深低温保存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的形态学评价

①目的 用形态学方法评价深低温保存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的效果。②方法 同种材料取自大月龄脑死亡胎儿。在冷冻保护液浸泡后置于 4℃冰箱冷平衡 ,特制无菌冷冻袋包装。用液氮蒸气梯度降温方法完成降温 ,- 1 96℃长期保存。复温后光镜、电镜观察血管组织形态并与复温前比较。③结果 修剪后和解冻后的血管及瓣膜细菌培养结果均为阴性。光镜、电镜观察显示解冻后的主动脉基本结构完整 ,胶原纤维和弹力纤维形态结构正常 ,排列规则 ,局部可见黏液样变性以及部分内皮细胞脱落。④结论 本法同种材料的取材、冷冻保存效果可靠。初步建立了综合采集、长期冻存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的方法和技术标准 。

同种异体大鼠的主动脉移植后影响移植物钙化的因素分析

目的：探讨同种异体大鼠的主动脉移植后影响移植物钙化的因素。方法：研究分为2组，即异基因组和同基因组。异基因组中SD大鼠为供体，Wistar大鼠为受体；同基因组中受体和供体均为Wistar大鼠。两组再随机分为5个小组，每组8只，进行大鼠同种异体带瓣主动脉腹主动脉的异位移植。分别于术后2、4、8、12、16wk，以流式细胞术测定大鼠血液中CD25、CD71的表达。取出移植物，用原子火焰吸收法测定钙的含量，用光镜和电镜观察移植物的形态学变化，用免疫组化染色法测动脉壁CD40的表达：结果：（1）异基因组移植后各个时间点，CD40、CD25和CD71的表达均较同基因组高（P〈0．01）。异基因组CD25、CD71和CD40表达的高峰主要在移植后的早期（2～4wk），此后表达的水平逐渐下降，12nk后维持在低水平。（2）异基因组移植物的钙含量从移植后第4周开始升高，随着时间的推移逐渐升高，在12wk达到高峰，此后进入平台期。同基因组各个时间点的钙含量无差别（P〉0．05）。（3）移植后异基因组的移植物出现内皮细胞脱落和平滑肌细胞坏死。结论：同种瓣移植后移植物中的钙含量与免疫排斥反应关系密切；钙含量并不与时间完全呈正相关，在移植后4wk才开始钙化：随着时间的推移，钙含量逐渐升高，在12wk达到高峰，此后进入平台期。移植后不同时间点移植物中的钙含量并不与当时的免疫排斥反应的程度成正相关，二者互相影响。

β受体阻滞剂心肌保护作用的研究

β受体阻滞剂广泛应用于临床治疗高血压、冠心病及心律失常。近年来 ,其心肌保护作用倍受人们的关注。本文就 β受体阻滞剂心肌保护作用的理论基础 ,在减少缺血再灌注损伤、纠正慢性充血性心力衰竭、保护血管功能等各个方面分别作一综述。

利多卡因对体外循环病人炎症反应的影响

目的通过测定血浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）及白细胞介素-8（IL-8）在体外循环（CPB）心内直视手术不同阶段的浓度变化,研究利多卡因对体外循环所致的机体炎症反应的影响。方法30例择期行瓣膜置换术的风湿性心脏病病人,随机分为对照组（A组）、大剂量抑肽酶组（B组）、利多卡因组（C组）。所有病人均应用静脉复合全身麻醉,常规建立体外循环,分别于麻醉后切皮前（T1）、主动脉阻断30 min（T2）、CPB结束时（T3）、CPB后2 h（T4）、CPB后24 h（T5）取桡动脉血6 mL,即刻离心,留取上清液,-72℃深低温保存,酶联免疫吸附反应（ELISA）法检测血浆中细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8水平。结果3组TNF-α、IL-6、IL-8在CPB后即开始升高,至术后2 h达高峰,术后24 h降至正常水平。各组T3、T4时间点细胞因子浓度与其他时间点相比差异有显著性（F=81.91-183.99,q=3.18-30.39,P〈0.05）。B、C组T3、T4时间点各指标与对照组相比差异有显著性（F=13.60-149.10,q=5.31-23.67,P〈0.05）。而B组和C组相比差异无显著性（P〉0.05）。结论体外循环诱发全身炎症反应,导致炎性细胞因子的释放增加,利多卡因能减少细胞因子的释放,从而减轻CPB所致的机体炎症反应。

