抑制VEGF基因表达对大肠癌细胞HT-29的增殖影响

选择血管内皮生长因子(VEGF)基因为靶基因,设计两组针对VEGFmRNA的小干扰RNA,合成DNA寡核苷酸链,体外转录合成siRNA.以人大肠癌细胞系HT-29为靶细胞,应用脂质体转染的方法,将siRNA导入细胞.MTT法检测siRNA对细胞增殖率的影响,RT-PCR法比较转染前后VEGFmRNA表达水平的变化,ELISA法检测细胞培养液中VEGF蛋白分泌量的变化.结果表明,两组siRNA转染后均能有效地抑制HT-29细胞的生长,VEGFmRNA的表达量大幅度减少;相对应的VEGF蛋白水平也显著降低,而作为阴性对照的错义序列组siRNA转染后则无上述作用.