医学检验专业临床检验技能考核与评价体系的建立及实践

①目的 建立医学检验专业临床检验技能考核与评价体系并探讨其意义。②方法 根据医学检验专业教学实际情况 ,探索了临床检验技能考核模式 ,优化了考核项目 ,制定了考核目标和基本要求 ,建立了医学检验专业临床检验技能考核与评价体系 ,并应用于教学实践。③结果 该考核与评价体系适合于学生的临床检验技能考核与评价 ,经过临床检验技能考核与评价体系培训学生的临床检验技能 ,其考核成绩及临床实习成绩均明显高于未经过该体系培训的学生 ,差异有显著性 (F =5 .6 83～ 12 .347,q =11.90 1～ 18.736 ,P <0 .0 1)。④结论 医学检验专业临床检验技能考核与评价体系对培养医学检验专业学生创新思维和创新能力具有重要意义。

间苯三酚分光光度法测定硫酸软骨素的研究

目的 :建立一种快速准确的硫酸软骨素测定方法。方法 :利用含有间苯三酚的无机酸与样品中硫酸软骨素反应生成有色产物进行分光光度分析。结果 :10 0℃反应 30min在波长 5 5 8nm处测定硫酸软骨素 ,在 0 .10～ 1.0mg/ml范围内线性关系良好 (r =0 .9993) ,具有较好重现性。 结论 :此法操作简便、结果准确。

五氯酚对人胎盘碱性磷酸酶抑制的研究

监测人胎盘碱性磷酸酶在不同浓度五氯酚溶液中活力与荧光光谱的变化 ;测定五氯酚对其抑制的类型及pH对其抑制的影响 .结果显示 :低浓度的五氯酚 (<1 0mmol/L)使酶活力及其荧光强度迅速下降 ,发射峰位明显红移 ;继续提高五氯酚浓度 ,其活力与荧光强度逐渐下降 ,发射峰位仍在红移 ;五氯酚浓度为 5 0mmol/L时 ,荧光淬灭 ,但酶仍保留 5 1 4%的活力 ;五氯酚浓度高达 10 0mmol/L时 ,酶剩余活力为 30 0 % .进一步实验表明五氯酚使L 色氨酸的荧光强度降低 ,并伴有发射峰位的红移 ,当五氯酚浓度为 5 0mmol/L时 ,L 色氨酸的荧光淬灭 .五氯酚是人胎盘碱性磷酸酶的反竞争性抑制剂 ,其抑制常数 (Ki)为 3 86mmol/L .其抑制也受溶液 pH影响 ,pH <7 5时 ,对酶无抑制 ;pH为 7 5～ 10 5时 ,随 pH的增加 ,抑制作用逐渐增强 .提示五氯酚能够进入酶分子内部使其荧光淬灭 ,并抑制了酶活力 ;表明酶活力抑制与五氯酚的解离状态有关 .

维生素C、B_6和牛磺酸增强叶酸防畸效果的观察

目的 观察维生素 C、B6和牛磺酸对叶酸防畸效果的影响。方法 以环磷酰胺致胎鼠发育畸形动物模型 ,分别对孕鼠补充叶酸 ;叶酸 +VC+VB6+牛磺酸 ,观察防畸效果。结果 补充上述营养素者可使胎鼠脑膨出率下降 (P<0 .0 1 ) ,胎鼠平均体重增加 (P<0 .0 5 ) ,上枕骨骨化程度提高 (P<0 .0 1 )。补充叶酸 +VC+VB6+牛磺酸组 ,与单独补充叶酸组比较 ,脑膨出率降低明显 (P<0 .0 5 ) ,上枕骨骨化程度提高 (P<0 .0 1 )。结论 叶酸有明显的促进胚胎发育和拮抗环磷酰胺致畸的作用 ,且与 VC、VB6及牛磺酸联合应用的效果明显优于单独补充。

