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青岛地区HBV DNA阳性献血者的血清学和分子生物学特征 被引量:2
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作者 马维娟 杨忠思 +1 位作者 冯秋霞 王云 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2019年第3期338-342,共5页
目的 调查青岛地区HBVDNA阳性献血者病毒载量和血清学特征,并分析其HBV基因型。方法无偿献血样本HBsAg^-/HBV-DNA^+32例,HBsAg^+/HBV-DNA^+7例,行高精度病毒载量检测和补充血清学试验,并通过S区扩增测序结合多对型特异性引物巢式PCR法分... 目的 调查青岛地区HBVDNA阳性献血者病毒载量和血清学特征,并分析其HBV基因型。方法无偿献血样本HBsAg^-/HBV-DNA^+32例,HBsAg^+/HBV-DNA^+7例,行高精度病毒载量检测和补充血清学试验,并通过S区扩增测序结合多对型特异性引物巢式PCR法分析HBV基因型。结果 32例HBsAg^-/HBV-DNA^+样本中,HBcAb^+30例(93.75%),HBV DNA定量阴性17例,定量阳性15例;测序分型确定基因型4例为B型,其中1例发现两处突变,分别为126位苏氨酸/异亮氨酸(T/I)突变为丙氨酸(A)、175位亮氨酸(L)突变为丝氨酸(S)。7例HBsAg^+/HBV-DNA^+样本HBVDNA均定量阳性,确定基因型2例为B型,3例为C型。结论 大部分HBsAg^-/HBV-DNA^+献血者的HBcAb为阳性,HBV DNA呈低浓度,感染的HBV主要基因型为B型和C型。 展开更多
关键词 供血者 乙型肝炎病毒 血清学试验 遗传学
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潍坊地区18237例女性人乳头瘤病毒感染情况及不同年龄感染者病毒基因型分布特点 被引量:2
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作者 张增霞 李义文 王云 《山东医药》 CAS 2024年第16期29-32,37,共5页
目的探讨潍坊地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及不同年龄感染者病毒基因型分布特点,为该地区女性优化宫颈癌筛查和防控提供依据。方法选取潍坊市某三甲医院进行HPV检测的18237例女性作为研究对象,其中≤25岁1684例,26~35岁5374例,36... 目的探讨潍坊地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及不同年龄感染者病毒基因型分布特点,为该地区女性优化宫颈癌筛查和防控提供依据。方法选取潍坊市某三甲医院进行HPV检测的18237例女性作为研究对象,其中≤25岁1684例,26~35岁5374例,36~45岁组4629例,46~55岁组4459例,>55岁组2091例。采用PCR-反向点杂交分型技术进行HPV型别检测,分析HPV感染情况和基因型的分布,比较各年龄组女性HPV感染率差异。结果HPV总感染率为25.09%,其中单一感染和多重感染分别占70.65%和29.35%。高危型HPV(HR-HPV)的感染率为21.43%,占HPV感染者的85.42%,检出率居前5位的依次为HPV16(4.33%)、HPV52(4.30%)、HPV58(2.93%)、HPV53(2.67%)和HPV51(2.32%);低危型HPV(LR-HPV)的感染率为6.97%,检出率较高的为HPV81(2.36%)、HPV42(2.05%)和HPV43(1.45%)。不同年龄组HPV总感染率、HR-HPV和LR-HPV的感染率比较均存在统计学差异(P均<0.05)。各年龄组HPV感染率呈“U”型分布,≤25岁组感染率最高,其次是>55岁组。10种主要HR-HPV基因型中,有9种感染率在各年龄组间比较差异有统计学意义(P均<0.05)。结论潍坊地区女性HPV感染率以单一感染、HR-HPV基因型感染为主,常见的5种HR-HPV基因型为HPV16、HPV52、HPV58、HPV53和HPV51;不同年龄HPV感染者具有不同的基因型分布特点。 展开更多
关键词 宫颈癌 人乳头瘤病毒 基因型 感染
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EBV相关肿瘤和健康人群BALF2基因序列分析
3
作者 于彩霞 赵梦鹤 +2 位作者 肖华 王云 刘雯 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2024年第1期67-71,共5页
