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靶向调控PTEN和PI3K对肾母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响
1
作者
耿耿
鹿洪亭
+1 位作者
李庆浩
明明
《精准医学杂志》
2024年第2期114-119,共6页
目的探讨靶向调控张力蛋白同源物(PTEN)和磷脂酰肌醇激酶(PI3K)对肾母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法选取15例肾母细胞瘤患儿的术后肿瘤组织及癌旁正常组织,采用免疫印迹实验及实时荧光定量PCR方法检测组织中PTEN和PI3K蛋白...
目的探讨靶向调控张力蛋白同源物(PTEN)和磷脂酰肌醇激酶(PI3K)对肾母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法选取15例肾母细胞瘤患儿的术后肿瘤组织及癌旁正常组织,采用免疫印迹实验及实时荧光定量PCR方法检测组织中PTEN和PI3K蛋白及mRNA的表达水平;将肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞分为对照组(A组,转染NC siRNA及Flag空载体)、PTEN过表达组(B组,转染NC siRNA及Flag-PTEN表达载体)、PI3K敲低组(C组,转染siPI3K及Flag空载体)、联合靶向组(D组,转染siPI3K及Flag-PTEN)。采用免疫印迹实验检测各组转染24 h后SK-NEP-1细胞中PI3K、蛋白激酶A(AKT)及磷酸化蛋白激酶A(p-AKT)的表达水平;采用CCK-8实验检测干预第24、48、72小时时SK-NEP-1细胞增殖情况;采用流式细胞术分析各组SK-NEP-1细胞转染24 h后细胞凋亡率及细胞周期。结果与癌旁正常组织相比,肾母细胞瘤肿瘤组织中PI3K蛋白及mRNA表达水平均显著升高(t=22.862、7.098,P<0.05),PTEN蛋白及mRNA表达水平均显著降低(t=25.634、8.379,P<0.05);体外细胞实验结果显示,B、C、D组SK-NEP-1细胞中p-AKT蛋白水平明显低于A组(t=8.386~11.900,P<0.05);CCK-8实验显示,干预第48、72小时时,B、C、D组SK-NEP-1细胞吸光度值明显低于A组(t=5.163~8.647,P<0.05),干预第72小时时,D组SK-NEP-1细胞吸光度值明显低于B、C组(t=3.982、4.021,P<0.05);B、C、D组SK-NEP-1细胞早期凋亡率和晚期凋亡率均明显高于A组(t=4.673~9.563,P<0.05),D组SK-NEP-1细胞早期凋亡率和晚期凋亡率明显高于B、C组(t=5.829~8.075,P<0.05);B、C、D组SK-NEP-1细胞G 1期细胞比例明显高于A组(t=7.518~14.747,P<0.05),S期细胞比例明显低于A组(t=8.029~13.451,P<0.05),D组SK-NEP-1细胞G 1期细胞比例明显高于B、C组(t=9.930、9.732,P<0.05),S期细胞比例明显低于B、C组(t=10.281、9.927,P<0.05)。结论相比于单一靶向PTEN或PI3K,联合靶向调控PTEN和PI3K可更显著抑制肾母细胞瘤细胞生长,促进肾母细胞瘤细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制PI3K/AKT信号通路、阻断细胞周期有关。
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关键词
WILMS瘤
细胞增殖
细胞凋亡
细胞周期
PTEN磷酸水解酶
磷酸肌醇3-激酶类
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职称材料
地榆皂苷Ⅱ逆转人神经母细胞瘤细胞对顺铂耐药的影响及机制研究
2
作者
耿国庆
高廷
+2 位作者
鹿洪亭
李庆浩
徐永涛
《中药材》
CAS
北大核心
2023年第11期2844-2850,共7页
目的:观察地榆皂苷Ⅱ逆转人神经母细胞瘤细胞对顺铂耐药的作用并探讨其机制。方法:建立对顺铂耐药的人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y/DDP和KELLY/DDP,采用CCK-8法测定地榆皂苷Ⅱ对细胞增殖的直接抑制作用及对SH-SY5Y/DDP和KELLY/DDP耐药性...