维生素A缺乏对大鼠生精能力及睾丸标志酶活性的影响

目的 探讨维生素A缺乏对大鼠生精能力及睾丸标志酶活性的影响。方法 采用断乳期 2 1～ 2 3天Wistar雄性大鼠 ,体重 35～ 4 5g ,随机分为正常组 ,VA 缺乏组 ,分别饲喂正常饲料及无VA 的饲料 ,喂养 90天后 ,称重 ,乌拉坦麻醉 ,腹主动脉取血 ,采用荧光法测定血清VA 含量 ;摘取双侧睾丸和附睾。计算睾丸和附睾脏器系数 ,作精子相对计数及精子畸形率检测 ,测定睾丸中乳酸脱氢酶 (LDH)、碱性磷酸酶 (ALP)及γ -谷氨酰转肽酶 (GGT)活性 ,测定睾丸中总胆固醇 (CHOL)含量。结果 维生素A缺乏组雄鼠血清VA 含量明显低于正常组雄鼠 (t =4 1 5 1,P <0 0 1) ,睾丸、附睾的脏器系数下降 (t=12 12 ,3 83,P <0 0 1) ,精子数明显减少 (P <0 0 1) ,精子畸形率明显增高 (P <0 0 1)。睾丸中乳酸脱氢酶 (LDH)及γ -谷氨酶转肽酶 (GGT)活性明显降低 (t=3 2 2 ,3 0 7,P <0 0 1) ,碱性磷酸酶 (ALP)活性明显降低 (t′=2 83,P <0 0 5 ) ,睾丸中总胆固醇 (CHOL)含量明显降低 (t=3 37,P <0 0 1)。结论 维生素A缺乏影响雄性大鼠的生精能力。

细胞分化抑制子Id1在前列腺癌中的表达及意义

目的:细胞分化抑制子Id1(inhibitor of differentiation or inhibitor of DNA binding)蛋白与肿瘤的发生、侵袭及远处转移有关。本研究主要观测人前列腺癌组织中Id1蛋白的表达,并分析其应用价值。方法:采用免疫组化SP法检测43例前列腺癌(prostate cancer,PC)、12例前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)和2例正常前列腺组织中Id1蛋白的表达。结果:Id1蛋白在正常前列腺组织中无表达;BPH组织中无或弱表达(5/12);所有前列腺癌组织都有阳性表达(43/43),而且大多数以中、高度表达为主(与BPH相比,P<0.01);前列腺癌中Id1的表达水平与Gleason分级成正比(rs=0.63P<0.01)。结论:人前列腺癌组织中,Id1蛋白有过度表达,且与前列腺癌的Gleason分级呈正相关,表明与癌组织的恶性程度有关。Id1蛋白有可能作为判断前列腺癌发展的一种新的肿瘤标志。

2,3-吲哚醌对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖影响

目的研究2,3-吲哚醌对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖的影响。方法应用MTT比色法观察2,3-吲哚醌对SH-SY5Y细胞生长的抑制情况;流式细胞仪检测2,3-吲哚醌对SH-SY5Y细胞周期分布的影响;Western blot方法观察其对细胞信号传导通路蛋白有丝分裂原激活的蛋白激酶(ERK)的作用,同时结合免疫细胞化学方法检测2,3-吲哚醌对SH-SY5Y细胞caspase-3的影响。结果2,3-吲哚醌能显著抑制SH-SY5Y细胞增殖,并使细胞周期阻滞于G0/G1期;caspase-3蛋白表达随着药物浓度的升高逐渐增加;加2,3-吲哚醌后磷酸化的有丝分裂原激活的蛋白激酶蛋白(ERK1/2)相对表达量降低。结论2,3-吲哚醌对SH-SY5Y细胞具有抗增殖作用,其作用可能是通过诱导细胞凋亡、改变细胞周期以及作用于细胞通路而实现的。

