局部应用CpG ODN治疗变态反应性结膜炎的实验研究

目的探讨局部应用CpG ODN对小鼠实验性变态反应性结膜炎的治疗作用和相关机制,以期为变态反应性结膜炎提供新的治疗策略。方法随机将24只6~8周雌性Balb/c小鼠分为4组：CpG ODN组、GpC ODN组、PBS组和正常对照组,每组各6只,鸡卵蛋白（OVA）免疫Balb/c小鼠建立变态反应性结膜炎动物模型,首次激发诱导变态反应性结膜炎成功后第4天双眼连续3d分别滴入CpG ODN（5g·L-1）、GpC ODN（5g·L-1）和PBS各10μL,治疗后的第4天观察眼部临床症状后处死动物,检测结膜组织切片中嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的变化、血清中IgG1、IgG2a含量和细胞分泌IL-4的水平,流式细胞仪对培养细胞的分子表达和含量进行分析。结果与GpC ODN对照组和PBS对照组比较,CpG ODN治疗组的主要指标变化为：（1）结膜组织切片中嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的数量明显减少,嗜酸性粒细胞每张切片上的细胞数分别为：CpG ODN组（10.00±0·92）个,GpC ODN组（17.00±1.06）个,PBS组（20.00±1·26）个。中性粒细胞每张切片上的细胞数分别为：CpG ODN组（15.00±1.36）个,GpC ODN组（32.00±2.83）个,PBS组（29.00±1.58）个;（2）血清中IgG2a的含量增加,IgG1/IgG2a比例下降（P〈0·01）;（3）细胞培养上清中的IL-4分泌下调,CpG ODN组（20.702±1.688）ng·L-1,GpC ODN组（27.201±1·274）ng·L-1,PBS组（30.534±2.576）ng·L-1;（4）CD4＋CD25＋和CD11c＋CD80＋MHCⅡ＋的细胞比例有所增加,其中CD4＋CD25＋细胞所占比例在CpG ODN组为9·55%,GpC ODN组为5.00%,PBS组为5.92%.CD80和MHCⅡ＋共表达的细胞占CD11c＋细胞比例在CpG ODN组为5.71%,GpCODN组为3.51%,PBS组为2.18%.但CpGODN治疗组对变态反应性结膜炎早期临床症状的改善没有明显作用（P〉0·05）。结论眼部应用CpG ODN能够逆转实验性变态反应性结膜炎小鼠激发阶段体内的Th2型应答,改变血清中抗体亚型,减轻结膜组织局部的晚期病理反应,对实验性变态反应性结膜炎具有显著的治疗作用。