山东部分地区猫细小病毒、疱疹病毒、杯状病毒流行情况调查

为了解山东省猫细小病毒(FPV)、猫疱疹病毒1型(FHV-1)和猫杯状病毒(FCV)的流行情况,对来自5个不同地区的380份口鼻、粪便拭子进行三重PCR检测,同时对这3种病毒进行分离。结果显示,FPV的PCR检出阳性率为27.9%,FHV为5%,FCV为13.4%。对不同来源的拭子进行统计发现,来自宠物医院样本的FPV PCR检出阳性率最高,为43.8%;来自养猫户样本的FHV-1 PCR检出阳性率最高,为6.9%;来自流浪猫样本的FCV PCR检出阳性率最高,为44.1%。本调查分离的病毒为诊断试剂及疫苗研究打下了良好的基础。

抗非洲猪瘟病毒噬菌体展示单克隆抗体的筛选及表达

为构建抗非洲猪瘟病毒(ASFV)噬菌体单链抗体文库,并获得抗ASFV的单链抗体,本试验利用自然感染ASFV猪的外周血淋巴细胞提取的mRNA,反转录获得cDNA后分别扩增出猪IgG抗体重链和轻链的可变区基因,构建scFv单链抗体后连接至pComb3XSS载体,构建噬菌体抗体展示文库,经过3轮"吸附、洗脱、富集"的筛淘过程,成功获得1株能够与ASFV蛋白特异性结合的抗体,并验证了该抗体的反应能力。根据筛选得到的可变区序列构建完整抗体使用HEK293A细胞进行真核表达与验证。结果表明,成功构建了库容量约为9.2×10^(11)PFU/mL抗ASFV噬菌体单链抗体文库,筛选并得到1株与ASFV病毒蛋白亲和性较高的单链抗体,使用真核表达系统成功表达了该株重组抗体。该研究为ASFV的诊断和治疗奠定了一定基础。