拜阿司匹林在妇科恶性肿瘤PICC置管患者中的应用价值

目的观察经外周静脉穿刺中心静脉置管(peripherally inserted central venous catheters,PICC)的妇科恶性肿瘤患者口服抗凝药物拜阿司匹林后静脉炎及静脉血栓的发生率,评价拜阿司匹林在预防恶性肿瘤导管相关静脉炎及静脉血栓中的作用。方法选取2013年12月至2016年12月本院需行化学治疗而行PICC置管的妇科恶性肿瘤患者210例,随机分为研究组(口服拜阿司匹林100mg抗凝治疗)和对照组(不行抗凝治疗),每组105例。观察两组患者血小板升高率、血浆D-二聚体升高率、静脉炎发生率和静脉血栓发生率。结果研究组的血小板升高率、D-二聚体升高率、静脉炎发生率和静脉血栓发生率均显著低于对照组(P均<0.05)。结论拜阿司匹林抗凝治疗可降低妇科恶性肿瘤患者的血液高凝状态,进而减少其静脉炎及静脉血栓的发生。

转铁蛋白受体对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制

目的探讨转铁蛋白受体(TFRC)对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭、上皮-间充质转化的影响及可能的作用机制。方法慢病毒构建敲低和过表达TFRC的宫颈癌细胞系,并分为空白对照组、TFRC敲低阴性对照组、TFRC敲低组、TFRC过表达阴性对照组及TFRC过表达组。用蛋白印迹分析法检测TFRC、真核起始因子(EIF4A3)、E-钙黏蛋白(E-cadberin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和锌指转录因子(Snail)的表达情况,通过平板克隆、细胞划痕和Transwell侵袭实验检测宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果与空白对照组相比,TFRC敲低组EIF4A3、N-cadherin、Vimentin和Snail蛋白表达水平下降、E-cadberin蛋白表达水平升高,细胞克隆数减少、迁移率下降和侵袭细胞数量减少(P均<0.05);相反,TFRC过表达组EIF4A3、N-cadherin、Vimentin和Snail表达量增加、E-cadberin表达量减少,细胞克隆数增加、迁移迁移率升高和侵袭细胞数量增加(P均<0.05)。结论TFRC在宫颈癌中呈高表达,通过调节EIF4A3可促进宫颈癌的增殖、迁移、侵袭、上皮-间充质转化;过表达和敲低EIF4A3可相应抵消敲低和过表达TFRC对宫颈癌细胞恶性生物学行为产生的影响。

慢病毒载体MicroRNA-375过表达调控EMT通路抑制结直肠癌细胞侵袭和迁移

目的:通过慢病毒载体构建microRNA-375过表达的结直肠癌细胞HCT116,研究microRNA-375通过调控EMT通路抑制结直肠癌细胞在人体中侵袭、迁移的作用。方法:通过慢病毒载体转染构建并培养出HCT116细胞的microRNA-375过表达实验组(过表达组)、设立空载体对照组(空载体组)、空白对照组(空白组)。实时逆转录PCR检测3组细胞中microRNA-375的表达情况。Trans-well小室模型检测3组细胞的侵袭能力。划痕实验检测3组细胞的迁移能力。Western blot蛋白质印迹法检测3组细胞EMT通路中蛋白质的相对含量。结果:慢病毒载体转染成功,构建并培养出microRNA-375过表达实验组和空载体对照组的HCT116细胞。过表达组细胞的microRNA-375相对表达量较空载体组和空白组明显升高(P<0.05);空载体组和空白组细胞的microRNA-375相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。过表达组细胞的侵袭、迁移能力较空载体组和空白组减弱(P<0.05);空载体组和空白组细胞的侵袭、迁移能力差异无统计学意义(P>0.05)。过表达组细胞的EMT过程较空载体组和空白组受抑制(P<0.05);空载体组和空白组细胞的EMT过程差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MicroRNA-375作为抑癌因子,可通过抑制EMT通路,发挥抑制结直肠癌细胞在人体中侵袭和迁移的作用。

血清细胞因子在宫颈癌发生发展中作用的研究进展

宫颈癌的死亡风险较高,早期干预与治疗对患者生存和预后尤为重要。宫颈癌的发生、发展是一个多阶段、多步骤的复杂过程,除与持续性的人乳头瘤病毒感染有关外,还与多种血清细胞因子密切相关,如白细胞介素类细胞因子、肿瘤相关巨噬细胞等均可影响患者的免疫功能。而免疫反应可影响肿瘤的发生、发展,多种细胞因子参与宫颈癌的发生、发展。目前与宫颈癌有关的血清细胞因子较多,其在宫颈癌发生、发展等过程中的具体作用机制尚不明确,仍有待进一步探讨。