主动脉瘤囊-右心房分流术在主动脉手术中的应用

目的探讨主动脉瘤囊-右心房分流术在主动脉手术中的应用效果。方法回顾性分析我院2005年7月—2009年8月45例主动脉手术,其中应用主动脉瘤囊-右心房分流术18例。总结手术时间、主动脉阻断时间、术后引流量、术后输血量、二次开胸发生率。结果与未分流术组病人相比,除主动脉阻断时间及二次开胸率外,分流术组病人的手术时间短,术后第1天及术后总引流量少,术后输注红细胞及血浆量少,差异均有显著性（t=1.96~3.74,P〈0.05）。结论主动脉瘤囊-右心房分流术可以有效减少主动脉手术后出血,缩短手术时间,降低输血量,二次开胸率较低,且操作简单,值得临床推广应用。

前蛙跳式自体预贮血在猪心脏体外循环手术模型中的应用(英文)

背景:同种异体输血在相同血型的人类中已经得到实现,但关于猪的血型类型及如何异体输血国内外无确切报道。目的:探讨术前蛙跳式自体预贮血在猪心脏体外循环手术模型中应用的可行性。方法:16只家猪随机区组法分为2组,自体预贮血组、同种异体输血组。另4头猪放血供同种异体输血组异体输血应用。两组猪均在体外循环下行心脏手术。自体预贮血组手术全程仅输自体血,同种异体输血组手术全程输注等量异体血。记录自体预贮血组放血前后的血红蛋白及血细胞压积,两组术前基础值、体外循环过程中、体外循环结束后及术后1d的血红蛋白值。结果与结论:20只实验猪全身血容量(2500±428)mL;自体预贮血组第1次预计放血量为(501±86)mL,实际放血量为(493±93)mL;第2次预计放血量为(750±128)mL,实际放血量为(719±98)mL。自体预贮血组猪采血前后血红蛋白计数及血细胞压积差异有显著性意义(P<0.01)。自体预贮血组术后1d时点血红蛋白数值明显高于同种异体输血组(P<0.01),两组其余术前基础值、体外循环过程中、体外循环结束后时点血红蛋白数值差异无显著性意义(P>0.05);与术前比较,两组术后1d时点血红蛋白值显著低于术前基础值(P<0.01)。自体预贮血组存活率明显高于同种异体输血组(P<0.01)。结果说明与同种异体输血相比,术前蛙跳式自体预贮血安全有效,术后猪成活率更高。

PS-SOD脂质体的制备及其性能分析

①目的 通过肺表面活性物质 (PS)对超氧化物歧化酶 (SOD)的包裹制备PS SOD脂质体 ,从而实现SOD向肺组织细胞的靶向转运。②方法 采用旋转蒸发法将PS与SOD结合 ,制备PS SOD脂质体 ,电镜负染法观察PS SOD脂质体的形态 ,测量其大小。采用SOD试剂盒测定PS SOD脂质体中和SOD溶液中的SOD活性。利用表面张力仪测定PS和PS SOD脂质体中PS的表面张力。③结果 PS SOD脂质体在电镜下为圆形或类圆形小体 ,分散或聚集存在 ,其粒径为 (0 .4 6 3± 0 .2 2 3) μm ,脂质体的包封率为 4 0 % ,SOD的活性和PS的表面张力在脂质体制备前后均无明显改变。④结论 利用PS和SOD成功制备了PS SOD脂质体 。

“杂交技术”治疗复杂主动脉病变的效果

目的探讨＂杂交技术＂——主动脉人工血管替换并降主动脉覆膜支架置入术治疗复杂主动脉病变的效果。方法2007年2-12月,采用术中支架系统（Micro-Port CRONUS）分别为7例主动脉夹层分离、主动脉瘤以及主动脉瘤并发主动脉夹层的病人实施了＂杂交技术＂治疗。结果1例肾衰竭,自动出院。6例复查CTA显示升主动脉及主动脉弓部人工血管无扭曲、狭窄,血流通畅,带支架人工血管位置良好,降主动脉真腔较术前明显扩大,无内漏,假腔血栓形成无血流,痊愈出院。随访4~25个月,无复发。结论应用＂杂交技术＂治疗复杂主动脉病变方法简单,疗效可靠,并发症少,具有良好的应用前景。