目的:观察地榆皂苷Ⅱ逆转人神经母细胞瘤细胞对顺铂耐药的作用并探讨其机制。方法:建立对顺铂耐药的人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y/DDP和KELLY/DDP,采用CCK-8法测定地榆皂苷Ⅱ对细胞增殖的直接抑制作用及对SH-SY5Y/DDP和KELLY/DDP耐药性的逆转作用,Transwell小室实验和划痕试验检测地榆皂苷Ⅱ对细胞侵袭和迁移能力的影响,流式细胞术测定地榆皂苷Ⅱ对细胞周期和细胞凋亡的影响,qRT-PCR和Western Blot测定地榆皂苷Ⅱ对细胞中Cdc2和AKT/PI3K信号通路mRNA和蛋白表达的影响。结果:地榆皂苷Ⅱ可浓度依赖性地抑制SH-SY5Y/DDP和KELLY/DDP增殖,改善顺铂对耐药人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y/DDP和KELLY/DDP增殖的抑制作用,并抑制其侵袭、迁移能力,促进其发生G_(2)/M期阻滞及凋亡,降低其p-Cdc2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白和Cdc2、PI3K、AKT、mTOR mRNA及蛋白表达。结论:地榆皂苷Ⅱ可逆转人神经母细胞瘤对顺铂的耐药,其作用机制可能与抑制细胞侵袭和迁移,促进G_(2)/M期阻滞和细胞凋亡,抑制调控细胞周期蛋白Cdc2和PI3K/AKT信号通路有关。
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关键词
地榆皂苷Ⅱ
人神经母细胞瘤
耐药
细胞周期
细胞凋亡
CDC2
PI3K/AKT信号通路
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职称材料
题名
靶向调控PTEN和PI3K对肾母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响
1
作者
耿耿
鹿洪亭
李庆浩
明明
机构
青岛大学附属泰安市中心医院儿童外科
青岛大学
附属
妇女
儿童
医院
出处
《精准医学杂志》
2024年第2期114-119,共6页
基金
中国高校产学研创新基金-北创助教项目(2021BCF01003)。
文摘
目的探讨靶向调控张力蛋白同源物(PTEN)和磷脂酰肌醇激酶(PI3K)对肾母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法选取15例肾母细胞瘤患儿的术后肿瘤组织及癌旁正常组织,采用免疫印迹实验及实时荧光定量PCR方法检测组织中PTEN和PI3K蛋白及mRNA的表达水平;将肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞分为对照组(A组,转染NC siRNA及Flag空载体)、PTEN过表达组(B组,转染NC siRNA及Flag-PTEN表达载体)、PI3K敲低组(C组,转染siPI3K及Flag空载体)、联合靶向组(D组,转染siPI3K及Flag-PTEN)。采用免疫印迹实验检测各组转染24 h后SK-NEP-1细胞中PI3K、蛋白激酶A(AKT)及磷酸化蛋白激酶A(p-AKT)的表达水平;采用CCK-8实验检测干预第24、48、72小时时SK-NEP-1细胞增殖情况;采用流式细胞术分析各组SK-NEP-1细胞转染24 h后细胞凋亡率及细胞周期。结果与癌旁正常组织相比,肾母细胞瘤肿瘤组织中PI3K蛋白及mRNA表达水平均显著升高(t=22.862、7.098,P<0.05),PTEN蛋白及mRNA表达水平均显著降低(t=25.634、8.379,P<0.05);体外细胞实验结果显示,B、C、D组SK-NEP-1细胞中p-AKT蛋白水平明显低于A组(t=8.386~11.900,P<0.05);CCK-8实验显示,干预第48、72小时时,B、C、D组SK-NEP-1细胞吸光度值明显低于A组(t=5.163~8.647,P<0.05),干预第72小时时,D组SK-NEP-1细胞吸光度值明显低于B、C组(t=3.982、4.021,P<0.05);B、C、D组SK-NEP-1细胞早期凋亡率和晚期凋亡率均明显高于A组(t=4.673~9.563,P<0.05),D组SK-NEP-1细胞早期凋亡率和晚期凋亡率明显高于B、C组(t=5.829~8.075,P<0.05);B、C、D组SK-NEP-1细胞G 1期细胞比例明显高于A组(t=7.518~14.747,P<0.05),S期细胞比例明显低于A组(t=8.029~13.451,P<0.05),D组SK-NEP-1细胞G 1期细胞比例明显高于B、C组(t=9.930、9.732,P<0.05),S期细胞比例明显低于B、C组(t=10.281、9.927,P<0.05)。