胞及纤维母细胞中KDR的阳性表达率均高于无转移组 ,差异有显著性 (χ2 =9.316、8.833,P <0 .0 5 )。不同术后生存期组中 ,KDR的表达在肿瘤细胞及纤维母细胞中均有极显著差别 (χ2 =16 .19、19.19,P <0 .0 0 1)。④结论 利用免疫组织化学等方法检测肺癌组织中KDR的表达 ,可为肺癌的预后评估及治疗提供较可靠的指标。

年轻与中老年乳癌分子分型及病理特征差异分析

目的探讨年轻乳癌分子分型与病理特征之间的关系及其与中老年乳癌的差异。方法收集2012年4月—2015年8月就诊于青岛大学附属医院的年轻（≤35岁）浸润性乳癌病人177例,分析其组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移及表皮生长因子受体（EGFR）、拓扑异构酶Ⅱα（TopoⅡα）、Ki-67表达与肿瘤各分子亚型之间的关系,并与同期的2 311例中老年（≥45岁）浸润性乳癌病人进行比较。结果不同分子亚型年轻乳癌病人的组织学分级、肿瘤大小及EGFR、TopoⅡα、Ki-67表达差异均有统计学意义（Z=11.321~38.371,χ^2=31.886,F=27.241,P〈0.05）。LuminalB型年轻乳癌的组织学分级及TopoⅡα、Ki-67表达与中老年乳癌比较差异有统计学意义（Z=2.027~2.151,t=2.129,P〈0.05）。结论年轻乳癌分子分型与其病理特征有关,LuminalB型年轻乳癌的某些病理特征与中老年乳癌相比有其独特性。

原发性肺癌p53蛋白、增殖细胞核抗原表达及DNA含量与预后的关系

目的探讨ｐ５３蛋白、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在肺癌中表达的特征、相关性及与ＤＮＡ含量和预后的关系。方法应用免疫组织化学方法检测原发性肺癌组织标本ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ的表达，并用图像分析技术测定ＤＮＡ含量。结果ｐ５３蛋白阳性表达组ＤＮＡ含量（８．９１Ｃ）和ＰＣＮＡ半定量分级（Ｉ～Ⅳ级例数为９，１３，１２，１０，下同）显著高于ｐ５３蛋白阴性组（６．６０ｃ）（１４，１５，７，２）在肺腺癌，半年内死亡组ｐ５３蛋白阳性表达率（１１／１５）和ＰＣＮＡ半定量分级（２，５，４，４）显著高于５年以上生存组（７／１９）（１０，６，１，２），且两者表达与淋巴结转移有显著关系；在肺鳞癌，半年内死亡组ＰＣＮＡ半定量分级（４，１，６，２）显著高于５年以上生存组（６，１４，７，０），而ｐ５３蛋白表达与患者预后关系不明显。结论ｐ５３蛋白、ＰＣＮＡ及ＤＮＡ含量间具有显著正相关关系，且ｐ５３蛋白、ＰＣＮＡ表达对于估测肺癌患者的预后有重要意义。

降钙素基因相关肽、ACTH在人正常淋巴结和淋巴瘤中的表达

目的 寻找神经内分泌系统与免疫系统之间相互调节的免疫形态学依据。方法 运用免疫组织化学SABC法 ,检测降钙素基因相关肽 (CGRP)、ACTH在人正常淋巴结及淋巴瘤中的表达。结果 CGRP :人正常淋巴结有 31/ 35例阳性表达 ,淋巴瘤 6 / 30例阳性 ,表达强度明显减弱 ,两者差异有显著性 (P <0 0 0 1)。ACTH :人正常淋巴结 30 / 35例阳性表达 ,淋巴瘤表达较正常淋巴结明显增强 ,2 7/ 30例阳性 ,表达强度增强 ,与淋巴结阳性表达差别有显著性 (P <0 0 1) ;两种标志物在淋巴结中的阳性分布大致相同 ,阳性表达主要分布在副皮质区的T淋巴细胞、淋巴滤泡生发中心细胞以及巨噬细胞等部位。结论 CGRP、ACTH在淋巴结中呈阳性表达 ,两者在淋巴瘤中表达与淋巴者结差异有显著性 ,提示CGRP、ACTH不但是神经内分泌免疫网络中共同的生物学语言 ,对免疫系统及神经内分泌系统起双向调节的作用 。

