噬血细胞综合征22例

目的探讨儿童噬血细胞综合征(HPS)的临床表现、病因、治疗及预后。方法回顾性分析2004年1月-2006年12月青岛大学医学院附属医院儿科收治的22例HPS患儿临床资料,总结其特点。结果1.临床表现:主要为持续发热,肝、脾、淋巴结大,出血。2.实验室检查特点:外周血常规表现为三系或二系减少,肝功能受损,凝血障碍,高三酰甘油和(或)纤维蛋白原降低。骨髓涂片可找到噬血细胞。免疫紊乱:CD3、CD4降低,CD8升高。3.病因:原发性和获得性,获得性包括感染和恶性肿瘤相关,其中以EB病毒最为常见,EB病毒感染占感染相关性HPS(IAHS)的63.64%(7/11例),占HPS的31.82%(7/22例)。EBV相关HPS表现重,尤其EBV DNA定量阳性者临床凶险,病死率高。1例恶性相关性HPS(MAHS)有EBV DNA低量表达,且EBV-CA-IgM阳性,为EB病毒感染,余3例病因不明。4.治疗及转归:IAHS 11例予抗病毒药物、大剂量人血丙种球蛋白、糖皮质激素、依托泊苷治疗,好转5例,疗效不佳自动出院1例,放弃治疗2例,死亡3例。MAHS 4例,予糖皮质激素、依托泊苷等治疗,对早期治疗反应良好,易复发,复发后恶性病程,预后差。1例0.5 a余转化为淋巴瘤;1例10个月余转为急性淋巴细胞性白血病;1例3个月余转为郎格汉斯组织细胞增生症,进行性急速加重;前3例均迅速死亡。1例EBV感染MAHS,最终转化为郎格汉斯组织细胞增生症,肝功能不良,持续3 a。家族性噬血细胞淋巴组织细胞增生症1例,经HLH-04方案治疗好转,近1 a复发,死于多脏器衰竭,中枢浸润。6例病原不清HPS,亦予上述治疗,死亡、好转各3例。结论HPS多由感染尤其为EBV感染诱发,且与细胞免疫有极大关系,早期诊断、早期治疗是改善预后的关键。

重症肌无力患者维生素D受体多态性的初步研究

目的 初步观察重症肌无力(MG)患者的维生素D受体(VDR)基因多态性与MG临床特点之间的关系。方法 采用PCR-RFLP方法检测29例散发性MG和9例家族性MG患者的VDR型基因的多态性,观察其与MG临床特点的关系。结果 未发现VDR基因多态性与散发性MG患者的性别、发病年龄、Osserman分型以及并发症有关。家族性MG患者无aa基因型,且其a等位基因频率低于散发性MG患者和健康对照组。差异均有显著性。结论 尚未发现散发性MG患者的VDR基因多态性与临床特点有关。家族性MG患者的VDR基因多态性与散发性MG患者不同。MG患者的VDR基因多态性仍需进一步研究。

rmOP-1对肾脏缺血再灌注损伤的预防与治疗作用

①目的探讨重组骨形成蛋白-1(rmOP-1)对Wistar大鼠肾脏缺血再灌注损伤的预防与治疗作用.②方法建立Wistar大鼠肾脏缺血再灌注模型,随机分为预防组、治疗组和对照组,前两组经肠系膜上静脉注射rmOP-1,剂量为250 μg/kg体质量,对照组给予等量生理盐水,分别检测各组大鼠血液中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)浓度,观察肾脏组织学变化并进行改良Miller评分.③结果预防组与治疗组血BUN、Cr值和Miller评分差异无显著性(F=17.47～78.15,q=1.05～2.50,P>0.05),但均明显低于对照组(t=4.39～11.18,P<0.01),组织学观察显示前两组大鼠肾小管上皮细胞坏死程度明显减轻.④结论 rmOP-1能够有效地保护缺血再灌注肾脏的结构和功能,为临床应用提供了可靠的理论基础.

非小细胞肺癌中VEGF-C及其受体mRNA的表达与临床意义

目的:研究肺癌组织及癌旁组织中血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)及其受体mRNA的表达,分析其在肿瘤转移中的作用。方法:采用RT-PCR法分析36例新鲜肺癌组织及癌旁组织标本中VEGF-C/KDR/Flt-4mRNA的表达,并统计分析它与临床病理特点之间的关系。结果:癌旁组织(PT)中VEGF-C mRNA表达与Flt-4mRNA的表达呈显著正相关(r=0.523,P=0.005 5)。肿瘤组织及癌旁组织中单一的VEGF-C、KDR或Flt-4 mRNA表达与肿瘤转移无明显相关;COMVEGF- C-3与淋巴结转移(r=0.580 5,P=0.000 8)及临床病理分期(r=0.505 7,P=0.0064)呈明显正相关。结论: VEGF-C及其受体在肺癌组织及瘤旁组织中高表达,在肿瘤转移尤其是淋巴转移中起重要作用, COMVEGF-C-3是反映患者淋巴转移和预后的良好指标。