目的探讨BALF2基因的多态性及其分布特征与EB病毒(EBV)相关肿瘤发生发展的关系。方法采用巢式PCR结合DNA测序的方法,对349例EBV阳性标本进行DNA序列分析,利用Lasergene软件将其与EBV标准株B95-8序列进行比对,并生成系统发生树,对基因变... 目的探讨BALF2基因的多态性及其分布特征与EB病毒(EBV)相关肿瘤发生发展的关系。方法采用巢式PCR结合DNA测序的方法,对349例EBV阳性标本进行DNA序列分析,利用Lasergene软件将其与EBV标准株B95-8序列进行比对,并生成系统发生树,对基因变异型进行分类。结果根据系统发生树将BALF2分为5个基因型BALF2-A、BALF2-B、BALF2-C、BALF2-D和BALF2-E。其中,BALF2-E在鼻咽癌中的检出率高于健康人群,中国南方鼻咽癌人群BALF2-E的检出率高于北方鼻咽癌人群(χ2=10.26,P<0.01)。结论BALF2基因存在多态性,其变异类型分布与肿瘤类型、地域有关,BALF2-E亚型与鼻咽癌发生相关。 展开更多
关键词 疱疹病毒4型 多态性 单核苷酸 淋巴瘤 胃肿瘤 鼻咽癌
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着丝粒蛋白A在宫颈癌组织中的表达及临床意义
4
作者 汪煜琳 曹文静 +2 位作者 翟雨晴 原江水 宋卫青 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第10期1882-1886,共5页
目的:分析着丝粒蛋白A(centromere protein A,CENP-A)在宫颈癌中的表达情况,与临床病理参数相关性及临床意义。方法:GEPIA和HPA数据库分析CENP-A基因及蛋白在宫颈癌组织中的表达情况;免疫组化检测宫颈癌中CENP-A蛋白的表达水平,分析其... 目的:分析着丝粒蛋白A(centromere protein A,CENP-A)在宫颈癌中的表达情况,与临床病理参数相关性及临床意义。方法:GEPIA和HPA数据库分析CENP-A基因及蛋白在宫颈癌组织中的表达情况;免疫组化检测宫颈癌中CENP-A蛋白的表达水平,分析其与临床病理参数之间的关系;使用Linked Omics数据库寻找与CENP-A共表达基因,分析CENP-A可能参与宫颈癌发生发展的信号通路。结果:生物信息学分析显示宫颈癌组织中CENP-A基因和蛋白的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05);免疫组化结果显示宫颈癌组织CENP-A蛋白表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),且与患者的肿瘤分期及浸润程度相关。通过基因共表达分析,KIF2C、CDC20、FAM72B等基因与CENP-A表达呈正相关,PARM1、ABCA9和SYNE1等基因与CENP-A表达呈负相关(FDR<0.05),CENP-A基因参与了细胞周期、DNA复制等途径。结论:CENP-A在宫颈癌组织中高表达,与宫颈癌的预后以及发生发展相关。 展开更多
关键词 宫颈癌 着丝粒蛋白A 免疫组化 生物信息学分析
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高尿酸血症对雌性大鼠生殖功能的影响及其机制
5
作者 龚雪琳 邹通 +4 位作者 宋淼 刘呈杨 张清 孙钰 邢士超 《精准医学杂志》 2024年第3期213-217,共5页
目的探讨高尿酸血症(HUA)对雌性大鼠生殖功能的影响及其机制。方法雌性Wistar大鼠18只,随机分为3组,每组各6只。高尿酸组(HUA组)和高尿酸恢复组(HR组)大鼠每天灌胃50 mg/kg尿酸及腹腔注射250 mg/kg氧嗪酸钾,至第9周时,HR组大鼠改用等体... 目的探讨高尿酸血症(HUA)对雌性大鼠生殖功能的影响及其机制。方法雌性Wistar大鼠18只,随机分为3组,每组各6只。高尿酸组(HUA组)和高尿酸恢复组(HR组)大鼠每天灌胃50 mg/kg尿酸及腹腔注射250 mg/kg氧嗪酸钾,至第9周时,HR组大鼠改用等体积生理盐水进行灌胃和腹腔注射,HUA组不变,再继续处理7周;对照组(N组)大鼠给予相同体积的生理盐水灌胃及腹腔注射,持续16周。第16周时,测量三组大鼠体质量和子宫、卵巢质量,并计算子宫、卵巢系数;苏木精-伊红染色法观察3组大鼠子宫、卵巢组织的病理变化;酶联免疫吸附试验法检测3组大鼠血清中促性腺激素释放激素(GnRH)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)含量;使用阴道脱落细胞涂片法观察3组大鼠动情周期;采用比色法检测3组大鼠子宫组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)水平;采用免疫荧光法检测3组大鼠子宫组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的荧光强度。结果与N组大鼠相比,HUA组大鼠子宫系数降低、卵泡数量减少、子宫内膜厚度变薄,动情间期缩短,血清FSH水平增加,子宫组织中SOD、GSH水平降低,而MDA含量增加(F=7.80~111.40,t=3.95~12.37,P<0.05),子宫组织中TNF-α荧光强度增高;与HUA组大鼠相比,HR组卵泡数量显著增多、子宫内膜显著变厚,血清中FSH水平增高,子宫组织中SOD、GSH水平显著增高,而MDA水平显著降低(t=3.40~11.56,P<0.05),子宫组织中TNF-α荧光强度降低。结论HUA可致雌性大鼠生殖功能下降,其可能机制与大鼠血清尿酸水平升高,致性激素分泌紊乱、机体氧化应激水平增高,进而诱导炎症反应发生有关。 展开更多