p53、p16、nm23基因蛋白在肺癌中的表达及意义

目的：研究肺癌组织中ｐ５３、ｐ１６、ｎｍ２３基因蛋白的表达。方法：应用免疫组化ＬＳＡＢ方法检测１２９例肺癌标本中ｐ５３、ｐ１６、ｎｍ２３基因蛋白的表达。结果：ｐ５３、ｐ１６、ｎｍ２３蛋白在肺癌中的阳性表达率分别为５２７％、４５７％、５５８％；３种蛋白阳性表达率与组织学分型无明显相关（Ｐ＞００５）；肺腺癌淋巴结转移阳性组ｐ５３蛋白阳性表达率显著高于淋巴结无转移组（Ｐ＜００５）；ｐ５３蛋白阳性表达组及ｐ１６蛋白阴性表达组的预后差（Ｐ＜００５）；ｎｍ２３蛋白表达与患者预后无关。结论：ｐ５３、ｐ１６蛋白异常表达可做为评估肺癌患者预后的有效指标；未能证实ｎｍ２３基因在肺癌中具转移抑制功能。

人肝细胞癌及癌周组织内P^(53)蛋白表达的研究

应用LSAB免疫组化方法检测73例原发性肝细胞癌（HCC））及其癌旁组织中P53蛋白的异常表达。结果显示：P53蛋白在HCC中阳性表达率显著高于癌旁组织，且与HCC分化程度呈显著正相关，低分化组P53蛋白阳性表达率显著高于高分化组（P＜0．05）；癌旁组织中，p53蛋白表达仅见于增生结节中，肝硬化组织内未见p53蛋白阳性表达。提示P53基因突变是HCC的频发事件，在HCC的发生发展中发挥重要作用；增生结节是HCC的癌前病变。

肺鳞癌间质内微血管的定量研究

目的：探讨肺鳞癌间质内微血管与肺癌临床病理的关系；方法：应用ＦⅧ相关抗体，并采用ＬＳＡＢ法对８９例手术切除的肺鳞癌微血管进行定量检测；结果：有淋巴结转移组肺鳞癌微血管密度每２００倍视野５０．２±２２．８个，无转移组为３４±１９．１个；有淋巴结转移组微血管腔面积为６９６１．８±２８６８．９平方象素，无转移组为４０３７．４±２４２５．３平方象素，两者在两组间比较，差异均有极显著性意义（ｔ＝３．１７，ｔ＝３．５８，Ｐ均＜０．０１）；微血管密度及腔面积在３组不同生存期的患者间差异亦均具有极显著性意义（Ｆ＝６．６２，Ｆ＝８．６５，Ｐ均＜０．０１）；结论：肺鳞癌间质内微血管生成与淋巴结转移和患者的预后有关。

快速石蜡法在胸腹水细胞蜡块制作中应用

胸腹水检查具有简便、快速、易行等优点，但常规胸腹水涂片的阳性率普遍偏低，涂片上肿瘤细胞量少且不适用于后期的饱疫绀化峪别诊断，给肿瘤疾病的鉴别诊断带来了一定，

EPAS1、VEGF在胰腺癌中表达及其相关性

目的研究胰腺癌组织中缺氧诱导因子2(EPAS1/HIF-2α)、血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的表达及与临床病理特征之间的关系。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹Western blot、免疫组化SP法检测60例胰腺癌及相应正常胰腺组织中EPAS1、VEGF mRNA和蛋白的表达和分布,同时检测MVD作为判断血管生成的指标,分析其间的相关性以及与肿瘤临床病理特征之间的关系。结果EPAS1、VEGF和MVD在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织,VEGF在mRNA和蛋白水平均增高(P<0.01),但EPAS1只在蛋白水平增高(P<0.01)。此外,三者之间的表达具有显著相关性(P<0.01)。EPAS1和VEGF的阳性表达与胰腺癌的TNM分期、肿瘤大小有关。结论胰腺癌组织中EPAS1和VEGF呈过量表达,且EPAS1的表达与VEGF及MVD呈显著正相关。EPAS1可通过上调VEGF表达来促进胰腺癌血管生成从而在胰腺癌的发生、发展中起重要作用。

