微血管减压术治疗原发性三叉神经痛的临床分析

目的探讨原发性三叉神经痛微血管减压术手术疗效及相关因素,总结手术体会。方法回顾我科实施微血管减压术的67例原发性三叉神经痛患者,结合年龄、病程、临床分型、压迫血管类型、近期预后等因素进行临床分析。结果 67例患者术后疼痛均完全缓解,无后期并发症。结论三叉神经微血管减压术是针对三叉神经痛发病机制的有效治疗措施,目前成为首选治疗方法 。

全骨髓贴壁法获纯化骨髓间充质干细胞向神经干细胞的诱导分化

目的:来源于骨髓间充质干细胞的神经干细胞是最近研究的一个热点。实验拟进一步验证通过全骨髓贴壁法分离纯化骨髓间充质干细胞并诱导分化为神经干细胞的效率,并对其的体内外标记进行了观察。方法:实验于2006-11/2007-05在青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所完成。①实验材料:选取出生4周左右Wistar大鼠,雌雄不拘,SPF级,体质量200g左右,由青岛市实验动物和动物实验中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法:选用出生4周左右Wistar大鼠,由其股骨和胫骨分离纯化骨髓间充质干细胞,加碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子诱导其分化为神经干细胞,并进行免疫组织化学鉴定。以5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记神经干细胞,在24孔板中进行细胞免疫组织化学和免疫荧光鉴定。将标记的神经干细胞定位注入大鼠基底节区,1周后取脑作石蜡切片,进行免疫组织化学和免疫荧光染色。结果:获得了较纯化的骨髓间充质干细胞,经诱导72h后,部分细胞增殖分裂成小圆形,呈团簇状半悬浮状态。继续培养72h可见细胞呈现典型神经元样改变,细胞伸出两个或多个突起,胞体呈多角形或不规则形,折光性较强,细胞突起之间相互连接成网状,可见细胞核及核仁,经诱导后有巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白阳性细胞表达。采用BrdU掺入DNA合成期的神经干细胞,1周后体内外标记阳性率>85%。结论:采用全骨髓贴壁法可获得较纯化的骨髓间充质干细胞,其在适宜的诱导分化条件下可诱导分化神经干细胞。BrdU可作为神经干细胞体内示踪的理想标记物。

经皮半月神经节射频热凝术治疗三叉神经痛602例疗效观察

本文报告经皮半月神经节射频热凝术治疗三叉神经痛602例,有效率为98％。作者介绍了利用自制“穿刺定位尺”行半月神经节穿刺的方法,靶点的命中率达98.8％,对此种治疗的力法,优点及其并发症的防治作了简要讨论。

人胚胎纹状体来源神经干细胞的体外培养(英文)

背景: 目前神经干细胞多由动物获得,不适合人类临床移植治疗。目的: 探索体外环境下人胚胎纹状体来源神经干细胞的培养方法,同时观察其生物学特性。方法: 取经水囊引产的孕8-16周人胚胎纹状体,体外用无血清DMEM培养基进行培养,待细胞形成神经球后进行传代,并应用含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养液进行诱导分化。结果与结论: 体外培养的人胚胎纹状体来源神经干细胞生长迅速,表达神经干细胞标志物nestin。克隆形成实验显示细胞克隆形成率为6.0%-7.0%;BrdU掺入实验显示细胞增殖率为37.9%。免疫荧光染色显示经诱导分化的细胞表达神经元标志物Ⅲ型β微管蛋白、星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白及神经干细胞标志物nestin,但不表达少突胶质细胞标志物髓鞘碱性蛋白。可见人胚胎纹状体来源神经干细胞在体外无血清条件下可保持其生物学特点,具有自我更新能力,经胎牛血清诱导后可向神经元及星形胶质细胞分化。

