心脏营养素-1促进脐带间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞时心肌α-actin、β-MHC、GATA4和Nkx2-5基因的表达

目的探讨心脏营养素-1（CT-1）促进经5-氮杂胞苷（5-aza）诱导的脐带间充质干细胞（UCMSCs）分化为心肌样细胞时心肌α-actin、β-MHC、GATA4、Nkx2-5基因的表达。方法分离、纯化UCMSCs,第4代UCMSCs分别以普通培养基（A组）和含0.1 nmol/L CT-1培养基（B组）培养;经5-aza诱导的第4代UCMSCs分别以普通培养基（C组）、含不同浓度CT-1培养基D组（D1组0.01 nmol/L、D2组0.1 nmol/L、D3组1.0 nmol/L）培养。应用荧光定量PCR检测各基因的表达。结果 UCMSCs培养2~3 d后细胞贴壁,逐渐由圆形变为长纤维样;经5-aza诱导分化后可见心肌样细胞,但未见自发性搏动。RT-PCR检测显示B组和C组α-actin、β-MHC、GATA4和Nkx2-5基因的表达较A组均无明显增加;α-actin、GATA4和Nkx2-5基因在D组较A组表达明显增加,其中α-actin基因在D2组表达最高,GATA4基因在D1组表达最高,Nkx2-5基因在D3组表达最高,而β-MHC基因在D组表达未见增加。结论 CT-1可明显促进5-aza诱导的UCMSCs分化为心肌样细胞,且心肌样细胞α-actin、GATA4、Nkx2-5的基因表达与CT-1的浓度有关。

低氧环境对脐带间充质干细胞相关细胞因子表达的影响

目的观察低氧环境对人脐带间充质干细胞(h UCMSCs)分泌血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、基质衍生因子-1(SDF-1)、干细胞因子(SCF)、胰岛素样生长因子(IGF-1)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)表达的影响。方法将第3代h UCMSCs分别置于20%O2(常氧组)和5%O2(低氧组)环境中培养,于8、24、32、48、56、72 h ELISA法检测培养前及培养后上清液中HGF、IGF-1、SDF-1、VEGF、b FGF、SCF、G-CSF的浓度。结果低氧组培养上清液中HGF、SDF-1、SCF、G-CSF的浓度于培养后72 h明显高于常氧组(P<0.05);VEGF的浓度于培养后56 h明显高于常氧组(P<0.05);b FGF浓度于培养后32 h明显高于常氧组(P<0.05);IGF-1浓度在培养后较常氧组无明显变化(P>0.05)。结论脐带间充质干细胞培养后可持续表达细胞因子VEGF、HGF、IGF、b FGF、SCF、SDF-1和G-CSF,且5%低氧培养环境可促进VEGF、HGF、b FGF、SCF、SDF-1和G-CSF的表达,但对IGF-1表达无影响。