大剂量睾酮对雌性小鼠肾损伤的组织学和形态计量学研究

临床上应用雄激素（睾酮）治疗功能性子宫出血，子宫肌瘤和慢性肾病等，用量大，疗程长，且能引起肾功能障碍。为了阐明肾损伤的病理组织学基础，我们给雌性小鼠以大剂量雄激素，用光镜和电镜观察了肾脏的病理组织学和超微病理学改变，并测定了肾小体、血管球和肾小管的形态计量学参数，结果显示：肾小体和肾小管，特别是滤过膜和近曲小管上皮均有十分明显的细胞和亚细胞水平改变；近曲小管的截面积、等效体积、周长、最大直径、最小直径、等效直径和形状因子等７项参数与正常对照组相比，也有十分显著的差异。因此。

胚胎干细胞移植对急性损伤肝脏的作用

目的探索胚胎干细胞移植在急性损伤肝脏中的存活和分化情况。方法用四氯化碳(CCl4)制备小鼠急性肝损伤模型,将BrdU标记的来源于小鼠原始生殖细胞的胚胎干细胞经静脉移植于模型动物体内,分别于移植后2周、4周取出肝脏,用免疫组织化学、免疫荧光双重染色和PAS染色方法检测移植细胞在受体小鼠肝内的分布、存活、白蛋白的表达和糖原代谢。结果急性损伤小鼠肝脏可见大量肝细胞空泡样变性,有严重出血现象;2周时损伤肝内可见炎性细胞浸润和未吸收的出血区;4周时仍见少量炎性细胞浸润。干细胞移植2周,肝小叶内可见散在分布的BrdU和ALB双阳性着色细胞,PAS染色呈阳性反应;部分小细胞呈BrdU单阳性着色;损伤移植组的肝小叶结构基本恢复。移植4周,损伤肝小叶结构正常,小的BrdU阳性细胞数量增多。结论原始生殖细胞可以在急性损伤肝脏中存活,并分化为肝细胞和肝小叶内的其他细胞,并明显改善损伤肝的组织结构。

大鼠生后发育期间胰岛胰高血糖素细胞免疫组织化学研究

用免疫组织化学ＰＡＰ法，显示胰岛Ａ细胞，观察大鼠生后发育期间全胰胰岛Ａ细胞的形态、分布和形态计量变化规律。结果表明：成年Ａ细胞常呈多边形并具有突起，主要分布在胰岛周边部。生后１８天后突起明显，多伸达血窦或其它胰岛细胞间。Ａ细胞形态计量表明其体密度和面数密度在生后１天最低，１８天达峰值，２８天接近成年水平。本文结果为进一步研究Ａ细胞功能提供了形态学依据。

海风藤酮对小鼠抗着床作用的免疫组织化学观察

目的观察海风藤酮对小鼠胚泡着床的影响。②方法未经产雌性昆明小白鼠于妊娠第２天，一侧子宫角内分别注射不同剂量海风藤酮（５，１０，２０，４０，６０μＬ）作为实验组，另一侧子宫角注射相应剂量的生理盐水为对照。于妊娠第８天及第１０天，取子宫组织做常规石蜡切片，ＨＥ及免疫组织化学染色，光镜观察。③结果注入海风藤酮（≥２０μＬ）组子宫蜕膜变薄，层粘连蛋白（Ｌｎ）免疫阳性物减少，纤粘连蛋白（Ｆｎ）免疫阳性物增多，并伴有不同程度胚胎发育迟缓及退化等改变。大剂量海风藤酮（≥４０μＬ）组部分动物子宫内膜无蜕膜反应，而且胚胎已消失。④结论海风藤酮通过拮抗血小板激活因子影响蜕膜反应，并使Ｌｎ及Ｆｎ的量和分布发生异常改变。这可能是该药抗着床作用的重要途径之一。

