脑缺血再灌注后皮质区和纹状体区细胞周期蛋白D1和周期蛋白依赖性蛋白激酶4基因表达对神经细胞凋亡的影响(英文)

背景:脑缺血再灌注后细胞周期蛋白的表达以其在凋亡机制中的作用为主,部分细胞凋亡是由于细胞增殖周期的异常调控所致。目的:研究脑缺血再灌注后细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和周期蛋白依赖性蛋白激酶4(cyclindependentkinase,CDK4)基因表达及其与神经细胞凋亡的关系。设计:随机对照的实验研究。地点和材料:本实验在青岛大学医学院脑血管病研究所和山东省脑血管病防治重点实验室完成。成年健康雌性SD大鼠36只,体质量230～270g,清洁级,由中国科学院上海实验动物中心提供。将动物随机分为假手术组4只和实验组32只,实验组再进一步分为缺血1.5h再灌注2,6,12h,1,2,3,7和14d亚组,每组4只。方法:全部实验均由本文作者完成。具体方法:应用线栓法经左侧颈外-内动脉插线建立SD大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型,原位末端标记法检测脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的变化,原位杂交技术检测cyclinD1mRNA和CDK4mRNA的表达。结果:脑缺血再灌注2h脑组织即开始出现凋亡神经细胞,并于1d和2d分别在皮质区和纹状体区达高峰(分别为72.80±4.66和96.75±4.37)。神经细胞cyclinD1mRNA和CDK4mRNA的表达分别于再灌注2h和6h开始逐渐增强,并于12h和1d分别在皮质区和纹状体区达高峰(皮质区分别为94.50±2.75和85.75±3.73,纹状体区分别为88.25?

麝香保心丸改善心脏神经官能症患者的抑郁状态的随机对照研究

目的观察麝香保心丸能否改善心脏神经官能症患者的抑郁状态。方法对62例确诊的心脏神经官能症的患者随机分为治疗组(31例)和对照组(31例)。治疗组给予麝香保心丸口服,每日3次,每次2粒(44mg),连用4周,对照组给予谷维素,每日3次,每次2粒(20mg),连用4周,两组均不合用抗抑郁药物。随访3个月。使用Zung抑郁量表(SDS)于治疗前后以及3个月随访时分别进行评分比较。治疗后及随访终点时均复查的心电图与治疗前进行比较。结果治疗组治疗4周后以及3个月随访时所有病人无不良反应,心电图无不良变化,总有效率为83.7%。SDS评分与对照组比较或与治疗前比较均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论麝香保心丸可以调节心脏神经官能症患者的心境,改善其抑郁状态。

肌苷对脑缺血再灌注损伤神经细胞巢蛋白表达的影响

①目的 研究大鼠缺血性脑损伤后神经细胞巢蛋白 (Nestin)变化的规律 ,探讨肌苷治疗中枢神经缺血性损伤的作用机制。②方法 成年健康雌性SD大鼠 6 8只 ,以线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型。随机分为治疗组 (腹腔注射 5 0 g/L肌苷 10 0mg/kg)和对照组 (腹腔注射生理盐水 10 0mg/kg) ,每组再随机分为缺血1.5h再灌注 2h、6h、12h、2 4h、2d、3d、7d、14d组 (n =4 ) ,另取 4只作假手术组。应用原位杂交技术检测脑缺血再灌注后脑组织Nestin的表达。③结果 假手术组皮质、纹状体和室旁区Nestin表达很弱。对照组缺血侧皮质除 2h以外、纹状体除 2、6h以外、室旁区除 2h、6h、14d以外各时间点Nestin的表达均明显高于假手术组 (t =1.95～4 7.2 1,P <0 .0 5 )。治疗组Nestin表达较对照组在皮质于 2h、6h、7d、14d、在纹状体于 14d有所降低 ,在皮质、纹状体及室旁区于 3d均显著升高 ,在纹状体、室旁区于 7d显著升高 (t=4 .37～ 18.0 3,P <0 .0 5 )。④结论 肌苷可以促进大鼠脑缺血再灌注后Nestin的表达 ,可能具有促进神经干细胞生成的作用。