眶上锁孔神经内镜下前循环动脉瘤夹闭手术

目的探讨眶上锁孔入路神经内镜下夹闭前循环动脉瘤的可行性及其临床意义。方法对13例前循环动脉瘤病人经眉弓小切口眶上锁孔入路进行夹闭手术,全程应用神经内镜。13例病人中,男性,8例,女性,5例;年龄:43～71岁。13例病人共14个动脉瘤,3个后交通动脉瘤,7个前交通动脉瘤,4个大脑中动脉瘤。3个未破裂动脉瘤,11个破裂动脉瘤。根据病人手术前的临床表现进行Hess-Hunt分级:1级2例;2级10例,3级1例。结果手术中均能广视角显露动脉瘤、载瘤动脉及周围的走行血管,无误夹闭、载瘤动脉狭窄及夹闭不全情况发生。结论眶上锁孔入路可以提供充分的手术空间,神经内镜下夹闭前循环动脉瘤,可以广视角观察动脉瘤及其周围的解剖结构,提高颅内动脉瘤的手术效果。

海绵窦区颅神经血供的显微解剖及临床应用研究

目的海绵窦区显微手术的不断开展,迫切需要海绵窦区颅神经血供的显微解剖资料。方法借助手术显微镜对40例福尔马林固定的成人头颅的颈内动脉(internal carotid artery,ICA)海绵窦段分支及颅神经血液供应进行了显微解剖研究。结果动眼神经和滑车神经的近段主要由小脑幕动脉供血、外展神经近段主要由脑膜背侧动脉分支供血。三者的远段主要由海绵窦下动脉前支供血;三叉神经半月神经节及远端分支主要由海绵窦下动脉供血。结论海绵窦下动脉是供应所有入眶颅神经最重要的供血动脉,在海绵窦区进行显微手术时,保护好各颅神经的血供是减少术后颅神经损伤、获得良好疗效的关键。

树突状细胞的培养及其诱导的神经胶质瘤体外杀伤作用研究

目的 研究负载肿瘤抗原的树突状细胞 (DCs)活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTLs)对神经胶质瘤细胞的体外杀伤效应 ,探讨其用于临床治疗的可行性。方法 体外原代培养 12例胶质瘤细胞 ,冻融法获取胶质瘤细胞抗原 ,联合应用粒细胞 /巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素 4和肿瘤坏死因子 α等 ,对人外周血单核细胞进行体外诱导来获取DCs并负载肿瘤抗原 ,激活自体T淋巴细胞 ,制备特异性CTLs,MTT法检测对胶质瘤细胞的体外杀伤效应。结果 负载胶质瘤抗原的DCs激活的CTLs对胶质瘤细胞有明显的杀伤作用 ,显著高于K5 6 2细胞对照组 ,并且杀伤率随着效靶比的增加而增加。结论 从人外周血中诱导的DCs负载胶质瘤抗原后 ,激活的CTLs在体外对胶质瘤能产生高效的杀伤作用 。

小区域备头皮在微血管减压术治疗三叉神经痛和面肌痉挛中的应用

目的探讨小区域备头皮在微血管减压术治疗三叉神经痛和面肌痉挛术中应用的可行性。方法三叉神经痛和面肌痉挛女性病人62例(观察组),术前备皮仅理去手术区域的头发,术中先用外科贴膜贴于手术区及头发上,然后距切口线周围头发2 mm处剪去贴膜,用20 g/L碘酊擦试和体积分数0.75乙醇脱碘,消毒后再贴一层无菌手术贴膜,然后常规铺手术巾,铺完手术巾后再贴一层有引流袋的手术贴膜;以同期全部剃发备皮的病人106例作为对照。观察两组的切口愈合情况及抗生素应用时间。结果两组切口均无感染。观察组抗生素平均使用7.2 d,对照组抗生素平均使用6.8 d。结论小区域备头皮在微血管减压术治疗三叉神经痛和面肌痉挛术中应用是安全的。