大鼠心房肌组织化学和超微结构的研究 Ⅴ.鼠胚和新生大鼠心脏心房肽免疫组织化学研究

用免疫酶组织化学Sternberger过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)方法,研究了鼠胚和新生大鼠心脏心房肽免疫反应颗粒的发生和分布。鼠胚龄以大鼠受孕天数计算。下午9~10h将雌、雄大鼠同笼,次日清晨检查雌性大鼠阴道中出现精子,定为大鼠受孕第1d。在大鼠受孕第12~20d每天下午取材;新生大鼠为出生后6h内取材。共用鼠胚和新生大鼠41只,各天所用鼠胚数量为3~5只。

鼠胚和新生大鼠心房肌心房肽免疫组织化学研究

用免疫组织化学方法研究了鼠胚和新生大鼠含心房肽免疫反应颗粒的心房肌细胞的发生和分布。结果表明,心房肽免疫反应颗粒出现于胚13天的少数心房肌细胞。随胚胎发育,含免疫反应颗粒的心房肌细胞增多,胞质内反应颗粒也增多,它们主要位于细胞核周围。大部分含反应颗粒的心房肌细胞分布在心房腔侧的小梁内,而在心外膜侧则逐渐减少。无反应颗粒的肌细胞主要位于靠心房外膜侧和房间隔内。本文的结果提示,心房肌细胞的特殊分化在胚胎早期业已开始,在发育过程中,有些细胞分化成心房肽免疫反应阳性细胞,有些细胞仍为心房肽免疫反应阴性。这种分化特点可能与心房的功能发育有关。

阿霉素对大鼠肝细胞的毒性及中药六君子汤对肝细胞的保护作用

用电镜细胞化学方法观察了阿霉素（ＡＤＭ）对大鼠肝细胞的毒性及中药六君子汤的保护作用。ＡＤＭ所引起的肝细胞胞质空泡化、胆小管轻度扩张和微绒毛短缩，可明显地被预先投入的六君子汤防止。细胞化学观察显示ＡＤＭ使肝细胞的５＇－核苷酸酶和细胞色素Ｃ氧化酶活性降低，而预先投入六君子汤再给予ＡＤＭ则其酶活性及分布与对照组无明显差别。本研究表明：ＡＤＭ可在亚细胞水平致肝细胞损伤，而预先投入六君子汤则可预防ＡＤＭ的毒性作用。

几种脊椎动物心肌细胞的超微结构观察

①目的进一步了解动物心肌细胞的种属特性。②方法应用电子显微镜对鲤、蟾蜍、鳖和家鸽等几种脊椎动物心肌细胞进行了观察。③结果这几种动物心肌细胞的侧面连接较多见。除家鸽外，心肌细胞的肌原纤维的排列比较松散。所观察各种属动物的心肌细胞均含有单位膜包绕的特殊颗粒，以心房肌细胞为多，但这几种动物心肌细胞的特殊颗粒在大小、形态、分布等方面均有明显差异。家鸽心肌细胞的特殊颗粒小，常成群分布于肌膜下方，并可见颗粒外排迹象。其它种属的特殊颗粒大小不等，多位于核周区。横小管系统以家鸽心室肌最易辨认，其它均少见。家鸽心肌细胞中的肌原纤维较其它动物密集，且排列整齐。④结论脊椎动物心肌细胞的超微结构有种属特性。