35例肿瘤开胸患者围手术期血清Cortisol、血浆Ang-Ⅱ及相关因素分析

目的：分析探讨具有手术指征的35例肿瘤患者开胸手术期间应激状态的变化。方法：经临床证实无严重高血压、心脏病、垂体瘤及相关影响体内皮质醇（Cortisol）、血管紧张素Ⅱ（Ang～Ⅱ）水平疾病且具有手术指征的35例肿瘤开胸患者，应用放射免疫分析分别测定术前、术中1h、术毕及术后1d血清Cortisol及Ang-Ⅱ的含量，手术期间同时测定舒张压、收缩压及心率。结果：肿瘤开胸患者手术期间血清Cortisol及血浆Ang～Ⅱ存在差异（F=3．184—10．824，P〈0．001—0．05）。麻醉手术期间，Cortisol与心率进行性升高两者有较好的对应性，术毕时达高峰。年龄分组（老年组A组≥60岁），对照组B组〈60岁，除术前收缩压A组明显高于B组外（t=2．099，P〈0．05）其它各期指标无显著性差异（t=-1．887～1．481，P〉0．05）。控制年龄与性别后的相关分析表明，术中1h心率与术中1h Ang-Ⅱ呈正相关（r=0，631，P〈0．01）；术毕心率与术毕Cortisol、术毕Ang-Ⅱ呈正相关（r=0．511，P〈0．01；r=0．472，P〈0．05），术毕心率与术毕Cortisol、术毕Ang—Ⅱ的逐步回归分析表明只有术毕Cortisol进入回归方程。Cortisol与Ang-Ⅱ的各期无昆著相关性。结论：手术期问血清Cortisol及血浆Ang-Ⅱ水平明显升高，血清Cortisol在手术应激过程中是一较敏感指标；老年人对手术成激过程反应良好；心率及应激指标水平的升高可能互为因果；开胸手术期间应密切监测开胸患者血清Cortisol及血浆Ang-Ⅱ的水平．作好相应的护理．特别是老年人．以避免或减少其它并发症的发生几率。

牛磺酸对大鼠生长和智力发育的影响

1目的 探讨牛磺酸对大鼠生长及智力发育的影响。2方法 Wistar大鼠自受孕开始分别喂以不同的饲料 :基础饲料 (A组 ) ,基础饲料添加牛磺酸 (B组 ) ,低蛋白饲料 (C组 ) ,低蛋白饲料添加牛磺酸 (D组 )。断乳后的仔鼠仍继续按原饲料分别喂养并检测体质量、观察体态及辨别学习能力。3结果 A,B,D组出生 16 d,平均体质量无显著差异 ;至 44 d,D组平均体质量明显低于 A,B组 (F =381.83,q=18.87,18.45 ,P<0 .0 1) ,C组则出现明显营养不良 ,体质量低于 D组 (q=2 1.41,P<0 .0 1)。到 6 0 d时 ,A ,B组体质量均已达到 15 0 g左右 ,而 D组的大鼠仅为80 g左右。A组大鼠亮度辨别学习实验的达标时间为 (4.70± 0 .94) d,B组大鼠达标时间为 (3.5 4± 0 .75 ) d,两者具有显著差异 (t=2 .2 5 ,P<0 .0 5 )。4结论 营养不良的情况下 ,自胚胎期开始补充牛磺酸 ,仍有助于仔鼠的生长发育 ,对智力发育也具有明显的促进作用。

应用siRNA技术探讨MCF-7乳腺癌细胞分泌的VEGF对树突状细胞的影响

为探讨MCF-7乳腺癌细胞分泌的血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)对树突状细胞(dendritic cell,DC)功能及其分化的影响,针对VEGF基因设计siRNA(small interferingRNA,siRNA),采用脂质体转染法以100nmol/L最佳转染浓度导入MCF-7乳腺癌细胞(siRNA组),以脂质体Lipofectamine2000TM转染MCF-7乳腺癌细胞培养上清培养正常DC作为对照(对照组),采用ELISA法检测经siRNA干扰VEGF基因后的MCF-7乳腺癌细胞分泌的VEGF因子含量,Western印迹检测VEGF蛋白表达,以探讨siRNA的基因沉默效果;以siRNA组和对照组培养上清分别培养外周血单个核细胞,用流式细胞仪检测所诱导DC表型CD1a、CD80、CD83、CD86和HLA-DR的表达,用MTT法检测转染前后两组DC诱导的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocyte,CTL)对MCF-7细胞的细胞毒作用.结果显示,MCF-7乳腺癌细胞培养上清能明显抑制正常DC分化成熟及抗原递呈能力,干扰VEGF基因后MCF-7乳腺癌细胞培养上清对DC的影响明显降低,CD80、CD83、CD86和HLA-DR的表达较对照组显著升高,而CD1a表达下降(P<0.01).转染前后DC诱导的CTL对MCF-7细胞的杀伤活性有明显差异(P<0.01).由此可见,siRNA可靶向抑制MCF-7乳腺癌细胞VEGF的表达,下调VEGF后的MCF-7细胞上清对DC分化成熟及功能的抑制作用明显降低,从而推测VEGF在肿瘤的发生、发展和免疫抑制方面可能起着重要的作用.