硫酸右旋糖苷对宫颈癌细胞迁移、侵袭的影响及其分子机制

目的探讨硫酸右旋糖苷(DS)对宫颈癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响,并探讨其作用机制。方法取宫颈癌Hela细胞,分别加入0、0.1%、0.3%、0.6%、1%的DS处理,采用CCK-8增殖实验筛选DS的最佳作用浓度和最佳作用时间分别为0.3%和48 h,选择该浓度与作用时间进行后续实验。将Hela细胞分为对照组、DS组、DS+740Y-P组,对照组仅加入完全培养基,DS组加入0.3%DS,DS+740Y-P组加入0.3%DS和20μmol/L PI3K激动剂740Y-P,分别培养48 h。采用划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,Westernblotting法检测细胞PI3K/AKT信号通路相关蛋白p-AKT、AKT(以p-AKT/AKT值表示通路活性)及EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin蛋白表达。结果与对照组相比,DS组细胞迁移率降低,穿膜细胞数减少,细胞中p-AKT/AKT、Vimentin蛋白表达水平降低,E-cadherin蛋白表达水平升高(P均<0.05)。与DS组相比,DS+740Y-P组细胞迁移率升高,穿膜细胞数增多,细胞p-AKT/AKT蛋白、Vimentin蛋白表达水平升高,E-cadherin蛋白表达水平降低(P均<0.05)。结论DS能够抑制宫颈癌Hela细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能是通过PI3K/AKT信号通路调控EMT从而发挥抑制肿瘤作用。

缬沙坦通过Akt信号通路抑制宫颈癌Hela细胞增殖、迁移及侵袭的研究

目的:观察血管紧张素II 1型受体拮抗剂缬沙坦(Valsartan)对宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移及侵袭的影响及机制。方法:体外培养宫颈癌Hela细胞。采用不同浓度(0.1、1、10和100 μmol/L)的缬沙坦分别处理Hela细胞0、24、48 h,CCK-8法检测Hela细胞的增殖能力。缬沙坦(100 μmol/L)处理Hela细胞24 h后,采用划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验分别检测迁移及侵袭能力,蛋白质印迹法检测缬沙坦(10和100 μmol/L)处理Hela细胞24 h后,Hela细胞中Akt、p-Akt蛋白的表达情况。随后,在Hela细胞中加入Akt激动剂预处理1 h后,再加入缬沙坦(100 μmol/L)培养Hela细胞,采用cck-8法检测Hela细胞增殖能力,采用划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验,检测Hela细胞的迁移和侵袭能力。结果:使用缬沙坦(10和100 μmol/L)处理Hela细胞,能够抑制Hela细胞的增殖作用(p 【0.01),缬沙坦(100 μmol/L)处理细胞后能够明显抑制Hela细胞的迁移及侵袭能力(p 【0.01);缬沙坦(100 μmol/L)处理过的Hela细胞中p-Akt蛋白的表达量降低(p 【0.01)。Akt激动剂减弱了缬沙坦对Hela细胞的增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论:缬沙坦对宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移及侵袭能力有明显的抑制作用,这种抑制作用可能是通过抑制Akt信号通路实现的。

整合素α5与上皮性卵巢癌的相关性研究

目的研究整合素α5(integrinα5)蛋白在上皮性卵巢肿瘤中的表达情况,并分析其与上皮性卵巢癌的临床病理关系。方法选择2015年1月~2017年12月山东省青岛市市立医院妇科中心80例住院患者的卵巢肿瘤组织(上皮性卵巢癌40例,交界性上皮性肿瘤20例,良性上皮性肿瘤20例),采用免疫组织化学法检测integrinα5蛋白在卵巢肿瘤组织中的表达情况。结果上皮性卵巢癌组织中integrinα5阳性率为80.00%(32/40),显著高于交界性上皮性肿瘤组织[40.00%(8/20)]和良性上皮性肿瘤组织[20.00%(4/20)](P<0.01)。上皮性卵巢癌组织中integrinα5蛋白的阳性表达率在不同年龄、病理类型间比较,差异无统计学意义(P>0.05);而在不同病理分化程度、病理分期间比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);在有无淋巴结转移之间比较,差异有高度统计学意义(P<0.01)。Spearman等级相关分析显示上皮性卵巢癌组织中integrinα5的表达与卵巢癌的手术病理分期、病理分化程度、有无淋巴结转移呈显著正相关(r=0.854、0.765、0.895,P<0.05)。结论integrinα5在上皮性卵巢癌组织中过量表达,与病理分化程度、病理分期及淋巴结转移密切相关,通过监测integrinα5的表达,可能帮助判断卵巢癌患者的远期预后以及指导临床治疗。

