重组TaqDNA聚合酶在大肠杆菌中的表达与纯化

从嗜热菌Thermusaquaticus中分离出的TaqDNA聚合酶由于其热稳定性,在聚合酶链式反应(PCR)中得到广泛的应用,我们根据编码TaqDNA聚合酶的基因序列,设计出一对引物,通过PCR扩增出TaqDNA聚合酶基因,并将其克隆到表达载体pET-15b中,转化大肠杆菌E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导后,重组TaqDNA聚合酶在大肠杆菌中实现了大量表达。经过热变性、亲和层析、阳离子交换层析获得了电泳纯的重组TaqDNA聚合酶。本研究的生产程序可作为TaqDNA聚合酶生产的一种新方法。