关键词 高尿酸血症 动情期 性腺甾类激素 细胞因子类 炎症 氧化性应激 女(雌)性 大鼠 Wistar
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基于HNRNPA2B1及其调控miRNAs构建肺腺癌TP53突变人群的预后模型
6
作者 彭宝相 王云 徐从娥 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2024年第2期227-232,共6页
目的基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库多组学数据构建肺腺癌TP53突变人群的预后模型,探讨核内不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRNPA2B1)与肺腺癌TP53突变之间的相关性。方法通过生物信息学方法搜集TCGA和基因表达数据库(GEO)中的突变数据,分析T... 目的基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库多组学数据构建肺腺癌TP53突变人群的预后模型,探讨核内不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRNPA2B1)与肺腺癌TP53突变之间的相关性。方法通过生物信息学方法搜集TCGA和基因表达数据库(GEO)中的突变数据,分析TP53突变对肺腺癌病人HNRNPA2B1表达及预后的影响;将病人随机分为训练集和验证集(7∶3),筛选潜在的受HNRNPA2B1调控的miRNAs构建模型、绘制ROC曲线,并通过列线图可视化。结果HNRNPA2B1在TP53突变肺腺癌中显著高表达(P<0.001),且高表达病人预后不良(P=0.031)。筛选出9个受HNRNPA2B1调控且与预后相关的miRNAs构建预后模型,结果表明列线图对预后模型具有较好的区分度和准确度(χ^(2)=9.443,P=0.306)。结论HNRNPA2B1与肺腺癌TP53突变存在正相关,基于HNRNPA2B1调控的miRNAs可建立预测TP53突变肺腺癌病人预后的良好模型。 展开更多
关键词 肺腺癌 基因 p53 核不均一核糖核蛋白A-B组 微RNAS 预后模型
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青岛市部分地区女性HPV感染现状分析 被引量:5
7
作者 赵希芹 宋海洋 +1 位作者 孙有湘 王云 《精准医学杂志》 2021年第5期428-432,共5页
目的调查青岛市部分地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染的情况及其与宫颈病变的相关性分析。方法收集2019年6月—2020年5月在青岛大学附属医院进行HPV基因型检测的37267例女性的临床资料,研究对象按照年龄分为≤25岁组、26~35岁组、36~45岁... 目的调查青岛市部分地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染的情况及其与宫颈病变的相关性分析。方法收集2019年6月—2020年5月在青岛大学附属医院进行HPV基因型检测的37267例女性的临床资料,研究对象按照年龄分为≤25岁组、26~35岁组、36~45岁组、46~55岁组和>55组。其中2651例进行宫颈活检及病理学检查,按照病理学分级分为慢性宫颈炎组、低级别鳞状上皮内病变(LISL)组、高级别鳞状上皮内病变(HISL)组和宫颈癌组。分析受检者HPV感染情况,并比较各年龄组、不同病理学分级组HPV感染情况,分析HPV多重感染与宫颈病变的相关性。结果37267例女性中HPV和高危型HPV(HR-HPV)阳性率分别为24.1%和20.5%;其中≤25岁组HPV阳性率最高,其次是>55岁组。LISL组、HSIL组和宫颈癌组中HR-HPV阳性率显著高于慢性宫颈炎组(q=4.27~11.67,P<0.05)。活检患者中HPV多重感染率随宫颈病变病理学分级升高呈线性下降的趋势(χ_(趋势)^(2)=4.35,P<0.05)。所有研究对象中阳性率居前3位的HR-HPV基因型分别为HPV52、HPV16以及HPV53。结论青岛部分地区女性HPV易感年龄呈低龄和高龄双峰分布,以HPV52、HPV16和HPV53为最常见HR-HPV基因型;HR-HPV感染与宫颈病变密切相关,但HPV多重感染可能无促进宫颈病变进展的作用。 展开更多
关键词 乳头状瘤病毒感染 人乳头瘤病毒 基因型 宫颈疾病 宫颈肿瘤 人类 女性 青岛地区 流行病学研究
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碳青霉烯类耐药革兰阴性杆菌耐药基因的研究进展 被引量:1
8
作者 张晓静 孟祥璐(综述) 李静(审校) 《检验医学与临床》 CAS 2023年第19期2906-2911,共6页