5-HT在人正常淋巴结及淋巴瘤中表达的研究

目的:通过对5-羟色胺(Serotonin,5-HT)在人淋巴结和淋巴瘤中表达的检测,寻找神经内分泌系统与免疫系统之间功能双向调节的免疫形态学依据,并探讨5－HT在正常状态和病理状态下对免疫系统的影响和作用,以及其在淋巴瘤发生过程中可能的作用。方法:运用免疫组织化学SABC法,以5－HT为探针对人正常或反应性增生的淋巴结(以下称正常淋巴结)35例及淋巴瘤30例进行检测,所得结果用统计学卡方检验法进行比较分析。结果:人正常淋巴结33/35例阳性表达,淋巴瘤中见20/30例呈阳性表达,且比正常淋巴结表达强度明显降低,两者差异有显著性(P＜0．05)。阳性表达主要分布在副皮质区的T淋巴细胞、淋巴滤泡生发中心细胞以及巨噬细胞等部位。结论:5－HT是神经内分泌免疫网络中共同的生物语言,其对免疫系统及神经内分泌系统起着双向调节的作用,并且可能在淋巴瘤的发生中发挥着一定的作用。

非小细胞肺癌组织Bmi-1与C-myc蛋白表达及其相关性

目的探讨Bmi-1与C-myc蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织表达及其与临床病理特征关系,进一步评价二者在NSCLC发生、发展中作用及其之间相关性。方法应用免疫组织化学SP法,检测52例NSCLC及30例远癌正常肺组织Bmi-1和C-myc蛋白表达情况。结果肺癌组织Bmi-1和C-myc蛋白的阳性表达率分别为67.3%(35/52)、75.0%(39/52),均明显高于正常肺组织的13.3%(4/30)、6.7%(2/30),且阳性表达强度差异有显著性(Z=-4.837、-5.907,P<0.01);肺癌组织中Bmi-1及C-myc蛋白阳性表达均与癌组织的TNM分期及有无淋巴结转移有关(Z=-2.596^-2.056,P<0.05),而与病人的性别、年龄、组织类型等无关(Z=-1.775^-0.382,P>0.05);C-myc蛋白阳性表达还与癌组织的分化程度有关(Z=-2.056,P<0.05),而Bmi-1蛋白阳性表达与其无关。肺癌组织中二者表达呈显著正相关(r=0.463,P<0.01)。结论 Bmi-1与C-myc蛋白在NSCLC发生发展、浸润转移中发挥着重要作用。

转化生长因子β1、表皮生长因子受体表达与非小细胞肺癌淋巴结转移及预后的关系

目的：探讨转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）在非小细胞肺癌中的表达及意义。方法：应用免疫组化法检测了１２１例非小细胞肺癌标本中ＴＧＦβ１、ＥＧＦＲ的表达。结果：ＴＧＦβ１在肺癌中的阳性表达分为间质型和胞浆型，总阳性表达率为７７．７％。ＴＧＦβ１的阳性表达类型与肺癌的淋巴结转移及预后有关，淋巴结转移阳性组ＴＧＦβ１的单一间质阳性表达率显著低于淋巴结阴性组，而单一胞浆阳性表达率高于淋巴结阴性组；半年内死亡组的ＴＧＦβ１单一间质阳性表达率低于５年以上生存组，而间质胞浆均阳性的表达率及单一胞浆阳性表达率则高于５年以上生存组（Ｐ均＜０．０５）。ＥＧＦＲ阳性表达率为４３．８％，其表达与淋巴结转移无关；与患者预后关系明显，ＥＧＦＲ阳性表达者预后差（Ｐ＜０．０５）。结论：ＴＧＦβ１、ＥＧＦＲ表达与肺癌恶性生物学行为关系明显。