线粒体途径在丹参酮ⅡA诱导人宫颈癌细胞凋亡中作用

目的探讨丹参酮ⅡA诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的可能途径。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,用不同浓度丹参酮ⅡA处理后,流式细胞仪检测HeLa细胞凋亡,JC-1染色后流式细胞仪检测线粒体膜电位的改变,Western印迹法检测细胞色素C(Cyto C)从线粒体释放情况。结果不同浓度丹参酮ⅡA作用48h后,与空白对照组比较,HeLa细胞凋亡率均增加;线粒体Cyto C表达减少,细胞质Cyto C表达增加;线粒体膜电位电压较高细胞(正常细胞)数量减少,线粒体膜电位降低的细胞数量增加,差异均有统计学意义(F=116.5～1 064.6,q=4.11～75.38,P<0.01)。结论丹参酮ⅡA对HeLa细胞的凋亡诱导作用与线粒体膜电位降低及线粒体释放Cyto C有关。

维生素A缺乏对大鼠体格生长及生殖器官发育的影响

目的 探讨维生素A(VitA)缺乏对大鼠体格生长及生殖器官发育的影响。②方法 将断乳 2 1～2 3d的Wistar大鼠 ,雌雄各半 ,体质量 35～ 45g ,随机分为正常组、VitA缺乏组 ,分别饲喂正常饲料及无VitA的饲料 ,观察大鼠生长发育 ,每 7d测体质量 ,绘制生长曲线。喂养 90d后 ,采用荧光法测定血清VitA含量 ;摘取双侧睾丸和附睾 ,计算睾丸和附睾脏器系数。③结果 正常组的雄、雌大鼠血清VitA含量均为 (0 .89± 0 .0 4) μmol/L ,而VitA缺乏组雄、雌性大鼠血清VitA含量分别降低到 (0 .14± 0 .0 5 ) ,(0 .13± 0 .0 4) μmol/L ,两组比较 ,差异有极显著性 (t=40 .86 ,47.2 3,P <0 .0 1) ;VitA缺乏组大鼠生长发育较正常组明显减慢 (t=2 .11,2 .92 ,P <0 .0 1) ,睾丸、附睾脏器系数下降 (t=12 .12 ,3.83,P <0 .0 1)。

恶性肿瘤病人血浆可溶性细胞间黏附分子-1水平变化及临床意义

①目的 探讨恶性肿瘤病人血浆可溶性细胞间黏附分子 1(sICAM 1)水平的变化及其临床意义。②方法 采用酶联免疫吸附法 (ELISA) ,检测了 6 6例恶性肿瘤病人和 36例健康人血浆sICAM 1水平的变化。③结果 恶性肿瘤病人血浆sICAM 1水平明显增高 ,与对照组比较 ,差异有极显著性 (t=2 0 .5 6 0 ,P <0 .0 0 1) ,有转移者和死亡者血浆sICAM 1水平明显高于无转移者和存活者 (t =12 .72 5 ,2 5 .919,P <0 .0 0 1) ,且手术治疗前sICAM 1水平明显高于手术治疗后 (t=11.179,P <0 .0 0 1)。④结论 血浆sICAM 1水平变化与恶性肿瘤病人病情变化。

溴氰菊酯致大鼠慢性中毒的肝组织形态学观察

目的探讨溴氰菊酯对大鼠肝组织结构的慢性损伤作用。方法选取大鼠32只,随机分为空白对照组（Ⅰ组）、橄榄油对照组（Ⅱ组）、溴氰菊酯1.56 mg/kg组（Ⅲ组）、溴氰菊酯6.25 mg/kg组（Ⅳ组）,每组8只。Ⅲ、Ⅳ组连续6个月经口灌胃染毒,Ⅱ组只给予相当剂量的橄榄油,观察大鼠染毒期间行为学变化,测定肝脏器系数,肝组织切片经苏木精-伊红染色和PAS染色,观察肝细胞形态学变化和肝细胞糖原含量的变化。结果染毒组大鼠出现流涎、大汗、立毛等中毒症状。苏木精-伊红染色显示Ⅲ、Ⅳ组肝细胞胞浆疏松,内可见脂滴,肝血窦淤血。染毒组大鼠肝细胞的糖原含量有不同程度降低,Ⅳ组与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组相比,Ⅲ组和Ⅰ组相比差异有统计学意义（F=9.015,q=3.675~10.058,P〈0.05）;但Ⅲ组与Ⅱ组比较,差异无统计学意义（q=0.672,P〉0.05）。Ⅲ、Ⅳ组肝脏器系数与其他各组比较,差异均有统计学意义（F=10.737,q=3.945~9.968,P〈0.05）。结论长期低剂量摄入溴氰菊酯可造成大鼠肝组织的慢性损伤,并具有剂量-效应关系。