革兰阴性杆菌(GNB)在临床致病菌中的分离率较高,会造成患者呼吸道、泌尿道等感染及败血症的发生,使患者的痛苦增加并且延长住院时间。碳青霉烯类药物是目前临床上已经被广泛使用的β-内酰胺类抗菌药物。随着这类药物的使用越来越多,对... 革兰阴性杆菌(GNB)在临床致病菌中的分离率较高,会造成患者呼吸道、泌尿道等感染及败血症的发生,使患者的痛苦增加并且延长住院时间。碳青霉烯类药物是目前临床上已经被广泛使用的β-内酰胺类抗菌药物。随着这类药物的使用越来越多,对其耐药的GNB不断增加,甚至出现更为严重的多重耐药菌,造成了临床抗感染药物的选择和医院内感染控制的难度进一步加大,增加了临床治疗难度。研究显示,菌株产生的耐药基因在不同国家、地区和不同菌株中均有差异。该文主要对不同种类碳青霉烯类耐药的革兰阴性杆菌(CRO)产生的碳青霉烯酶种类和耐药基因的分布及相应的检测方法进行综述,为CRO的治疗、预防及医院内感染的控制提供数据支持。 展开更多
关键词 革兰阴性杆菌 碳青霉烯类耐药 耐药基因
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高尿酸血症对雌性大鼠生殖功能的影响
9
作者 宋淼 邹通 +3 位作者 徐礼斌 龚雪琳 王笑峰 邢士超 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2023年第4期551-554,共4页
目的探讨高尿酸血症(HUA)对雌性大鼠生殖功能的影响。方法利用腺嘌呤、高酵母饲料和氧嗪酸钾(尿酸酶抑制剂)进行9个周的HUA模型建立。通过阴道脱落细胞涂片观察大鼠动情周期;留取完整子宫、卵巢称质量,计算器官系数;采用苏木精-伊红(HE... 目的探讨高尿酸血症(HUA)对雌性大鼠生殖功能的影响。方法利用腺嘌呤、高酵母饲料和氧嗪酸钾(尿酸酶抑制剂)进行9个周的HUA模型建立。通过阴道脱落细胞涂片观察大鼠动情周期;留取完整子宫、卵巢称质量,计算器官系数;采用苏木精-伊红(HE)染色观察卵巢的病理变化;采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测卵巢组织中吻素1(KISS1)和吻素1受体(KISS1R)mRNA表达。结果HUA雌性大鼠模型构建成功。与正常大鼠相比,HUA雌性大鼠动情间期明显缩短(F=14.000,P<0.01),卵巢系数显著下降(t=2.377,P<0.05),卵巢组织中KISS1和KISS1R mRNA表达显著增高(t=3.456、5.408,P<0.05)。结论HUA可造成雌性大鼠KISS1系统紊乱,引起动情间期缩短和卵巢系数降低。 展开更多
关键词 高尿酸血症 不育 女(雌)性 大鼠 Wistar 生殖 亲吻素
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广东和山东地区鼻咽癌组织EB病毒BART miRNA cluster 1多态性比较
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作者 高龙峰 王巧祎 +1 位作者 张增霞 王云 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2023年第5期639-644,共6页
目的了解广东和山东地区鼻咽癌(NPC)以及健康人群中EB病毒(EBV)BamHⅠA右向转录产物(BART)微小RNA(miRNA)cluster 1基因多态性,探讨其与NPC发生的关系。方法采用巢式PCR和DNA测序检测183例NPC(广东79例,山东104例)和113例健康人群(广东5... 目的了解广东和山东地区鼻咽癌(NPC)以及健康人群中EB病毒(EBV)BamHⅠA右向转录产物(BART)微小RNA(miRNA)cluster 1基因多态性,探讨其与NPC发生的关系。方法采用巢式PCR和DNA测序检测183例NPC(广东79例,山东104例)和113例健康人群(广东59例,山东54例)样本中BART miRNA cluster 1序列,应用Lasergene和MEGA软件对序列进行比对和系统进化树分析,以特征性突变和系统进化树对变异分型。比较不同人群和不同地区基因变异型/亚型的分布。结果296例样本的BART miRNA cluster 1基因序列可分为6种变异型/亚型(BART-A、-B1、-B2、-C、-D1和-D2),其中BART-D2和-D1是主要变异亚型。广东地区以BART-D2多见,而山东地区以BART-D1多见。广东地区NPC和健康人群中BART-D2的检出率分别为86.1%(68/79)和44.1%(26/59),高于山东地区NPC(27.9%,29/104)和健康人群(1.9%,1/54),差异均有统计学意义(χ^(2)=61.032、27.632,P<0.001);两个地区NPC中BART-D2的检出率均高于健康人群,差异有统计学意义(χ^(2)=27.444、15.660,P<0.001)。结论EBV BART miRNA cluster 1基因变异在广东和山东地区存在差异,BART-D2亚型可能主要在广东地区流行且与NPC的发生相关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 疱疹病毒4型 BamHⅠA右向转录物 微RNAS 多态性 单核苷酸
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威海地区孕妇B族链球菌血清学分型及耐药性研究