脑缺血再灌注后大鼠IGF-1及其受体表达对其神经行为的影响

目的观察脑缺血再灌注后大鼠胰岛素生长因子-1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)表达对其神经行为的影响。方法成年健康雄性Wistar大鼠28只,应用线栓法经左侧颈外-内动脉插线建立大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型。应用BEDERSON评分法评价脑缺血再灌注后神经行为功能,免疫组织化学技术检测IGF-1和IGF-1R表达。结果脑缺血再灌注后各组动物均出现不同程度的神经功能受损,从再灌注3 d开始神经功能逐渐恢复,但至再灌注7 d才有显著性差异。免疫组化检测显示,脑缺血再灌注后脑组织IGF-1和IGF-1R表达区域和时相变化规律基本一致,再灌注12 h^7 d持续高表达,1~3 d达高峰。结论脑缺血再灌注后IGF-1和IGF-1R的早期表达可能对神经功能恢复有一定的促进作用。

脑梗死患者血浆神经元特异性烯醇酶的动态变化及意义

目的:探讨急性脑梗死患者血浆神经元特异性烯醇酶(neuron-specificenolase,NSE)的动态变化及预后意义。方法:选择急性脑梗死患者68例,分别于发病后3d内(68例)、第7天(66例)、第14天(65例)和第30天(64例)采集血标本,应用酶联免疫吸附法测定血浆NSE水平,检测结果与35名正常对照者比较;并探讨脑梗死患者血浆NSE水平与脑梗死体积及临床神经功能改善的相关性。结果:脑梗死患者发病3d内、第7天血浆NSE水平明显高于对照组,以3d内变化尤著;预后不良组血浆NSE水平在3d内(12例)、第7天(10例)、第14天(9例)各时间点均明显高于预后良好组(56例)。66例脑梗死患者第7天的脑梗死体积与其发病3d内、第7天血浆NSE水平呈正相关,相关系数分别为0.83、0.75(均P<0.001)。64例脑梗死患者第30天神经功能缺损评分减少值与3d内、第7天血浆NSE水平呈负相关,相关系数分别为-0.41(P<0.001)、-0.37(P<0.01)。结论:急性脑梗死患者早期血浆NSE水平明显升高,血浆NSE的动态变化可反映脑梗死的严重程度及其近期预后。

通心络胶囊治疗心血管神经官能症抑郁状态的研究

目的观察通心络胶囊能否改善心血管神经官能症患者的抑郁状态,并探讨其作用机理。方法将60例心血管神经官能症患者随机分为治疗组和对照组。治疗组给予通心络胶囊口服,每天3次,每次4粒,连用4周,对照组给予谷维素,两组均不应用抗抑郁药物,随访6个月。使用Zung抑郁量表(SDS)于治疗前后以及6个月随访时分别进行评分比较。治疗前后使用放射免疫法测定血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇。结果治疗组4周后以及6个月随访时所有患者无不良反应,总有效率为83．3％。SDS评分与对照组比较或与治疗前比较均明显降低(P<0．05,P<0．01)。治疗后ACTH 和皮质醇浓度均降低(P<0．05)。结论通心络胶囊可以改善心血管神经官能症患者的抑郁状态,可能与降低ACTH和皮质醇有关。

黄芪注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后BDNF表达的影响

目的:探讨黄芪注射液对大鼠脑缺血/再灌注损伤后脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法:应用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型,经腹腔注射黄芪注射液(6 m L/kg)干预治疗。Longa法评分评价大鼠神经行为功能,蛋白印迹法(Western-blot)定量检测BDNF蛋白的表达,荧光定量PCR(Real-Time PCR)检测BDNF基因的表达。结果:经黄芪注射液治疗后,大鼠大脑海马区BDNF蛋白和BDNF mRNA表达较对照组明显增加,动物神经行为功能显著改善。结论:黄芪注射液可通过上调BDNF的表达而促进受损神经的修复,刺激神经再生,改善动物的神经行为功能。

胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血再灌注损伤后炎症反应影响

目的研究胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血再灌注损伤后炎症反应的抑制作用。方法应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,随机分为假手术组、模型组和治疗组,治疗组在缺血后2 h以微量注射器经尾静脉给予胡黄连苷Ⅱ(10 mg/kg)250μL,模型组和假手术组同步给予0.1 mol/L PBS 250μL。采用BEDERSON评分方法评价大鼠神经行为功能,采用氯化三苯基四氮唑染色观察大鼠脑梗死体积,采用原位TUNEL染色方法检测大鼠神经细胞凋亡情况,采用免疫荧光染色和Western Blotting方法检测大鼠脑组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果假手术组大鼠未出现行为功能异常,细胞凋亡数量较少,MMP-9表达较弱。模型组大鼠表现为神经行为功能障碍,缺血侧皮质和纹状体区出现梗死病灶,细胞凋亡数量增多,MMP-9表达增强。应用胡黄连苷Ⅱ干预治疗后,MMP-9表达较模型组显著降低,细胞凋亡数量明显减少,脑梗死体积显著减小,神经行为功能显著改善。结论胡黄连苷Ⅱ可抑制大鼠脑缺血再灌注损伤后炎症反应,对大鼠脑缺血再灌注损伤起到保护作用。