VEGF mRNA、KDR mRNA及蛋白在非小细胞肺癌中表达的意义探讨

目的探讨非小细胞肺癌中血管内皮生长因子(VEGF)、受体KDRmRNA和蛋白表达的意义。方法应用原位杂交技术及免疫组织化学PV-9000法分别检测30例新鲜非小细胞肺癌标本中VEGFmRNA、KDRmRNA及蛋白的表达。结果VEGF、KDRmRNA和蛋白均主要分布在肺癌细胞、血管内皮细胞及纤维母细胞,肺癌细胞VEGFmRNA和蛋白的阳性率分别为66.67%(20/30)和60.00%(18/30),两者的表达有极显著正相关性(r=0.86,P<0.01);KDRmRNA和蛋白的阳性率分别为73.33%(22/30)和76.67%(23/30),两者的表达亦有极显著正相关性(r=0.7366,P<0.01);VEGFmRNA、KDRmRNA及相应蛋白在肺癌细胞中的表达均呈极显著性正相关(原位杂交r=0.853,免疫组化r=0.5148,均P<0.01);肺癌细胞VEGFmRNA、KDRmRNA及相应蛋白的阳性表达率在不同大小的3组肺癌标本间,差异均具有显著性(确切P=0.014,P=0.002;P=0.0087,P=0.0016);淋巴结有转移组的VEGFmRNA、KDRmRNA及相应蛋白在肿瘤细胞中的阳性表达率显著高于淋巴结无转移组者(确切P=0.007,P=0.003;P=0.0008,P=0.0073)。结论肺癌细胞产生的VEGF通过自分泌环作用于癌细胞上的KDR受体促进癌细胞生长;VEGF及KDR的检测可作为肺癌淋巴结转移的有效评估指标;VEGF及KDR有望成为肺癌治疗的新靶点。

原发性肺癌的凝集素定位研究

用6种凝集素对100例原发性肺癌进行7定位研究,结果发现:6种凝集素在肺癌中表现出不同的阳性率,且分布与组织学类型有关。西非单叶豆(BSL)、花生素(PNA)、荆豆素(UEA_1)的质膜阳性率及PNA的腔膜阳性率分别与鳞癌及腺癌的组织学分级的关系有显著性差异(P<0.05)。BSL质膜定位及阴性者在生存5年以上及半年内死亡的两组鳞癌之间有显著性差异(P<0.05)。提示PNA、DSL、PNA对肺癌有相对特异性,其出现和变化可能有助于肺癌的诊断,并有助于对患者预后的评估。

牛磺酸和支链氨基酸对大鼠肝细胞氧化损伤的保护作用

①目的 探讨牛磺酸和支链氨基酸对CCl4致大鼠体外肝细胞损伤的保护作用及其可能机制。②方法 实验分为对照组、损伤组、牛磺酸 (Tau)组、牛磺酸和支链氨基酸 (T&B)组。用 1 0、2 0mmol/LCCl4诱导大鼠体外肝细胞过氧化损伤 ,并以 1 .5 0mmol/LTau和按一定比例混合的T&B复合物 0 .75 g/L进行肝细胞保护。测定孵育液中谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)活性及丙二醛 (MDA)含量。③结果 以 1 0mmol/LCCl4诱导肝细胞损伤时 ,Tau和T&B均能降低血清ALT、AST活性 ,减少MDA生成 ,与损伤组相比有显著差异 (F =4 .4 4 5～1 4 .0 71 ,q =3.82 5～ 4 .6 72 ,P <0 .0 1 )。以 2 0mmol/LCCl4诱导肝细胞损伤时 ,T&B能降低血清ALT、AST活性 ,减少MDA生成 ,与损伤组相比有显著差异 (q =4 .933～ 6 .0 0 1 ,P <0 .0 1 ) ,而Tau只能降低ALT、AST活性 (q =5 .6 0 3、5 .986 ,P <0 .0 1 ) ,但对MDA的生成影响不大 (q =1 .879,P >0 .0 5 )。 ④结论 牛磺酸和支链氨基酸对CCl4所致的肝细胞损伤具有保护功能 ,其保护作用可能是通过抗脂质过氧化作用实现的。

缺氧诱导因子2在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的研究胰腺癌组织中缺氧诱导因子2(HIF-2α)的表达及其与血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)的关系,分析胰腺癌中HIF-2α表达促进肿瘤血管生成的作用及与临床病理特征之间的关系。方法应用免疫组化SP法检测60例胰腺癌及相应正常胰腺组织中HIF-2α、VEGF蛋白的表达和分布,计数MVD,分析其间的相关性及其与肿瘤临床病理特征之间的关系。结果HIF-2α和VEGF在胰腺癌组织中的表达均明显高于正常胰腺组织,胰腺癌组织中MVD值明显高于正常胰腺组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。HIF-2α的表达与VEGF的表达及MVD值成正相关(P<0.05),HIF-2α与VEGF的表达与胰腺癌TNM分期、肿瘤大小有关。结论胰腺癌组织中HIF-2α呈过量表达,并与VEGF及MVD显著相关;它可能通过上调VEGF表达促进胰腺癌血管生成,进而影响胰腺癌的发生、发展。