腺病毒介导FOXA2基因过表达对胃癌细胞生长影响

目的探讨腺病毒介导的FOXA2基因过表达对胃癌细胞生长的影响及其机制。方法根据人叉头蛋白A2(FOXA2)mRNA的序列,设计合成FOXA2基因的引物,扩增获得全长FOXA2,构建腺病毒表达载体,进一步获得腺病毒Ad5.FOXA2。应用腺病毒Ad5.FOXA2感染胃癌细胞系,实时荧光定量PCR和Western blot方法检测FOXA2基因和蛋白表达情况。应用Western blot、甲基噻唑基四唑(MTT)、细胞划痕实验等方法,检测FOXA2基因对胃癌细胞增殖和迁移的作用。结果成功构建了携带FOXA2的腺病毒Ad5.FOXA2。Ad5.FOXA2感染胃癌细胞系研究显示,Ad5.FOXA2组FOXA2蛋白表达是对照组和Ad5.GFP组的3.85倍;各组FOXA2mRNA表达量比较,差异有统计学意义(F=6.896,P<0.05)。MTT检测显示,Ad5.FOXA2抑制了胃癌细胞的增殖及迁移。Western blot检测显示,Ad5.FOXA2抑制了c-Myc、β-catenin、Cyclin D1以及PCNA蛋白的表达。结论腺病毒Ad5.FOXA2抑制胃癌细胞生长,其作用是通过抑制c-Myc、β-catenin、Cyclin D1和PCNA蛋白的表达实现的。