低能量氦氖激光两种不同照射途径对脑梗死患者白细胞黏附功能和细胞间黏附分子1的影响

目的:观察应用两种低能量氦氖激光给予途径,对脑梗死患者白细胞黏附功能和血清可溶性细胞黏附分子1水平的影响。方法:以青岛大学医学院附属医院和第二附属医院1999-07/2001-12收治的发病7d以内急性脑梗死患者120例为观察对象,将其随机分为3组:①药物组(n=34):应用常规药物如甘露醇、706代血浆、维脑路通、胞二磷胆碱等进行治疗。②低能量氦氖激光血管内照射组(IVLIB组,n=44):在药物治疗的基础上加用低能量氦氖激光血管内照射治疗,激光波长632.8nm,功率为1.5mW,1次/d,90min/次,10次为1个疗程。③低能量氦氖激光经鼻腔脑照射组(TNLIB,n=42),在药物治疗的基础上加用低能量氦氖激光经鼻腔脑照射治疗,波长632.8nm,功率为3.5～5.5mW,经鼻腔照射,30min/次,1次/d,10次为1个疗程。检测各组患者治疗前、治疗后5和10d的白细胞黏附率和血清可溶性细胞黏附分子1浓度。以同期健康查体者40名为正常对照组。结果:按实际处理分析,进入结果分析99例。①白细胞黏附率结果:药物组、IVLIB组和TNLIB组治疗前均高于正常对照组[(63±8)%,(64±9)%,(64±8)%,(33±6)%,P<0.001]。与治疗前相比,药物组于治疗后10d显著降低[(56±9)%,t=3.18,P<0.01],而IVLIB组和TNLIB组治疗后5d即显著降低[(55±8)%,(56±7)%,P<0.001],且低于同期药物组,但两组之间无差异。②血清可溶性细胞黏附分子1浓度:药物组、IVLIB组和TNLIB组治疗前均高于正常对照组[(456±67),(460±71),(458±69),(209±58)μg/L,P<0.001]。与治疗前相比,药物组于治疗后10d显著降低[(386±70)μg/L,t=3.96,P<0.01],而IVLIB组和TNLIB组治疗后5d即显著降低[(364±56),(371±54)μg/L,P<0.001],且低于同期药物组,但两组之间无差异。结论:急性脑梗死患者白细胞黏附功能和血清可溶性细胞黏附分子1水平明显增高,而激光治疗可明显降低其水平。两种激光给予途径-低能量氦氖激光经鼻腔脑照射和血管内照射的作用无差异,且经鼻腔脑照射方法简单,操作安全。

脑的不对称性影响大鼠局灶性脑缺血的结局

为评价左右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)对右利大鼠神经行为功能和脑梗死体积的影响,本研究应用四足动物觅食实验筛选右利爪雄性SD大鼠24只,随机分为经左、右侧插线组各12只,8%水合氯醛腹腔注射(300mg/kg)麻醉,线栓法经左、右侧颈外-内动脉插入头端涂有多聚赖氨酸的4-0尼龙线,建立大鼠MCAO缺血2h模型,再灌注72h后评价动物的神经行为功能,测量脑梗死体积。结果表明,所有动物在脑缺血2h神经功能缺损评分最高,再灌注1、24、48和72h经左侧MCAO大鼠显著高于经右侧MCAO大鼠(P<0.05),后者功能明显优于前者,脑梗死体积经左侧插线的大鼠显著大于经右侧插线的大鼠(P<0.05)。研究结果提示,大鼠主侧半球大脑中动脉缺血后,神经功能缺损和脑梗死体积较对侧严重,脑的不对称性影响大鼠局灶性脑缺血的最终结局。

胡黄连苷Ⅱ对脑缺血-再灌注损伤后iNOS蛋白及mRNA表达的影响

目的探讨胡黄连苷Ⅱ在大鼠脑缺血-再灌注损伤中的抗氧化作用。方法应用线栓法建立MCAO-R模型,随机分为假手术组、阴性对照组、阳性对照组及药物治疗组。假手术组不做处理,阴性对照组经尾静脉注射生理盐水,阳性对照组注射丹参素钠10mg.kg-1,治疗组注射胡黄连苷Ⅱ10mg.kg-1。用Bederson法进行神经功能评分,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定脑梗死体积,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达变化,原位杂交检测诱导型iNOS mRNA表达变化。结果胡黄连苷II组神经行为功能、脑梗死体积、TUNEL阳性细胞数均低于阴性对照组(P<0.05),iNOS蛋白和mRNA表达低于阴性对照组(P<0.05)。结论胡黄连苷Ⅱ可能通过下调iNOS表达,对脑缺血-再灌注损伤有一定的保护作用。

