缬沙坦通过Akt信号通路抑制宫颈癌Hela细胞增殖、迁移及侵袭的研究

目的:观察血管紧张素II 1型受体拮抗剂缬沙坦(Valsartan)对宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移及侵袭的影响及机制。方法:体外培养宫颈癌Hela细胞。采用不同浓度(0.1、1、10和100 μmol/L)的缬沙坦分别处理Hela细胞0、24、48 h,CCK-8法检测Hela细胞的增殖能力。缬沙坦(100 μmol/L)处理Hela细胞24 h后,采用划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验分别检测迁移及侵袭能力,蛋白质印迹法检测缬沙坦(10和100 μmol/L)处理Hela细胞24 h后,Hela细胞中Akt、p-Akt蛋白的表达情况。随后,在Hela细胞中加入Akt激动剂预处理1 h后,再加入缬沙坦(100 μmol/L)培养Hela细胞,采用cck-8法检测Hela细胞增殖能力,采用划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验,检测Hela细胞的迁移和侵袭能力。结果:使用缬沙坦(10和100 μmol/L)处理Hela细胞,能够抑制Hela细胞的增殖作用(p 【0.01),缬沙坦(100 μmol/L)处理细胞后能够明显抑制Hela细胞的迁移及侵袭能力(p 【0.01);缬沙坦(100 μmol/L)处理过的Hela细胞中p-Akt蛋白的表达量降低(p 【0.01)。Akt激动剂减弱了缬沙坦对Hela细胞的增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论:缬沙坦对宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移及侵袭能力有明显的抑制作用,这种抑制作用可能是通过抑制Akt信号通路实现的。

人脐带间充质干细胞促进Siha细胞侵袭和迁移作用机制研究

目的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种来源于中胚层的多功能祖细胞,有望成为恶性肿瘤靶向治疗的理想载体,但其对宫颈癌发生发展过程中所起的作用尚不明确。本研究探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSCs)对宫颈癌Siha细胞生物学行为的影响及分子机制。方法体外培养宫颈癌Siha细胞,分为对照组和共培养组。对照组予以常规培养,共培养组与HUC-MSCs共培养,CCK8实验、划痕实验、Transwell实验分别检测HUC-MSCs对Siha细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,实时荧光定量PCR检测Siha细胞基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases-2,MMP2)和MMP9 mRNA的表达量,蛋白质印迹检测Siha细胞MMP2、MMP9、E-cadherin、Vimentin和Snail蛋白表达量的变化。结果 CCK8实验结果显示,HUC-MSCs可促进Siha细胞的增殖能力,且具有时间依赖性,F组别=425.24,F时间=62.15,F组别×时间=24.26,均P<0.001。划痕实验结果显示,共培养组的愈合率为(23.80±1.39)%,高于对照组的(10.35±0.71)%,差异有统计学意义,t=8.62,P<0.001。Transwell实验结果显示,共培养组的穿膜细胞数为80.50±4.94,高于对照组的51.75±6.22,差异有统计学意义,t=3.62,P<0.05。共培养后的Siha细胞与对照组相比,MMP2和MMP9的蛋白(tMMP2=5.25,P<0.01;tMMP9=3.50,P<0.05)和mRNA(tMMP2=4.59,tMMP9=3.46,均P<0.01)表达量均升高,Vimentin(t=8.60,P<0.001)和Snail(t=9.83,P<0.001)的蛋白表达量升高,而E-cadherin的蛋白表达量降低,t=12.76,P<0.001,差异均有统计学意义。结论 HUC-MSCs能够促进宫颈癌Siha细胞的侵袭、迁移能力,其机制可能与MMP2和MMP9表达量的增多及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的发生有关。

整合素α5在子宫颈癌中的表达及其意义

目的研究整合素α5在子宫颈癌中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测青岛市市立医院2014年1月至2017年12月60例子宫颈癌石蜡包埋组织及20例因子宫良性病变行全子宫切除术的正常子宫颈石蜡包埋组织中整合素α5蛋白的表达水平。应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测青岛市市立医院2018年1月至7月20例新鲜子宫颈癌组织及20例良性子宫病变的正常子宫颈组织中整合素α5 mRNA的表达水平。分析整合素α5的表达与子宫颈癌患者临床病理特征的关系。结果整合素α5蛋白在子宫颈癌及正常子宫颈组织中的阳性表达率分别为63.3%(38/60)、35.0%(7/20),差异有统计学意义(χ2=4.893,P<0.05)。整合素α5 mRNA在子宫颈癌中相对于正常子宫颈组织的表达量(2-△△Ct)为1.6±0.4(t=5.529,P<0.01)。整合素α5蛋白的阳性表达与子宫颈癌的淋巴结转移有关(Z=-2.636,P=0.008)。结论整合素α5在子宫颈癌组织中高表达,且与淋巴结转移有关,有望成为子宫颈癌治疗的新靶点。