血小板激活因子对精子的趋化作用及其机制

目的体外观察血小板激活因子（ＰＡＦ）对小鼠附睾精子和人成熟精子的趋化作用以及对受精的影响。②方法在微趋化室下层孔内加入２７μＬ新鲜制备的精子悬液，上层孔内加入不同质量浓度ＰＡＦ，ＵＲ－１２５１９（ＰＡＦ受体阻断剂），之间以多聚碳核孔滤网分隔，３７℃孵育，用经特殊处理的玻片封闭，反转微趋化室，离心，相差显微镜下计数玻片上的精子数。用ＵＲ－１２５１９预处理小鼠精子，通过体外受精技术观察受精率及早期胚胎发育。③结果随ＰＡＦ质量浓度的增加，聚集于上层孔内的精子逐渐增多，当ＰＡＦ≥１．０ｍｇ／Ｌ时，聚集的精子数量明显增多，与对照组比较，差异有极显著性（ｚ＝３．８２～４．８１，Ｐ＜０．０１）；当ＵＲ－１２５１９质量浓度增加（＞１．０ｍｇ／Ｌ）时，ＰＡＦ吸引精子的作用受抑。体外受精实验显示，经ＵＲ－１２５１９预处理的精子，受精率明显低于正常，早期胚胎发育亦明显受抑。④结论ＰＡＦ对小鼠附睾精子及人成熟精子有趋化作用，这种作用能被其受体阻断剂所抑制。ＵＲ－１２５１９对小鼠精－卵体外受精及其胚胎的早期发育均有抑制作用。

血小板激活因子受体m RNA在小鼠附睾精子内的表达

①目的 检测血小板激活因子受体（ Ｐ Ａ Ｆ Ｒ）ｍ Ｒ Ｎ Ａ 在小鼠附睾精子内的表达，探讨 Ｐ Ａ Ｆ Ｒ 对受精过程的影响。②方法 分离提取小鼠附睾精子ｍ Ｒ Ｎ Ａ，经逆转录（ Ｒ Ｔ）合成 Ｐ Ａ Ｆ Ｒｃ Ｄ Ｎ Ａ．利用聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ）扩增 Ｐ Ａ Ｆ Ｒｃ Ｄ Ｎ Ａ， Ｄ Ｎ Ａ 序列分析验证扩增产物的准确性。③结果 小鼠附睾精子表达 Ｐ Ａ Ｆ Ｒｍ Ｒ Ｎ Ａ； Ｄ Ｎ Ａ 序列分析验证 Ｐ Ｃ Ｒ产物为小鼠 Ｐ Ａ Ｆ Ｒｃ Ｄ Ｎ Ａ．④结论 小鼠附睾精子有 Ｐ Ａ Ｆ Ｒｍ Ｒ Ｎ Ａ 的表达。

大鼠生后发育期间胰岛D与A细胞相互关系的形态学观察

①目的观察正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠生后发育期间胰岛生长抑素细胞（Ｄ细胞）与胰高血糖素细胞（Ａ细胞）间形态学关系，以探讨两者间功能调节的机理。②方法正常雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠２０只，分为生后７，１８，４５ｄ及成年组，每组５只。常规石蜡包埋，免疫组织化学ＰＡＰ双重染色，分别显示大鼠胰岛Ｄ细胞与Ａ细胞，光镜观察。③结果胰岛Ｄ细胞突起明显，与Ａ细胞形成胞体－胞体、突起－胞体间的紧密接触，并可见Ｄ细胞呈新月形或其长胞突呈半环状及环状，部分或全部包绕Ａ细胞。外分泌部也可见Ｄ细胞与Ａ细胞接触紧密。生后７ｄ与成年组相比Ｄ细胞与Ａ细胞的相邻百分数具有显著性差异（Ｆ＝４．０６，ｑ＝４．７５，Ｐ＜０．０５），其他各组间差异无显著性（ｑ＝０．６５～３．６２，Ｐ＞０．０５）。④结论Ｄ细胞可能通过旁分泌直接调节Ａ细胞的功能活动。

小鼠脑垂体前叶细胞线形溶酶体的高压电镜观察

①目的探讨脑垂体前叶细胞线形溶酶体的功能及与圆形溶酶体之间的关系。②方法应用高压电镜细胞化学方法,观察小鼠脑垂体前叶5种内分泌细胞中酸性磷酸酶阳性的线形溶酶体。③结果线形溶酶体存在于脑垂体前叶5种内分泌细胞中,线形结构可一侧膨大或与圆形溶酶体相连并发出分支互相连接,形成一个立体的网状结构。④结论线形溶酶体并不是一种特殊类型的溶酶体,线性结构及其相连的圆形溶酶体可以认为是一个整体。