尿中儿茶酚胺含量的高压液相色谱检测法

①目的 建立高压液相色谱快速测定尿中儿茶酚胺含量的方法。②方法 流动相选用柠檬酸 柠檬酸三钠 甲醇 离子对试剂 EDTA 2Na混合液 (pH 4 .2 ) ,采用PEC18(30mm× 3mm)色谱柱 ,并以自制的固相萃取柱对标本预处理 ,以电化学检测器检测。③结果 线性范围在 2～ 10 0 0 μg L ,最低检测限为 2～ 30 μg L ,平均回收率为80 .1%～ 10 7.3% .④结论 该方法能满足对嗜铬细胞瘤等疾病的实验诊断需要。

突出腰椎间盘胶原的定量研究

目的 探讨椎间盘中胶原的变化与腰椎间盘突出症的关系。②方法 利用溴化氰 (CNBR)消化椎间盘胶原产生多肽的方法 ,借助于梯度层析和氨基酸分析对突出和正常椎间盘胶原对比分析。③结果 突出椎间盘纤维环Ⅰ型与Ⅱ型胶原比值较正常纤维环高 (t=7.93,P <0 .0 1) ,突出髓核中出现Ⅰ型胶原 ,而Ⅱ型胶原相对含量无明显变化 (t=0 .31,P >0 .0 5 )。④结论 椎间盘胶原的变化为腰椎间盘突出症的重要病理基础之一。

溴氰菊酯致大鼠胃黏膜慢性损伤的观察

目的探讨溴氰菊酯中毒对大鼠胃黏膜的慢性病理损伤及其机制。方法染毒组大鼠分别给予不同剂量溴氰菊酯灌胃;对照组即橄榄油组仅给予相同剂量橄榄油。肉眼观察各组大鼠胃黏膜的大体损伤情况;取胃体部组织,制成切片,苏木精-伊红染色,镜下观察胃黏膜损伤情况,并对损伤程度进行累计积分;观察胃底腺的形态结构,计数壁细胞的数量。结果镜下对照组大鼠胃黏膜结构完整,胃底腺排列紧密规则,壁细胞形态结构较正常,无炎性细胞浸润。染毒组大鼠与对照组大鼠相比较,胃黏膜均呈现不同程度的损伤。高剂量组大鼠胃黏膜慢性病理损伤积分与其余各组比较差异有显著性(F=10.65,q=4.81～7.49,P<0.05);高剂量组大鼠胃黏膜壁细胞数量较对照组明显增多,差异有显著性(F=5.11,q=5.04,P<0.05)。结论溴氰菊酯对大鼠胃黏膜有较明显的慢性病理损伤的作用,尤其对胃底腺壁细胞的影响较为明显,损伤的机制可能与胃黏膜屏障功能的破坏和胃肠神经递质的变化有关。

急性心肌梗死病人血清肌钙蛋白I的检测及意义

①目的 探讨血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)在心肌梗死病人发病后不同时间的诊断价值。②方法 采用OpusTM全自动急诊干式免疫分析仪定量法 ,检测了 80例AMI病人的动态血清cTnI及肌酸激酶同工酶 (CK MB)活性。③结果 80例AMI病人cTnI总阳性率为 97.5 0 % ,阳性率在发病后 4h内达 4 5 .0 0 % ,7d时仍高达33.75 %。AMI病人发病 2 4h后心肌cTnI较CK MB的阳性率明显增高 (χ2 =9.0 14～ 4 7.6 19,P <0 .0 1)。④结论AMI病人心肌cTnI检测阳性出现时间早、持续时间长 ,是一种高度灵敏。