11
作者 李金鹏 钱冬萌 《医学检验与临床》 2023年第9期59-62,共4页
目的:了解威海地区孕晚期孕妇感染的B族链球菌(GBS)对常用抗菌药物的敏感性及菌株的血清型分布特点。方法:对2022年就诊于我院的孕35~37周孕妇送检的生殖道分泌物进行细菌培养、菌株分离,对阳性菌株进行药敏和血清分型实验。结果:共268... 目的:了解威海地区孕晚期孕妇感染的B族链球菌(GBS)对常用抗菌药物的敏感性及菌株的血清型分布特点。方法:对2022年就诊于我院的孕35~37周孕妇送检的生殖道分泌物进行细菌培养、菌株分离,对阳性菌株进行药敏和血清分型实验。结果:共2685例围产期孕妇中培养结果为GBS阳性的有156例,感染率为5.81%,分离的GBS菌株对青霉素、氨苄西林、利奈唑胺、万古霉素100%敏感,无耐药菌株,对红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、莫西沙星、替加环素的耐药率分别为79.5%、76.3%、48.1%、44.2%、20.5%。对156株菌进行血清学分型,其中Ib型51株(32.7%)、III型44株(28.2%)、Ia型38株(24.4)、V型8株(5.1%)、II型6株(3.8%)、VI型2株(1.3%)和IV型1株(0.6%),6株(3.8%)未检出分型。结论:威海地区GBS菌株主要以血清型Ib、III、Ia为主,对青霉素、氨苄西林、利奈唑胺、万古霉素敏感,对大环内酯类,克林霉素和喹诺酮类抗菌药物的耐药性较高。 展开更多
关键词 B族链球菌 血清型 耐药
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老年患者大肠埃希菌血流感染的临床指标应用价值及预后 被引量:1
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作者 司磊 李鹏 +2 位作者 赵岐刚 罗兵 刘乃政 《医学检验与临床》 2016年第6期32-35,共4页
目的:探讨大肠埃希菌血流感染(Ecoli bloodstreaminfection,ESI)老年患者的临床指标价值及预后的差异。方法:回顾性分析比较2011年1月-2013年12月入住聊城市人民医院的226例老年和168例中青年ESI患者的临床资料。结果:与中青年组... 目的:探讨大肠埃希菌血流感染(Ecoli bloodstreaminfection,ESI)老年患者的临床指标价值及预后的差异。方法:回顾性分析比较2011年1月-2013年12月入住聊城市人民医院的226例老年和168例中青年ESI患者的临床资料。结果:与中青年组相比,老年组患者入住内科病区及合并呼吸道感染的比例明显增加,合并腹部外伤比例明显降低ICU入住时间≥5天、机械通气、中心静脉置管等危险因素在老年组更为常见(P〈0.05)。老年组与中青年组血糖分别为(9.0±5.0;6.6±2.3)、降钙素原(28.9±5.6;16.7±6.4)、多重病原菌血流感染(15.9%;6.5%)、APACHE Ⅱ评分(20.1±8.2;14.9±7.4)、SOFA评分(7.5±4.3;4.6±3.8),住院病死率(20.3%;4.7%)和90d病死率(18.5%;7.1%)均明显高于中青年组(P〈0.01)。结论:与中青年患者相比,老年患者ESI有其特殊的病原学特征、危险因素和抗菌药物应用特点,且患者预后较差。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 老年 预后
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妇产科手术切口子宫内膜异位症的初步治疗效果 被引量:3
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作者 张健 赵敏 +3 位作者 王晓孟 王丹 王笑峰 徐琳 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2020年第2期199-202,共4页
目的探讨妇产科手术切口子宫内膜异位症的治疗效果。方法选取2013年2月—2015年8月我院收治的妇产科手术切口子宫内膜异位症病人46例,随机分为观察组和对照组。观察组采用一次性病灶清除术及术前/术后药物治疗,对照组采用药物治疗,比较... 目的探讨妇产科手术切口子宫内膜异位症的治疗效果。方法选取2013年2月—2015年8月我院收治的妇产科手术切口子宫内膜异位症病人46例,随机分为观察组和对照组。观察组采用一次性病灶清除术及术前/术后药物治疗,对照组采用药物治疗,比较两组病人的临床疗效、康复周期以及住院费用。结果观察组显效率为82.6%,术后1年随访无病人复发或恶变;对照组显效率为34.8%,术后1年随访4例病人复发。观察组显效率、无效率与对照组比较,差异有统计学意义(χ2=4.792、10.850,P<0.05、0.001)。观察组康复周期为(7.5±1.9)d、治疗费用为(6954.3±95.2)元,均显著低于对照组的(14.4±1.6)d和(7187.1±135.7)元,差异有统计学意义(t=6.735、13.320,P<0.001)。结论对于妇产科手术切口子宫内膜异位症病人,药物与手术联合治疗为最佳治疗手段。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 外科伤口 产科外科手术 药物疗法 治疗结果