大鼠生后发育期胰高血糖素细胞超微结构的观察

①目的观察正常Wistar大鼠生后发育期间胰岛胰高血糖素细胞(A细胞)超微结构的变化,探讨其发育规律。②方法正常Wistar大鼠9只,雌雄兼有。分为生后7,19d和成年3组。常规透射电镜技术观察。③结果A细胞以多边形为主,胞核多为圆形。常见有胞质突起伸达附近毛细血管壁及其它胰岛细胞之间。成年大鼠A细胞内细胞器不发达,只有少量粗面内质网、小型高尔基复合体及线粒体、胞质内空泡多见;膜包颗粒较多,或散布于整个胞质中,或呈极性分布于细胞靠近毛细血管的一侧及突起内;分泌颗粒多呈圆形,含有高电子密度圆蕊,周围有窄晕。生后7d,A细胞内粗面内质网、高尔基复合体及线粒体均较成年组发达,并常见呈同心圆排列的板层髓样体;分泌颗粒也较多见;胞核大而圆,核质较大。生后19d,A细胞内细胞器最为发达,常见呈扩张状态的粗面内质网及核周池、扁平囊状的高尔基复合体及长短不一的杆状线粒体;次级溶酶体较多见;分泌颗粒较少,导管上皮细胞间、腺细胞间及间质内有的细胞含有类似于A细胞的分泌颗粒。④结论大鼠生后发育期间胰岛A细胞不断发育,约在生后18d达高峰。

二氧化碳激光对免疫器官的影响

将雄性成年豚鼠18只分为3组,正常组2只,激光组与手术刀组各8只。分别用激光与手术刀作胃切割手术。术后第3、5、7、14天取脾、淋巴结、胸腺,固定于冷Carnoy液,10%福尔马林中,石蜡切片,HE染色,Csaba法染肥大细胞,甲绿-哌喏宁稀释法显示细胞的RNA含量(含量多少以+、++表示),光镜下观察。观察结果:1.脾(1)激光组:术后第3天,脾小体生发中心大淋巴细胞的胞质中RNA为++,在脾小体外周可见浆细胞,其胞质中RNA为++。

大鼠胚心室肌心房肽样物质定位的研究

本文用免疫组织化学方法研究了大鼠胚(13~19天)心房肽样免疫反应物质在心室肌细胞的定位,并在电镜下观察了大鼠胚心室肌细胞的超微结构。所得结果表明,心房肽类物质不仅存在于心房肌,亦在心室肌细胞内。含心房肽样免疫反应物质的细胞主要位于左心室,尤其是靠内膜侧的小梁状或网格状结构内。左右心室壁内这种细胞很少。心室肌细胞内所含心房肽样免疫反应颗粒的数量较同期心房肌细胞少。在电子显微镜下,见部分心室肌细胞含有与心房特殊颗粒(含心房肽类物质)相似的电子致密颗粒,它们大多靠近高尔基复合体。部分细胞不含这种颗粒,前者可能为心房肽样免疫反应阳性细胞,后者可能为阴性细胞。

农吉利碱对HeLa细胞系的形态学影响

我们观察了农吉利碱对HeLa细胞系形态学的影响。HeLa细胞培养于含有RPMI 1640、10%小牛血清及青、链霉素的培养液中(pH 7.2),并置37℃恒温培养箱培养。实验时将细胞接种于培养瓶内,同时置入培养瓶中1张盖片。在接种后的第3天,将其分为不加药的对照组和加药的实验组。实验组按加药的浓度不同,再分为每ml培养液含农吉利碱100μg、300μg、500μg 3组,每组各2瓶。