神经导航辅助显微手术治疗脑中央沟周围肿瘤

目的 评价神经导航辅助显微手术在治疗脑中央沟周围肿瘤中的应用价值。方法 在 2 6例脑中央沟周围肿瘤的显微手术中 ,应用神经导航系统实时指导手术操作。对神经导航系统的精确性、治疗效果进行分析。结果 2 6例平均坐标误差为 ( 2 71± 1 0 3 )mm ,肿瘤全切除 19例 ,次全切除 6例 ,大部切除 1例。术后 1周神经功能改善或无变化 2 1例 ,加重 5例 ,无手术死亡。结论 在脑中央沟周围肿瘤的显微手术中 ,神经导航系统可实时指导手术操作 ,有助于提高肿瘤全切除率 ,减轻对脑组织的损伤 ,降低神经功能缺失等并发症 。

树突状细胞诱导的CTLs与CIK及LAK细胞对神经胶质瘤杀伤作用比较

目的 比较树突状细胞（DCs）诱导的细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）、细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）和淋巴细胞因子激活的杀伤细胞（LAK细胞）对神经胶质瘤的体外杀伤作用。方法 向外周血单个核细胞分别加入不同细胞因子组合，诱导出DCs、CIK细胞和LAK细胞，DCs负载胶质瘤抗原后激活CTLs，MTT法检测对胶质瘤细胞的体外杀伤效应。结果 CTLs对胶质瘤细胞的杀伤作用明显强于CIK细胞和LAK细胞（F=6．42～8．26，q=8．02～10．18，P〈0．01）；CIK细胞对胶质瘤的杀伤作用明显强于LAK细胞（q=8．43～9．24，P〈0．01）。CIK细胞对K562细胞的杀伤作用明显强于LAK细胞和CTLs（F=5．36～7．69，q=7．23～9．56，P〈0．01），LAK细胞对K562细胞的杀伤作用明显强于CTLs（q=8．83～9．15，P〈0．01）。结论 从人外周血中诱导出的DCs负载胶质瘤抗原后，激活的CTLs在体外对胶质瘤细胞能产生高效而特异的杀伤作用，明显强于CIK细胞和LAK细胞，为临床应用DCs瘤苗奠定基础。

Caspase家族与颞叶癫痫神经元凋亡

颞叶癫痫（temporal lobe epilepsy，TLE）是指与颞叶皮层或颞叶内侧海马等结构发生相关病理改变导致的癫痫，临床主要表现为复杂部分性发作，以海马硬化为典型病理特征。以往研究认为神经元坏死是海马硬化的主要原因，但是近年的研究表明海马硬化可能与神经元的凋亡有关。动物实验证明短暂或持续的癫痫发作后可观察到实验动物脑内神经元的凋亡和检测到多种凋亡相关基因的表达。

神经生长相关蛋白与颞叶癫痫相关性的实验研究进展

癫痫是大脑神经元异常放电引发反复痫性发作为主要特征的常见神经系统疾病，而颞叶癫痫（temporal lobe epilpsy，TLE）作为癫痫发作中最常见的类型，也最容易发展为难治性癫痫。其中海马-脑边缘系统复杂的解剖关系在颞叶癫痫的发病过程中起着核心作用。有关电生理学研究证实，大脑边缘系统内存在边缘系统环路（Papez环路），

rhEPO通过调节JAK2/STAT5信号通路减少大鼠脑出血后神经细胞凋亡

目的探讨重组人促红细胞生成素rhEPO是否通过JAK2/STAT5信号通路减少脑出血后神经细胞的凋亡。方法将8周龄的Wistar雄性大鼠30只随机分3组:假手术组、ICH模型组、rhEPO组,每组10只。ICH模型组大鼠进行ICH造模,假手术组除不注血外,其余步骤同ICH模型组,rhEPO组术后5 min给予腹腔注射rhEPO,所有动物24 h后进行神经功能学评分,收集大鼠脑组织,利用原位缺口末端标记法检测神经细胞凋亡的变化;采用免疫组织化学SP法检测凋亡蛋白Caspase3表达;并采用Real-time PCR和Western blot检测磷酸化JAK2、磷酸化STAT5基因和蛋白表达情况。结果手术建立脑出血模型后24 h进行神经功能评分。按Longa5分制标准判定,ICH组4只评价为1分,3只评价为2分,2只评价为3分;rhEPO组治疗后,5只评价为1分,2只评价为2分,1只评价为3分,说明rhEPO可以改善大鼠脑出血后神经元损伤,恢复神经功能。与假手术组相比,ICH模型组和rhEPO组中神经元凋亡细胞及Caspase3的蛋白表达阳性细胞数明显增多(P<0.05),而rhEPO组中凋亡细胞与ICH模型组相比明显减少(P<0.05);与假手术组相比,ICH模型组和rhEPO组中JAK2和STAT5的蛋白表达和m RNA表达显著上升(P<0.05),与ICH模型组相比,rhEPO组中JAK2和STAT5的蛋白表达和m RNA表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论外源性rhEPO可以通过调节JAK2/STAT5信号改善大鼠脑出血后神经元损伤,对于神经系统具有保护作用。