Tenascin-C在风湿性心脏病患者血清及心脏瓣膜中的分布及意义

目的:确定肌糖蛋白-C(Tenascin-C,TN-C)在风心病患者血清及心脏瓣膜中的分布及意义.方法:临床收集正常人、先天性瓣膜畸形和风湿性心脏病患者血清,以夹心ELISA方法检测血清中TN-C浓度;手术获取先天性畸形瓣膜及风湿性心脏病瓣膜,免疫组织化学法检测TN-C的表达.结果:与正常人和先天性瓣膜畸形患者相比,风心病患者血清中大片段TN-C浓度明显增高;正常人和病情轻的先天性瓣膜畸形患者TN-C主要表达于内皮细胞下基底层,而风心病瓣膜中TN-C广泛表达.结论:TN-C在一定程度上可以作为风心病的活性标志物;TN-C可能参与了风湿性心脏瓣膜病的病理过程.

机械力作用诱导心脏瓣膜间质细胞TN-C表达及意义

目的通过压力培养细胞装置研究主动脉瓣膜间质细胞在机械力作用下肌糖蛋白-C(TN-C)表达的改变,从瓣膜对机械力损伤修复角度探讨风湿性心脏瓣膜病的发病机制。方法无菌手术获取主动脉瓣,剥除内皮层,胶原酶消化分离间质细胞,体外培养;构建产生等双轴周期性压力装置;利用机械力作用细胞后,以实时定量RT-PCR鉴定TN-C的表达;加入不同蛋白激酶阻断剂,分析参与机械力诱导TN-C的信号传导途径。结果成功构建双轴周期性压力装置;机械力通过RhoA/ROCK途径诱导TN-C的转录,而p38MAPK、PKC和ERK途径没有参与机械力诱导TN-C的表达。结论在风湿性瓣膜炎的发病过程中,机械力在TN-C的转录和表达中有一定作用,从而诱发瓣膜病理改变。

硒对风湿性心瓣膜病病人谷胱甘肽过氧化物酶基因表达的影响

①目的 探讨硒对风湿性心瓣膜病病人谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)基因表达的影响。②方法 风湿性心瓣膜病病人 30例 ,随机分为对照组和实验组 ,各 15例。实验组术前给予亚硒酸钠治疗 2周。对术中缺血前和再灌注后 30min时GPxmRNA的表达阳性率进行测定。③结果 缺血前对照组的阳性表达率为 6 .6 7% ,实验组为 73.33% ,两组比较差异有显著性 (P =0 .0 0 0 2 4 ) ;再灌注 30min后对照组的阳性表达率为 13.33% ,实验组为 93.33% ,两组比较差异有显著性 (P =0 .0 0 0 0 1)。④结论 风湿性心瓣膜病病人补硒可以提高心肌缺血前和再灌注 30min后GPxmRNA的表达水平 ,拮抗自由基对心肌细胞的脂质过氧化损伤作用。

人主动脉瓣间质细胞的分离、培养、鉴定及表型分析

目的建立人主动脉瓣间质细胞体外培养方法并鉴定其形态、类型及膜表面分子分布。方法将瓣膜置换术中获取的畸形瓣膜及风心病瓣膜内皮层剥除,用I型胶原酶消化后铺养。光镜下观察细胞的形态,将其以抗人α-平滑肌肌动蛋白抗体及核染色双标记后,以激光共聚焦显微镜观察细胞的类型。以抗干扰素(IFN)-γ受体单抗及抗肿瘤坏死因子(TNF)-α受体单抗标记细胞后,用流式细胞术分析细胞膜分子的分布。结果分离培养的主动脉间质细胞主要为肌成纤维细胞。畸形瓣膜和风心病瓣膜表面IFN-γ受体及TNF受体的分布状态不同。结论成功地建立了体外培养瓣膜间质细胞的方法,并发现来源不同的间质细胞膜表面分子的分布迥异。

