SPE-HPLC法检测维生素D滴剂(软胶囊)中的有关物质

目的:建立固相萃取-高效液相色谱法(SPE-HPLC法)快速检测维生素D滴剂(软胶囊)中维生素D_(3)有关物质反式维生素D_(3)(杂质A)、7-去氢胆固醇(杂质B)、光甾醇3(杂质C)、异速甾醇3(杂质D)。方法:取内容物约1.2 g(约相当于维生素D_(3)1548 IU),精密称定,置于试管中,加入异辛烷4 mL,涡旋混匀,采用固相萃取小柱进行净化,以正己烷-乙酸乙酯(85∶15)为洗脱剂,无水乙醇为解吸剂;采用Luna Silica(2)100Å硅胶柱(150 mm×4.6 mm,3μm),以正己烷-正戊醇(996.5∶3.5)为流动相,采用加校正因子主成分自身对照法计算维生素D_(3)各杂质的含量。结果:前维生素D_(3)与植物油分离度>1.5。维生素D_(3)的线性范围为0.02~0.80μg·mL^(-1),r=0.9995;杂质A的线性范围为0.02~0.80μg·mL^(-1),r=0.9999;杂质B的线性范围为0.02~0.80μg·mL^(-1),r=0.9999;杂质C的线性范围为0.02~0.80μg·mL^(-1),r=0.9999;杂质D的线性范围为0.02~0.80μg·mL^(-1),r=0.9999。维生素D_(3)杂质A~D的平均回收率(n=9)为93.2%~102.9%。对3批维生素D滴剂(软胶囊)样品进行检测,结果已知杂质及其他最大单个杂质含量均≤0.5%,杂质总含量≤1.0%。结论:本方法经系统方法学验证,适用于维生素D滴剂(软胶囊)中维生素D_(3)有关物质的检测,且具有操作简便、快速、准确的优势,为脂溶性维生素D_(3)制剂的质量控制提供了技术保证。