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免疫共沉淀联合质谱分析筛选与HCMV IE86相互作用蛋白 被引量:2
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作者 李朝华 胡明 +1 位作者 钱冬萌 王斌 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2018年第1期1-5,9,共6页
目的利用免疫共沉淀联合质谱分析的方法,在人胚肺成纤维细胞系MRC-5细胞和胶质瘤细胞系U87MG细胞中,筛选与人巨细胞病毒(HCMV)即刻早期蛋白IE86相互作用的病毒蛋白和剪接相关蛋白。方法通过HCMV感染细胞使IE86蛋白在细胞中表达,采用免... 目的利用免疫共沉淀联合质谱分析的方法,在人胚肺成纤维细胞系MRC-5细胞和胶质瘤细胞系U87MG细胞中,筛选与人巨细胞病毒(HCMV)即刻早期蛋白IE86相互作用的病毒蛋白和剪接相关蛋白。方法通过HCMV感染细胞使IE86蛋白在细胞中表达,采用免疫共沉淀的方法富集两种细胞系中的IE86结合蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳分离免疫共沉淀复合物,从胶中切取IE86结合蛋白条带,胶内酶解后进行液相色谱-质谱联用分析及数据库检索,筛选与IE86相互作用蛋白。结果利用免疫共沉淀联合质谱分析,在MRC-5细胞中,共鉴定到与IE86相互作用的病毒编码的蛋白质17种,宿主细胞编码的剪接相关蛋白25种;在U87MG细胞中,共鉴定到病毒编码的蛋白质4种,宿主细胞编码的剪接相关蛋白8种。结论与胶质瘤细胞系U87MG相比,人胚肺成纤维细胞MRC-5中有更多种病毒蛋白及剪接相关蛋白与IE86有相互作用,协同参与IE86的剪接及病毒早、晚期蛋白的表达,这为进一步研究HCMV在不同细胞环境中的复制机制提供了基础。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 即早蛋白质类 免疫沉淀法 质谱分析法 蛋白质相互作用
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HPV52 E6和E7基因多态性与宫颈上皮内瘤变相关性 被引量:1
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作者 王巧祎 赵希芹 +3 位作者 郭雨辰 张璐 李晓欣 王云 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2022年第5期667-671,共5页
目的探讨人乳头瘤病毒52型(HPV52)E6和E7基因多态性与宫颈上皮内瘤变(CIN)的相关性。方法收集来自青岛地区的177例HPV52阳性且进行宫颈活检病人的宫颈脱落细胞样本,采用PCR直接测序法检测E6和E7基因序列,在GenBank中剪切HPV52标准株和... 目的探讨人乳头瘤病毒52型(HPV52)E6和E7基因多态性与宫颈上皮内瘤变(CIN)的相关性。方法收集来自青岛地区的177例HPV52阳性且进行宫颈活检病人的宫颈脱落细胞样本,采用PCR直接测序法检测E6和E7基因序列,在GenBank中剪切HPV52标准株和变异株序列,应用Lasergene和MEGA软件对序列进行比对和系统进化树分析。比较正常、低级别上皮内瘤变(CIN1)和高级别上皮内瘤变(CIN2/3)样本中E6和E7基因变异型的分布。结果138例样本成功获得E6和E7基因序列。与标准株比较,132例(95.7%)样本在E6区同时出现1处错义突变(K93R)和1处同义突变(g350t),经系统进化树分析,确定为B变异型;其余样本有5例(3.6%)属于A变异型,1例(0.7%)属于C变异型。135例(97.8%)样本在E7区同时出现2处同义突变(c751t和a801g),为B变异型;其余样本有2例(1.5%)属于A变异型,1例(0.7%)属于C变异型。正常、CIN1和CIN2/3样本之间E6和E7变异型的分布差异均无显著性(P>0.05)。结论来自青岛地区正常及CIN样本中HPV52 E6和E7基因均以亚洲株B变异型为主,E6和E7基因多态性可能与CIN发生发展无明显相关性。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒52 乳头瘤病毒E6蛋白质类 乳头瘤病毒E7蛋白质类 宫颈上皮内瘤样病变 多态性 单核苷酸
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高尿酸血症小鼠肠渗透性增加的差异表达基因分析 被引量:1
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作者 邹通 孟瑾 +3 位作者 宋淼 龚雪琳 邢士超 王笑峰 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2022年第6期805-811,共7页