脑缺血再灌注损伤过程中一氧化氮合酶的表达(英文)

背景:一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)是一氧化氮(nitric oxide,NO)合成的关键因素,由于NO在体内易与氧和血红蛋白等物质结合而迅速失活,不易准确定量测定。因此,测定NOS活性是深入研究NO在脑缺血再灌注损伤发病机制的重要环节。目的:研究脑内不同类型NOS在脑缺血再灌注损伤过程中的作用。设计:随机对照的动物实验。单位:青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所。材料:实验于2005-05/12在山东省脑病防治重点实验室完成。选择成年健康雄性Wistar大鼠28只,清洁级,体质量220~260g,由山东大学实验动物中心提供。按随机数字表法分为假手术组和脑缺血组,假手术组4只,脑缺血组24只。脑缺血组又分为缺血1h再灌注6h,12h,1d,3d,7d,14d6个时间点,其中每个时间点4只。方法:应用线栓法经左侧颈外-内动脉插线建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型。应用免疫组织化学技术检测脑缺血再灌注后不同时间点脑内不同类型NOS的表达。主要观察指标:①甲苯胺蓝染色的两组神经细胞;②脑缺血组大鼠脑内神经元型NOS(neuronalNOS,nNOS)、内皮型NOS(endothelial NOS,eNOS)和诱导型NOS(inducible NOS,iNOS)在不同时间点的表达和分布。结果:①脑缺血组损伤区神经细胞出现核固缩、细胞碎片等,各时间点间细胞差异无显著性。②再灌注后6h脑内神经细胞即出现nNOS,eNOS和iNOS表达,随着再灌注时间的延长逐渐增强,脑组织神经元细胞不同类型NOS表达的区域一致,主要在皮质和纹状体区。脑内nNOS和iNOS于再灌注12h^7d保持较高的表达水平,而eNOS于再灌注6h^3d保持较高水平,持续时间短,升高和降低时间均早于nNOS和iNOS;但3种NOS均于再灌注1d到达表达高峰。3种NOS在皮质区和纹状体区的表达变化趋势基本一致。结论:脑缺血再灌注损伤后eNOS高表达时间较早,持续时间短,而nNOS和iNOS高表达时间稍迟,持续时间长。

急性脑梗死病人血白细胞计数及血清IL-6的变化

目的 探讨急性脑梗死病人血白细胞计数及血清IL-6水平的变化及其临床意义.方法 分别检测60例急性脑梗死病人（脑梗死组）急性期第1天白细胞计数及第1、3、7、14天血清IL-6水平,并与30例健康对照者（对照组）检测结果比较.结果 与健康对照组相比,脑梗死组病人血白细胞计数明显增高（t=7.826,P〈0.01）,血清IL-6水平在各时间点均高于对照组（t=9.797～31.768,P〈0.01）.大梗死灶脑梗死组病人血白细胞计数及血清IL-6水平高于中梗死灶病人组（F=4.25、4.07,q=2.847、3.685,P〈0.05）和小梗死灶病人组（q=2.976、3.563,P〈0.05）.重度脑梗死组病人血白细胞计数及血清IL-6水平均高于中度脑梗死组病人（F=5.657、5.463,q=4.457、5.628,P〈0.01）和轻度脑梗死组病人（q=5.036、5.312,P〈0.01）.结论 炎症反应可能是脑梗死病人急性期神经元损伤的原因之一;白细胞计数及血清IL-6水平的升高与疾病的严重程度有关,并可能成为疾病预后的判断依据.

尼莫通对大鼠脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响

1目的 探讨尼莫通对大鼠脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响。 2方法 对实验大鼠于脑缺血前应用尼莫通进行干预 ,在脑缺血再灌注不同时间内 ,用免疫组化法检测凋亡相关基因 c- fos及 bcl- 2蛋白表达的变化。 3结果 尼莫通组大鼠脑缺血后的梗死体积显著减小 (t=2 .79,P<0 .0 5 ) ;尼莫通组脑缺血再灌注时皮层和基底核区 c- fos的表达明显下降 (t=4.84,6 .14,P<0 .0 0 1) ,而 bcl- 2蛋白的表达明显增强 (t=3.5 3,4.2 2 ,P<0 .0 0 1)。 4结论 尼莫通可抑制脑缺血再灌注时细胞凋亡的发生。

