目的探讨microRNA-92(miR-92)对神经母细胞瘤细胞增殖的促进作用,并预测miR-92的靶基因。方法人工设计合成miR-92的反义寡核苷酸(anti—miR-92寡核苷酸),利用脂质体LipofectamineTM2000转染神经母细胞瘤SK-N-SH和SK-N-BE2细胞系...目的探讨microRNA-92(miR-92)对神经母细胞瘤细胞增殖的促进作用,并预测miR-92的靶基因。方法人工设计合成miR-92的反义寡核苷酸(anti—miR-92寡核苷酸),利用脂质体LipofectamineTM2000转染神经母细胞瘤SK-N-SH和SK-N-BE2细胞系,利用实时定量PCR检测转染后细胞内miR-92的表达水平,并通过噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡情况;利用生物信息学方法对miR-92的候选靶基因进行预测。结果与对照组细胞相比,两种神经母细胞瘤细胞转染anti-miR-92后,miR-92的水平降低约70%,MTT检测细胞的活性降低约20%,流式分析仪检测发现增殖的细胞数降低约50%~60%,而细胞凋亡数增加约2~3倍,差异均具有统计学意义(P〈0.05)。通过生物信息学和对靶基因潜在功能分析,初步选定BCL2-like11(BCL2L11)和phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten (PTEN)作为是miR-92的候选靶基因。结论抑制miR_92的表达导致神经母细胞瘤细胞的增殖降低,凋亡增加,从而可能进一步影响神经母细胞瘤的生长,miR-92可能具有作为临床上神经母细胞瘤治疗分子标记物的潜在功能,为以后更有意义的分子治疗奠定基础。展开更多
文摘目的探讨microRNA-92(miR-92)对神经母细胞瘤细胞增殖的促进作用,并预测miR-92的靶基因。方法人工设计合成miR-92的反义寡核苷酸(anti—miR-92寡核苷酸),利用脂质体LipofectamineTM2000转染神经母细胞瘤SK-N-SH和SK-N-BE2细胞系,利用实时定量PCR检测转染后细胞内miR-92的表达水平,并通过噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡情况;利用生物信息学方法对miR-92的候选靶基因进行预测。结果与对照组细胞相比,两种神经母细胞瘤细胞转染anti-miR-92后,miR-92的水平降低约70%,MTT检测细胞的活性降低约20%,流式分析仪检测发现增殖的细胞数降低约50%~60%,而细胞凋亡数增加约2~3倍,差异均具有统计学意义(P〈0.05)。通过生物信息学和对靶基因潜在功能分析,初步选定BCL2-like11(BCL2L11)和phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten (PTEN)作为是miR-92的候选靶基因。结论抑制miR_92的表达导致神经母细胞瘤细胞的增殖降低,凋亡增加,从而可能进一步影响神经母细胞瘤的生长,miR-92可能具有作为临床上神经母细胞瘤治疗分子标记物的潜在功能,为以后更有意义的分子治疗奠定基础。