目的通过转录组测序技术和生物信息学分析探究引起高尿酸血症小鼠肠渗透性增加的相关基因。方法通过RNA测序分析高尿酸血症和正常小鼠肠组织的差异表达基因,对差异表达基因进行GO功能注释和KEGG通路富集,并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR... 目的通过转录组测序技术和生物信息学分析探究引起高尿酸血症小鼠肠渗透性增加的相关基因。方法通过RNA测序分析高尿酸血症和正常小鼠肠组织的差异表达基因,对差异表达基因进行GO功能注释和KEGG通路富集,并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)进一步对部分差异表达基因进行验证。结果差异表达基因在结肠中有1006个,在回肠中有347个,在空肠中有398个。花生四烯酸代谢信号通路在空肠、回肠和结肠中均被显著富集,特别是细胞色素P450(CYP450)系列相关基因。高尿酸血症小鼠与正常小鼠相比,空肠和结肠中CYP2C55和CYP2E1基因表达差异显著。RT-qPCR验证结果表明,在高尿酸血症小鼠空肠和结肠中CYP2E1表达升高(t=4.717、9.986,P<0.05),CYP2C55表达降低(t=3.682、4.047,P<0.05)。结论高尿酸血症小鼠肠渗透性增加与CYP2E1的表达增高和CYP2C55的表达降低有关,这为高尿酸血症引起肠渗透性增加的机制研究提供了新的思路。 展开更多
关键词 高尿酸血症 通透性 基因表达谱 细胞色素P450酶系统 计算生物学 小鼠
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miR-205-5p对鼻咽癌细胞系增殖、迁移和侵袭的影响及其机制 被引量:2
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作者 苗玉 贺荟静 +1 位作者 李斐斐 王云 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2018年第3期257-262,共6页
目的观察微小RNA miR-205-5p对鼻咽癌(NPC)细胞系HONE1增殖、迁移和侵袭的影响,探讨其作用机制。方法将人工合成的miR-205-5p模拟物、抑制物及相应阴性对照转染至HONE1细胞中,用CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验及Transwell小室检测细... 目的观察微小RNA miR-205-5p对鼻咽癌(NPC)细胞系HONE1增殖、迁移和侵袭的影响,探讨其作用机制。方法将人工合成的miR-205-5p模拟物、抑制物及相应阴性对照转染至HONE1细胞中,用CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验及Transwell小室检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测miR-205-5p潜在靶基因PTEN、Smad4以及PTEN下游基因蛋白激酶B(AKT)的表达水平。结果与对照相比,miR-205-5p模拟物转染细胞增殖、迁移和侵袭能力增强,PTEN和Smad4表达下降,磷酸化AKT(p-AKT)表达升高;而miR-205-5p抑制物转染细胞增殖、迁移和侵袭能力减弱,PTEN和Smad4表达升高,p-AKT表达下降,差异均有统计学意义(t=2.970~8.011,P<0.05)。结论 miR-205-5p可促进NPC细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向调控抑癌基因PTEN和Smad4表达有关。 展开更多
关键词 微RNAS 鼻咽肿瘤 细胞增殖 细胞运动 肿瘤侵润
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遗传性血小板病7例临床分析 被引量:1
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作者 高振亮 徐龙强 +3 位作者 于水 牟文凤 李胜军 王笑峰 《精准医学杂志》 2022年第5期437-440,446,共5页
目的探讨遗传性血小板病患儿的临床表现、诊断方法和基因特征。方法对我院2018年5月-2020年8月收治的7例遗传性血小板病患儿的临床资料进行回顾性分析,并结合相关文献资料,总结该病的临床特征、诊断方法和基因特征,为临床诊断提供帮助... 目的探讨遗传性血小板病患儿的临床表现、诊断方法和基因特征。方法对我院2018年5月-2020年8月收治的7例遗传性血小板病患儿的临床资料进行回顾性分析,并结合相关文献资料,总结该病的临床特征、诊断方法和基因特征,为临床诊断提供帮助。结果7例患儿中1例血小板数量正常,6例血小板数量减少。大部分患儿临床表现为皮肤瘀点瘀斑和鼻出血不止,虽然丙种球蛋白、糖皮质激素治疗有效,但是激素减量过程中血小板不能维持。7例患儿中2例为MYH 9基因相关性疾病,1例为血小板异常型出血性病17型,4例为WISKOTT-ALDRICH综合征。基因测序结果显示,2例MYH 9基因突变类型分别为c.5521G>A和c.2559_2560insATGATGGCCAAGGAGGAGGAG,1例GFI1B基因突变为c.100+1G>A、c.923T>C,5例WAS基因突变分别为c.1378C>T、c.1301delT、c.37C>T、c.273G>A和p.R308Kfs*28。结论遗传性血小板病通过临床表现和常规实验室诊断不易与其他血小板疾病进行鉴别,自幼出血、反复血小板减少或血小板功能异常的患者应尽早进行基因筛查,以避免漏诊或误诊。 展开更多