结论相比于单一靶向PTEN或PI3K,联合靶向调控PTEN和PI3K可更显著抑制肾母细胞瘤细胞生长,促进肾母细胞瘤细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制PI3K/AKT信号通路、阻断细胞周期有关。
关键词
WILMS瘤
细胞增殖
细胞凋亡
细胞周期
PTEN磷酸水解酶
磷酸肌醇3-激酶类
Keywords
Wilms tumor
Cell proliferation
Apoptosis
Cell cycle
PTEN phosphohydrolase
Phosphatidylinositol 3-kinases
分类号
R737.11 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
地榆皂苷Ⅱ逆转人神经母细胞瘤细胞对顺铂耐药的影响及机制研究
2
作者
耿国庆
高廷
鹿洪亭
李庆浩
徐永涛
机构
青岛大学附属泰安市中心医院儿童外科
中心
儿童
骨科
青岛大学附属泰安市中心医院儿童外科
中心
青岛大学
附属
妇女
儿童
医院
儿童
外科
中心
出处
《中药材》
CAS
北大核心
2023年第11期2844-2850,共7页
基金
山东省自然科学基金面上项目(ZR2020MH213)。
文摘
目的:观察地榆皂苷Ⅱ逆转人神经母细胞瘤细胞对顺铂耐药的作用并探讨其机制。方法:建立对顺铂耐药的人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y/DDP和KELLY/DDP,采用CCK-8法测定地榆皂苷Ⅱ对细胞增殖的直接抑制作用及对SH-SY5Y/DDP和KELLY/DDP耐药性的逆转作用,Transwell小室实验和划痕试验检测地榆皂苷Ⅱ对细胞侵袭和迁移能力的影响,流式细胞术测定地榆皂苷Ⅱ对细胞周期和细胞凋亡的影响,qRT-PCR和Western Blot测定地榆皂苷Ⅱ对细胞中Cdc2和AKT/PI3K信号通路mRNA和蛋白表达的影响。结果:地榆皂苷Ⅱ可浓度依赖性地抑制SH-SY5Y/DDP和KELLY/DDP增殖,改善顺铂对耐药人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y/DDP和KELLY/DDP增殖的抑制作用,并抑制其侵袭、迁移能力,促进其发生G_(2)/M期阻滞及凋亡,降低其p-Cdc2、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白和Cdc2、PI3K、AKT、mTOR mRNA及蛋白表达。结论:地榆皂苷Ⅱ可逆转人神经母细胞瘤对顺铂的耐药,其作用机制可能与抑制细胞侵袭和迁移,促进G_(2)/M期阻滞和细胞凋亡,抑制调控细胞周期蛋白Cdc2和PI3K/AKT信号通路有关。
关键词
地榆皂苷Ⅱ
人神经母细胞瘤
耐药
细胞周期
细胞凋亡
CDC2
PI3K/AKT信号通路
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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题名
作者
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被引量
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1
靶向调控PTEN和PI3K对肾母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响
耿耿
鹿洪亭
李庆浩
明明
《精准医学杂志》
2024
0
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职称材料
2
地榆皂苷Ⅱ逆转人神经母细胞瘤细胞对顺铂耐药的影响及机制研究
耿国庆
高廷
鹿洪亭
李庆浩
徐永涛
《中药材》
CAS
北大核心
2023
0
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