大脑中动脉闭塞后自发性再灌注经颅多普勒观察

①目的 探讨缺血性脑卒中自发性再灌注的经颅多普勒表现。②方法 对 5 6例大脑中动脉 (MCA)急性缺血性脑卒中病人 ,在发病 6h内行脑CT ,经颅多普勒超声 (TCD)及动脉数字减影检查。③结果 38例有TCD异常 ,表现为患侧MCA血流信号消失或血流信号不对称。 2 4h ,48h ,7d随访 ,发现受阻MCA出现自发性再灌注达5 0 % ,且阻塞部位越远 ,出现再灌注概率越大。④结论 TCD技术为一简单。

大鼠海马内σ受体在电针抑制电惊厥中的作用

目的:观察大鼠海马内σ受体在电针抑制电惊厥中的作用。方法:62只成年雄性Wistar大鼠分为6组。在大鼠电惊厥模型(通过双侧耳廓部的电极夹给予电刺激:50Hz,60mA,持续0.4s,共3次,每次间隔5min)上应用行为观察,用海马内微量注射受体激动剂或拮抗剂及脑电功率谱分析方法对惊厥及其程度进行分析;使用G6805-2电针治疗仪电针“风府”(GV16),“筋缩”(GV8),频率130Hz,强度1mA,持续10min。结果:大鼠海马内微量注射σ受体激动剂1,3-双-2-甲苯基胍(1,3,di(2-tolyl)guanidine,DTG)8.27nmol可以抑制电惊厥发作,表现为痫样放电减轻,脑电总功率和主频功率降低,并且增强电针抑制电惊厥的作用。而大鼠海马内注射σ受体拮抗剂右吗喃1.5nmol/0.5μl后则使电惊厥发作加剧,减弱了电针抑制电惊厥的作用(“针+药”组与“针+人工脑脊液”组及单纯药物组比较,P<0.01)。结论:大鼠海马内σ受体在电针抑制电惊厥中起一定的加强针效的作用。

尼莫通对脑缺血再灌注细胞凋亡相关基因表达影响

①目的探讨尼莫通对脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响.②方法对实验大鼠于脑缺血前应用尼莫通进行干预,然后采用免疫组化法检测脑缺血再灌注不同时间内凋亡相关基因c-fos及BCL-2蛋白表达的变化.③结果尼莫通组大鼠脑缺血后的梗死体积显著减小,脑缺血再灌注时皮质和基底核区c-fos的表达明显下降,而BCL-2的表达明显增高(t=2.482,x2＝229.939～719.966,P＜0.05).④结论尼莫通可抑制脑缺血再灌注时细胞凋亡的发生,具有神经保护作用.

基底节区生殖细胞瘤2例报告并文献复习

目的探讨基底节区生殖细胞瘤的临床特征,以提高对该病的早期诊断水平。方法回顾性分析2例局限于基底节区经病理学证实的生殖细胞瘤患者的临床资料,并结合相关文献对基底节区生殖细胞瘤的临床表现、影像学检查、组织病理、诊断要点进行分析讨论。结果 2例病人均为男性,年龄11和17岁,显微镜下全切除肿瘤;术后分别随访4年和1.5年,术后未行放射治疗的患者半年后复发,再次来院行肿瘤及全脑放射治疗,放疗中复查MRI示肿瘤明显缩小。结论基底节区生殖细胞瘤临床特征和影像学特点对早期诊断具有重要价值,遇到疑似病例时建议活检或行诊断性放疗以进一步确诊。

大鼠大脑中动脉闭塞后脑内胰岛素样生长因子-1 mRNA和蛋白的表达

目的探讨大脑中动脉闭塞(MCAO)后早期胰岛素样生长因子-1(IGF-1)mRNA和蛋白的表达。方法应用12800点DNA芯片、原位杂交和免疫组化方法检测SD大鼠MCAO后IGF-1mRNA和蛋白的表达水平。结果基因芯片结果显示MCAO后缺血侧纹状体内有4480个差异表达基因,其中个别生长因子类基因呈高水平表达,但是多数基因呈低水平表达,IGF-1mRNA在脑缺血后呈相对低水平表达。原位杂交和免疫组化法进一步证实,与假手术组相比,MCAO后缺血侧纹状体内IGF-1mRNA和蛋白阳性细胞数明显减少,再灌注9h和24h时表达均降低(P<0·001)。结论MCAO后早期缺血侧纹状体内IGF-1mRNA和蛋白呈低水平表达,提示IGF-1在脑缺血损伤中可能具有一定的作用。