关键词 血小板疾病 遗传性疾病 先天性 基因检测 突变 体征和症状 诊断
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可溶性尿酸对肠上皮细胞的影响及其机制 被引量:2
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作者 杨婉 吕秋兰 +3 位作者 徐大星 刘秀 王鹏君 邢士超 《青岛大学学报(医学版)》 2022年第1期13-18,共6页
目的探讨可溶性尿酸(sUA)对肠上皮细胞的影响及其机制。方法将大鼠肠上皮细胞(IEC-6细胞)随机分为对照组和实验组,对照组采用0 mg/L sUA刺激IEC-6细胞;实验组分别用25、50、100、200、400 mg/L浓度的sUA刺激IEC-6细胞,观察sUA对细胞活... 目的探讨可溶性尿酸(sUA)对肠上皮细胞的影响及其机制。方法将大鼠肠上皮细胞(IEC-6细胞)随机分为对照组和实验组,对照组采用0 mg/L sUA刺激IEC-6细胞;实验组分别用25、50、100、200、400 mg/L浓度的sUA刺激IEC-6细胞,观察sUA对细胞活力的影响,并筛选出对IEC-6细胞毒性较小的sUA浓度。采用蛋白印迹法和实时荧光定量PCR,检测sUA刺激对IEC-6细胞蛋白激酶C(PKC)、肿瘤坏死因子α(TNFα)表达的影响;采用PKC抑制剂抑制PKC的表达,观察PKC降低对炎症因子表达的影响。采用活性氧检测试剂盒检测sUA对IEC-6细胞线粒体活性氧(ROS)的影响,线粒体膜电位试剂盒检测IEC-6细胞膜电位变化,免疫荧光方法检测IEC-6细胞紧密连接蛋白(ZO-1)表达。结果25、50、100 mg/L浓度sUA刺激组细胞活力与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);200、400 mg/L浓度sUA刺激组细胞活力受损较为显著,差异有统计学意义(F=20.519,P<0.05)。25、50、100 mg/L浓度sUA刺激组IEC-6细胞PKC、TNFαmRNA和蛋白表达高于对照组,差异有统计学意义(F=36.750~81.660,P<0.05)。PKC抑制剂组PKC、TNFα蛋白表达显著低于对照组,差异有统计学意义(t=16.646、22.572,P<0.05)。25、50、100 mg/L浓度sUA刺激组ROS较对照组增多(F=341.708,P<0.05)。50、100mg/L浓度sUA刺激组线粒体膜电位较对照组明显降低,差异有统计学意义(F=400.952,P<0.05)。100 mg/L浓度sUA刺激组ZO-1蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义(t=50.508,P<0.05)。结论sUA能激活由PKC介导的免疫应答,产生过量的ROS,释放炎症因子,引起肠上皮细胞炎症反应。 展开更多
关键词 肠细胞 高尿酸血症 尿酸 紧密连接蛋白质类
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转IE2基因荷瘤小鼠中ATF5功能影响的研究
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作者 于淼 刘婷 +2 位作者 胡明 王斌 钱冬萌 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期71-75,共5页
利用转IE2基因小鼠荷瘤的方法,对肿瘤组织中ATF5转录激活因子进行定性和定量的检测,从而探究巨细胞病毒(HCMV)即刻早期蛋白IE86对ATF5功能的影响。通过鼠胶质瘤细胞GL261对转基因鼠进行荷瘤,采用RT-PCR和Western blot的方法,对荷瘤鼠的... 利用转IE2基因小鼠荷瘤的方法,对肿瘤组织中ATF5转录激活因子进行定性和定量的检测,从而探究巨细胞病毒(HCMV)即刻早期蛋白IE86对ATF5功能的影响。通过鼠胶质瘤细胞GL261对转基因鼠进行荷瘤,采用RT-PCR和Western blot的方法,对荷瘤鼠的肿瘤组织中转录因子ATF5的表达量进行检测。采用RT-PCR和Western blot的方法检测荷瘤鼠肿瘤组织中转录因子ATF5的表达,结果显示,转IE2基因小鼠体内ATF5表达量较正常小鼠ATF5表达量高。ATF5在转IE2基因荷瘤鼠中呈现高表达状态,ATF5是一个与凋亡密切相关的转录因子,在凋亡、分化及发育等生理过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 IE86 鼠胶质瘤细胞 转录激活因子5(ATF5) 动物模型
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