EB病毒在子宫颈癌中的表达

目的:分析子宫颈EB病毒感染与宫颈癌的关系。方法:采用PCR方法,分别检测28例宫颈癌、39例宫颈上皮内瘤变和13例正常宫颈中的EBV表达。结果:EBV阳性表达率在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变、正常宫颈细胞中分别为68%、51%和15%,在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变中的表达高于正常宫颈组织,三组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:EBV感染与宫颈癌发病密切相关。

中药联合更昔洛韦对HCMV阳性脑肿瘤干细胞移植瘤的作用

目的了解莪术、冬凌草及白花蛇舌草复方提取物联合更昔洛韦对人巨细胞病毒(HCMV)阳性脑肿瘤干细胞移植瘤的作用。方法用单克隆培养法从U251胶质瘤细胞系中分离出脑胶质瘤干细胞,用流式细胞仪检测其CD133阳性细胞比例;用HCMV AD169感染脑胶质瘤干细胞,接种到40只BALB/c裸鼠脑内。2周后,将荷瘤鼠随机分为空白对照组(C组)、复方中草药组(A组)、更昔洛韦组(B组)及复方中草药联合更昔洛韦组(D组)。其中C组采用生理盐水灌胃,其余各组给予相应药液灌胃,连续给药2周。处死裸鼠,取出瘤组织做病理学检查及IE、CD34免疫组化检查,计算各组移植瘤微血管密度(MVD);采用qRT-PCR技术检测各组移植瘤中Bcl-2mRNA表达情况。结果 U251肿瘤干细胞在无血清培养基中成球生长,第二代肿瘤球中CD133阳性表达细胞比例为99.89%。各组移植瘤与正常组织分界明显,瘤内出血坏死,移植瘤IE、CD34表达阳性。复方中药提取物和更昔洛韦抑制移植瘤微血管生成的主效应差异有显著性(F=8.29、8.05,P<0.05),联合用药抑制移植瘤微血管生成较单独用药组效果明显,二者无交互作用(P>0.05)。qRT-PCR检测结果显示,复方中草药提取物和更昔洛韦抑制胶质瘤Bcl-2mRNA表达的主效应差异有显著性(F=9.43、6.69,P<0.05),二者无交互作用(P>0.05),A组和B组Bcl-2mRNA相对表达量低于C组,D组低于A组、B组和C组(F=9.43、6.69,P<0.05)。结论自拟复方中草药提取物联合更昔洛韦对HCMV阳性恶性胶质瘤生长有抑制作用。

感染HCMV的U251干细胞裸鼠大脑移植瘤模型的建立

研究人巨细胞病毒(HCMV)感染的U251干细胞(GSC_S)裸鼠颅内成瘤情况。用单克隆培养法从U251细胞系中分离出GSC_S,采用流式细胞仪检测分离出的GSC_S中CD133的表达,感染HCMV病毒,制备细胞密度为1×10~7个/mL的GSC_S悬液。取20只SPF级BALB/c裸鼠腹部麻醉,固定在立体定位仪上,在裸鼠颅脑钻一小孔,将3μL干细胞悬液缓慢接种于裸鼠颅内,随机分为HCMV感染组和未感染HCMV组。观察HCMV对肿瘤生长及裸鼠存活情况,处死濒死裸鼠取脑组织做免疫组化检测HCMV感染组胶质瘤内IE蛋白是否持续表达及HCMV感染对胶质瘤干细胞分化为血管的影响。结果显示,经单克隆法分选出的GSC_S在无血清培养基中成球生长;经流式细胞仪检测,分离出的GSC_S中CD133比例为98.00%;裸鼠脑内出现膨胀性生长的肿瘤;HCMV感染组肿瘤组织中检测到IE高表达,HCMV感染可促进CD133阳性胶质瘤干细胞分化为CD34阳性血管内皮细胞。以上结果表明,HCMV的IE蛋白能在通过此方法建立的HCMV阳性移植瘤中持续表达,且HCMV能促进GSC_S分化为血管内皮细胞。