转基因LIGHT的人脐血间质干细胞对胃癌抑制杀伤作用的研究

目的探讨转基因LIGHT脐血间质干细胞对胃癌的抑制杀伤作用。方法采用慢病毒载体穿梭质粒pGC-FU-LIGHT．在脂质体Lipofectamine2000介导下与结构质粒pHelper1．0和包膜质粒pHelper2．0共转染293T细胞获得慢病毒后分别感染人脐血间质干细胞．获得重组慢病毒感染的脐血间质干细胞（MSC-LIGHT）和空载体慢病毒感染的脐血间质干细胞（MSC）。人胃癌细胞SGC-7901注射到裸鼠腹股沟皮下建立胃癌移植瘤裸鼠模型。荷瘤裸鼠分为MSC-LIGHT组、MSC组和生理盐水组，每组5只，向3组裸鼠瘤周分别注射MSC-LIGHT、MSC及生理盐水。隔日1次，注射3次，第4周取材，观察注射前后瘤体生长情况。反转录PCR和ELISA法测定3组胃癌组织中LIGHT的mRNA和蛋白表达；病理切片观察瘤体的坏死面积。结果MSC．LIGHT组、MSC组和生理盐水组裸鼠肿瘤体积分别为（0．45±0．25）cm3、（0．64±0．36）cm3和（1．21±0．79）cm3，3组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。3组LIGHTmRNA相对表达量分别为2．96±0．27，1．23±0．47和0．73±0．10．蛋白浓度分别为（167．89±2．31）、（73．22±5．74）和（49．66±5．25）ng／L；3组比较差异均有统计学意义（均P〈0．01）。病理切片显示MSC-LIGHT组坏死面积最大。结论转基因脐血间质干细胞旁分泌LIGHT对胃癌细胞具有明显的抑制杀伤作用。

CD105在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨CD105在结直肠癌中的表达及其作为肿瘤新生血管标记物的临床价值。方法采用鼠抗人CD105单克隆抗体(MAb),应用免疫组织化学技术检测48例结直肠癌手术切除标本及48例对照组织的微血管密度(MVD),并以Ⅷ因子相关抗原(F-8RAg)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达作为对照研究。结果(1)MVD及VEGF在结直肠癌组织与对照组织间表达的差异具有非常显著性意义(P<0.001,P<0.01);(2)以CD105和F-8RAg测得的MVD差异具有非常显著性意义(P<0.001);(3)VEGF在结直肠癌的表达与CD105的表达呈显著正相关(P<0.01),而与F-8RAg的表达无关(P>0.05)。结论CD105在结直肠癌组织新生血管有良好表达,可以作为结直肠癌新生血管有价值的标志物。以CD105测得的MVD可以被认为是与肿瘤生长、转移及预后有关的一种重要指标。

吡咯烷二硫代氨基甲酸盐增强肿瘤坏死因子α诱导人胃癌细胞株SGC-7901凋亡作用的研究

目的研究核转录因子-κb（NF—κb）抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）对肿瘤坏死因子α（TNF—α）诱导的人胃癌细胞株SGC-7901生长抑制及凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法应用噻唑蓝（MTr）法检测不同浓度的PDTC和TNF-α以及两者联合应用对SGC-7901细胞增殖的抑制率：采用Hoechst检测SGC-7901细胞凋亡情况：Westernblot检测SGC-7901细胞survivin和easpase-3蛋白的表达。结果PDTC在15、30、60和100μmol／L浓度时．对SGC-7901的细胞生长抑制率分别为（12．14±0．91）％、（20．00±1．11）％、（37．63±1．01）％和（41.46±1．07）％．均可抑制细胞增殖（P〈0．01）。TNF-α为25mg／L时，对SGC．7901细胞的生长抑制率为（2．38±0．67）％，与对照组（1．50±0．81）％相比，差异无统计学意义（F=28．28，P〉0．05）：而在50、100和150mg／L浓度时，对SGC-7901细胞的生长抑制率分别为（4．53±0．85）％、（4．43±0．70）％和（4．74±1．07）％，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。PDTC15μmol／L分别与25、50、100和150mg／L的TNF．仅联合应用时，对SGC-7901的细胞生长抑制率则分别为（18．94±1．10）％、（30．23±0．89）％、（41．55±0．94）％和（53．34±0．98）％，与单用TNF—α或单用15μmol／LPDTC比较，细胞生长抑制率增加（P〈0．01）。Hoechst检测结果显示，TNF-α100mg／L组、PDTC15μmol／L组及两者联合应用组细胞凋亡率均显著增加（P〈0．01），且联合用药组细胞凋亡率增高最为显著（P〈0．01）。PDTC（15μmol／L）与TNF-α（100mg／L）联合用药与单用TNF—α（100mg／L）比较，细胞survivin蛋白表达明显降低（P〈0．01），与单用PDTC（15μmol／L）比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；但caspase-3蛋白的表达联合用药组较两者分别单用时显著增加（P〈0．01）。结论PDTC可增强TNF-α对人SGC-7901细胞的促凋亡作用，其机制可能与PDTC阻断TNF-α诱导的NF—κb活性、下调survivin表达并最终上调凋亡蛋白easpase-3的表达有关。