主动脉内球囊反搏在冠状动脉旁路移置术围术期应用

①目的 探讨冠状动脉旁路移置术前、术中及术后应用主动脉球囊反搏 (IABP)的时机、指征 ,以提高使用的成功率。②方法 对 9例冠心病病人围手术期应用IABP治疗。③结果 全组 9例中 ,8例存活 ,死亡 1例 ,存活率为 88.9%。发生并发症 2例 ,其中血肿 1例 ,术中误穿股静脉 1例。④结论 术前预防性应用IABP及术中。

海藻糖保护同种带瓣大动脉的最适浓度

背景：目前液氮低温保护组织和器官技术已经非常成熟,但其保护剂一直以来争论不一。目的：观察不同冷冻保护剂对液氮深低温冻存同种带瓣大动脉组织细胞凋亡和代谢的影响,寻求最佳的冷冻保护剂及冷冻保护剂的最适浓度。方法：取新西兰大白兔带瓣主动脉、肺动脉标本,将其在液氮中冻存12,15,18个月,冻存液分别使用0.1mol/L二甲基亚砜,0.1mol/L海藻糖,0.1mol/L海藻糖＋0.1mol/L二甲基亚砜,0.2mol/L海藻糖＋0.1mol/L二甲基亚砜,0.3mol/L海藻糖＋0.1mol/L二甲基亚砜。标本复温后,免疫组织化学方法检测标本的细胞凋亡情况,葡萄糖消耗量测定法检测组织细胞的代谢水平。结果与结论：免疫组织化学和葡萄糖消耗量测定结果均显示经0.1mol/L海藻糖＋0.1mol/L二甲基亚砜,0.2mol/L海藻糖＋0.1mol/L二甲基亚砜冻存液处理的标本冻存效果最好,其次是经0.3mol/L海藻糖＋0.1mol/L二甲基亚砜处理和经0.1mol/L海藻糖单独处理的标本,单独使用0.1mol/L二甲基亚砜处理的标本冻存效果最差。说明海藻糖对液氮深低温保存同种带瓣大动脉活性有很好的保护作用,单独使用海藻糖优于单独使用二甲基亚砜,联合应用海藻糖和二甲基亚砜效果更好,且联合应用的海藻糖最佳浓度范围是0.10~0.20mol/L。

海藻糖对液氮保存同种带瓣大动脉组织结构的影响

目的观察3种不同保护剂对液氮冻存同种带瓣大动脉组织结构影响,寻求最佳冷冻保护剂。方法单独使用0.1mol/L二甲亚砜(对照组)及单独使用0.1mol/L海藻糖(实验组1)和0.1mol/L二甲亚砜+0.1mol/L海藻糖(实验组2)作为冷冻保护剂,用光镜及电镜对新鲜组织及液氮保存6、9、12个月的带瓣大动脉进行形态学观察。结果随着保存时间的延长,3组结构破坏均逐渐加重。光镜下观察,保存超过6个月后,3组形态学与新鲜组织比较均有改变(d=17～30,P<0.01),3组之间比较差异有显著意义(d=6～13,P<0.01、0.05)。电镜下观察,保存6、9、12个月时,对照组的同种带瓣大动脉组织的超微结构改变十分明显,实验组1改变较对照组轻,实验组2的结构改变最轻。结论海藻糖对液氮保存的带瓣大动脉有较好的保护作用;单独使用0.1mol/L海藻糖保护效果优于单独使用0.1mol/L二甲亚砜,二者联合应用保护效果明显好于单独使用。

自体心包作为主动脉瓣替代材料的可行性研究

目的探讨自体心包组织作为主动脉瓣膜替代材料的可行性及可靠性,为临床实验提供基础。方法静脉全麻、腹主动脉阻断下行心包瓣膜材料腹主动脉内移植。进行预试验,筛选实验动物。然后监测实验中动物基本生命、生理指标;采用血管超声和CTA方法评价其血流动力学指标;通过观察动物存活情况,判断是否有栓塞事件等,以评价其生物相容性。结果猪是理想的实验动物,手术死亡率6.25%。实验动物无栓塞事件发生,肉眼观察可见心包瓣内有血栓形成。结论腹主动脉阻断下心包瓣膜移植,手术安全易行,心包瓣膜模型较为可靠。建议术后应常规抗凝。