穿心莲内酯对人骨肉瘤细胞的影响及其分子机制

目的探讨穿心莲内酯(AG)对人骨肉瘤细胞的影响及其分子机制。方法分别以含有AG为0、5、10、20、50、100μmol/L(A、B、C、D、E、F组)的培养基培养人骨肉瘤细胞,倒置显微镜下计数各组细胞数,并计算各组细胞密度及细胞生存率;采用平板克隆实验观察AG对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞增殖能力的影响;Transwell小室实验观察AG对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞侵袭和迁移能力的影响;流式细胞术观察AG对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞周期分布的影响;Western Blot实验检测AG对鞘氨醇激酶(SphK1)以及黏着斑激酶(FAK)表达水平的影响。结果组别、时间以及组别与时间交互作用均对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞的生存率具有明显影响(F组别=9608.52、5409.49,F时间=8312.14、352.91,F时间*组别=18.06、3.55,P<0.05);使增殖能力呈浓度依赖性降低(FHOS=97.41,FU2OS=174.13,P<0.05);侵袭和迁移能力明显减弱(t=39.06~135.96,P<0.05);组别、周期及组别与周期交互作用均对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞的细胞周期分布具有明显影响(F组别=35.05、8.24,F周期=3211.19、192.49,F周期*组别=75.96、140.97,P<0.05);SphK1和FAK的表达水平均下调(t=15.94~95.79,P<0.05)。结论AG对人骨肉瘤细胞有杀伤作用,其可能与AG影响SphK1信号通路有关。