重组mOP-1原核细胞高效表达和纯化的研究

①目的 探讨重组mOP 1 (rmOP 1 )的克隆化、原核高效表达载体的构建以及rmOP 1制备和纯化简单有效方法。②方法 于胎龄为 2周的CD 1小鼠胚胎组织中提取、纯化mRNA ,应用ligo(dT)引物反转录酶合成cDNA ,PCR筛选扩增OP 1全长开放读框 ,产物TA克隆入质粒载体pCR 3.1 Uni;亚克隆入高效原核表达载体pTrcHis2B ,经大肠杆菌JM 1 0 9、IPTG诱导表达rmOP 1蛋白 ;经Ni NTA树脂纯化 ,SDS PAGE分析。 ③结果限制性酶切分析、DNA测序确认mOP 1的全长开放读框 ,Ni NTA亲和层析纯化重组蛋白PAGE分析满意。④结论 胚胎期约 2周的CD 1小鼠有OP 1mRNA的高水平表达 ,RT PCR筛选OP 1全部开放读框 ,产物TA克隆化方法便捷 ,原核高效表达质粒 pTrcHis 2B能够方便、快速回收和纯化重组蛋白。

错配修复基因hMLH1甲基化与胃癌的关系

目的:通过研究散发性胃癌中错配修复基因hMLH1mRNA的表达及其启动子区5'CpG岛甲基化状态,探讨hMLH1基因异常甲基化在胃癌发生过程中的作用.方法:应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)检测60例胃癌组织及其癌旁黏膜组织中hMLH1基因启动子区的甲基化状态,逆转录PCR(RT-PCR)检测两种组织中hMLH1mRNA表达情况.结果:胃癌组织hMLH1mRNA表达水平明显低于癌旁组织(t=4.082,P<0.01),hMLH1基因启动子区高甲基化18例(30%),其癌旁黏膜组织中未发现有甲基化.hMLH1基因启动子区甲基化与胃癌的临床病理参数之间无明显的相关性.hMLH1mRNA表达阴性的21例病例中,17例(81%)发生甲基化,而hMLH1mRNA表达阳性的39例中仅有1例(2.5%)发生甲基化,hMLH1mRNA表达降低与甲基化之间存在明显的相关性(χ2=8.0182,P=0.0046).结论:胃癌组织中hMLH1基因启动子区甲基化与其mRNA表达缺失密切相关,是导致hMLH1基因错配修复功能缺陷的重要原因之一.

实时荧光定量RT-PCR对胃癌组织中hPMS2 mRNA的检测及其临床意义

目的:探讨DNA错配修复基因hPMS2在胃癌组织中的表达水平及其临床意义.方法:应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对41例胃癌患者的癌组织、37例癌旁萎缩性胃炎组织、25例慢性萎缩性胃炎组织及20例慢性浅表性胃炎组织中hPMS2 mRNA进行定量检测,以三磷酸甘油醛脱氢酶基因(hGAPDH)为内参照.结果:胃癌组织、癌旁萎缩性胃炎组织、慢性萎缩性胃炎组织及慢性浅表性胃炎组织中hPMS2 mRNA的含量分别是28.33±14.05,16.88±10.67,7.25±8.72和1.78±1.34,四组相比差异有显著性(F=31.82,P=0.00).胃癌组织中hPMS2mRNA含量明显高于其他三组;癌旁萎缩性胃炎组织中含量明显高于非胃癌患者的胃炎组织,差异均有显著性(P<0.01);而非胃癌患者的慢性萎缩性胃炎组织中hPMS2 mRNA的含量与慢性浅表性胃炎组织相比差别无显著性.hPMS2 mRNA含量与肿瘤的大小、浸润深度、有无淋巴结转移关系不明显,差异均无显著性.结论:hPMS2基因的异常转录可能与胃癌的发生有关,而与胃癌的发展关系不大.

血管内皮生长因子-C及其受体3mRNA在肺癌及癌旁组织中的表达与临床意义

目的 研究肺癌组织 (T)及癌旁组织 (PT )中血管内皮生长因子 C(VEGF C)及其受体 3 (flt 4)mRNA的表达情况 ,分析其在淋巴转移中的作用。方法 采用逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)方法分析 3 6例新鲜肺癌组织及癌旁组织标本中VEGF C/flt 4mRNA的表达情况 ,并统计分析其与各临床病理特点之间的关系。结果 癌旁组织中VEGF CmRNA表达与flt 4mRNA的表达呈显著正相关 (P <0 .0 1)。肺癌组织中VEGF C (+ )而在肿瘤或 /和癌旁组织中出现flt 4(COMVEGF C) (+ )与淋巴结转移 (P <0 .0 1)及临床病理分期 (P <0 .0 1)呈明显正相关。结论 COMVEGF C在肿瘤淋巴转移中起重要作用 ,是一个反映患者淋巴转移的良好指标。

淋巴管内皮透明质酸受体-1 mRNA在早期子宫内膜癌及癌旁组织中的表达及其意义

目的探讨淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)mRNA在早期子宫内膜癌组织及癌旁组织中的表达及其意义。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对22例Ⅰ、Ⅱ期子宫内膜癌组织(T组)及其癌旁组织(PT组)、13例正常子宫内膜组织(NE组)中LYVE-1的表达进行检测。结果LYVE-1在三组均有表达,PT组表达最高(1.2440±0.1036),NE组和T组表达依次降低(分别为0.9889±0.1365,0.7812±0.1796),三组相对含量比较差异有统计学意义(P<0.01)。PT组Ⅰ期和Ⅱ期患者LYVE-1表达差异有统计学意义(P<0.05)。而PT组LYVE-1表达水平与子宫内膜癌临床病理分级、病理类型和肌层浸润程度无相关性(P>0.05)。结论LYVE-1在癌旁组织高表达,提示早期子宫内膜癌癌旁组织有新生淋巴管生成,从而可能进一步促进淋巴结转移。