大鼠杏仁核电刺激癫痫持续状态后颞叶癫痫模型海马区神经生长相关蛋白43的表达

目的探讨神经生长相关蛋白43(GAP-43)在大鼠杏仁核电刺激癫痫持续状态后颞叶癫痫(SE)模型海马区的表达及意义。方法健康雄性Wistar大鼠60只,分成4组:空白对照组、未刺激组、未发作组和发作组。空白对照组:不植入电极;未刺激组:植入电极未行电刺激;发作组:植入电极电刺激后15 d内、30 d内能观察到稳定的自发性反复发作(SRS)的大鼠归为发作组,其余归为未发作组。分别在15 d、30 d时,将标本应用RT-PCR及免疫荧光检测方法检测大鼠海马GAP-43的表达。结果致痫15 d,发作组、未发作组和未刺激组的GAP-43表达高于空白对照组,并依次降低(P<0.05)。致痫30 d,发作组和未发作组GAP-43表达仍高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);未刺激组与空白对照组水平相当,二者差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GAP-43参与了神经元损伤修复和突触重塑,其可能是颞叶癫痫的病理基础———突触重塑的重要分子机制。

神经内镜手术的临床应用

①目的 探讨神经内镜的临床应用效果。②方法 采用神经内镜行第三脑室造瘘术治疗梗阻性脑积水 5例 ,部分切除侧脑室三角区囊肿 1例 ,切除桥小脑角区胆脂瘤 1例。③结果 4例梗阻性脑积水病人症状缓解 ,其中 3例术后 3个月脑室恢复正常大小 ,1例术后 3个月脑室缩小 ;1例因术中出血改行侧脑室 腹腔分流术。 1例侧脑室三角区囊肿病人症状缓解 ,术后 2d复查囊肿体积缩小。胆脂瘤病人术后三叉神经痛症状消失。④结论应用神经内镜治疗梗阻性脑积水、脑室内囊肿、颅内胆脂瘤具有微创、安全、疗效好、并发症少等优点 ,是目前治疗此类疾病的较好方法。

SELDI蛋白芯片技术在中枢神经系统肿瘤研究领域中的应用

1994年Wilkins等首先提出了“蛋白质组”的概念,揭开了蛋白组学研究的序幕。蛋白组学是以蛋白质组为研究对象,研究机体的蛋白质组成、表达,了解蛋白质之间的相互作用,探索蛋白质功能与细胞生命活动规律的一门新兴学科。蛋白质组学技术的应用为疾病的发生、发展机制及诊疗方法的研究提供了新的手段。

成鼠骨髓基质细胞向神经干细胞诱导分化的实验研究

目的研究成鼠骨髓基质细胞体外培养的生长行为和分化情况。方法利用EGF、FGF-b等增殖及分化诱导因子和神经干细胞培养液进行培养,分化诱导,用细胞免疫组化染色进行细胞鉴定。结果成鼠骨髓基质细胞在体外培养中能形成细胞克隆团,具有增殖能力,并可分化出胶质细胞样细胞和神经元样细胞。结论骨髓基质细胞具有较强的自我更新及多向分化能力,在适宜的诱导分化条件下,可诱导为神经干细胞,分化出神经元和胶质细胞。