血液透析患者血清牙本质基质蛋白1与矿物质代谢及骨密度的关系

目的探讨维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者血清牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)与矿物质代谢及骨密度的关系。方法以2019年7月~2020年7月于青岛大学附属青岛市市立医院血液净化中心行MHD治疗的95名患者作为研究对象。收集研究对象的临床资料和实验室检查结果,ELISA测定血清DMP1水平,双能X线吸收法检测MHD患者股骨颈骨密度。采用Spearman相关性分析、多元线性回归分析MHD患者血清DMP1水平的影响因素。二元Logistic回归分析MHD患者发生骨密度低下的影响因素。结果①MHD患者的血清DMP1水平低于健康人群,差异有统计学意义(Z=-3.218,P=0.001)。②Spearman相关性分析显示DMP1水平与年龄、透析龄呈负相关,与肾小球滤过率(eGFR)、甲状旁腺激素(PTH)、股骨颈骨密度T值呈正相关(r值分别为-0.226,-0.223,0.210,0.294,0.370;P值分别为0.028,0.030,0.041,0.004,<0.001)。多元线性回归分析显示,血清DMP1水平的独立影响因素是PTH和股骨颈骨密度T值(β值分别为0.211,0.399;P值分别为0.032,0.001)。③二元Logistic回归分析显示,在调整了年龄、透析龄、白蛋白、碱性磷酸酶和血钙等混杂因素后,血清高DMP1水平是MHD患者发生骨密度低下的独立保护因素(OR:0.913,95%CI:0.845~0.986,P=0.020)。结论MHD患者的血清DMP1水平较健康人群低,且与矿物质代谢及骨密度相关。

单纯性输卵管扭转一例报告

单纯性输卵管扭转是一种罕见的妇科急腹症。临床表现缺乏特异性,主要症状为持续性下腹痛伴阵发性加重。其治疗以手术为主。为提高对输卵管扭转的认识,避免延误最佳治疗时机。本文报道1例单纯性输卵管扭转后24小时内得到及时处理的病例。患者24岁,因“左下腹痛半小时”就诊于我院,完善相关检查及化验后行腹腔镜探查术,术后病理检查确诊为单纯性输卵管扭转,术后恢复良好。现结合文献复习对本病的临床特点、诊断、治疗及预后进行探讨。

早期宫颈癌脉管癌栓及其相关因素研究进展

在绝大多数类型的恶性肿瘤中,脉管癌栓的存在是一个公认的不良预后因素。近年来,脉管癌栓影响早期宫颈癌病人的预后得到广泛关注,但有关脉管癌栓形成机制尚未完全阐明。目前,临床上有关宫颈癌病人预后的危险因素有淋巴结转移、宫旁转移、临床分期、间质浸润深度、肿瘤大小、组织类型及术前鳞状细胞癌抗原浓度等。脉管癌栓是否与这些危险因素有关,特别是与淋巴结及宫旁转移的关系,目前研究较少。本文对早期宫颈癌脉管癌栓形成机制及与其他临床病理特征的关系进行综述。

TFRC通过JAK-STAT信号通路影响宫颈鳞状细胞癌的增殖、迁移和侵袭

目的探讨转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFRC)通过JAK-STAT通路对宫颈鳞状细胞癌的增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集2020年8月至2021年12月于青岛市市立医院就诊的30例宫颈鳞状细胞癌患者的组织标本和20例正常宫颈者的组织进行免疫组织化学检测TFRC的表达情况;用慢病毒构建TFRC敲低的Hela和Siha细胞稳转株;用CCK8、Transwell迁移和侵袭实验方法检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力;用蛋白印迹分析法等方法检测TFRC表达量及JAK-STAT通路相关蛋白表达情况;为进一步明确TFRC是否通过JAK-STAT通路发挥作用,于Hela细胞的TFRC敲低组中加入JAK通路激动剂(Coumermycin A1)后,行功能回复实验,验证其相关性。结果通过分析免疫组化结果发现TFRC在宫颈鳞状细胞癌组织呈高表达(P<0.05);细胞实验证明敲低TFRC后细胞增殖、迁移和侵袭能力均下降(P<0.05),抑制宫颈鳞状细胞癌的进展,JAK-STAT通路相关蛋白表达水平下降(P<0.05);而加入Coumermycin A1后JAK-STAT通路相关蛋白表达水平升高,且可逆转敲低TFRC后所产生的抑制作用(P<0.05)。结论TFRC在宫颈鳞状细胞癌中呈高表达,可能通过影响JAK-STAT通路促进宫颈鳞状细胞癌的增殖、迁移和侵袭。

高危型人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA检测在宫颈病变筛查中的应用

目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)E6/E7mRNA检测法,在宫颈病变筛查中的临床价值。方法选择2013年1月至2015年12月,在青岛市市立医院及青岛市城阳人民医院妇科门诊进行宫颈癌联合筛查,并进行阴道镜宫颈活组织检查的1 659例女性受试者为研究对象。统计学比较不同病理学检查结果中,第二代杂交捕获技术(HC2)法、HPV基因分型法及HPV E6/E7mRNA检测法3种HPV检测方法检测的HPV阳性率变化及其差异,并对HPV E6/E7mRNA检测法与HPV检测的金标准HC2法,在宫颈上皮内瘤变(CIN)2+(对宫颈病变病理学诊断结果≥CIN2者,则记为CIN2+)患者中HPV阳性率的诊断一致性进行分析。本研究与所有受试者签署知情同意书,研究方案及试验设计经过青岛市市立医院及青岛市城阳区人民医院院伦理委员会批准。结果 (1)3种HPV检测方法在不同宫颈活组织检查结果中的HPV阳性率两两比较结果均显示,HPV阳性率在正常或CIN1中,均低于CIN2或3,并且差异均有统计学意义(P<0.05);而在CIN2与3之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HPV E6/E7mRNA检测法的HPV阳性率在CIN1中显著高于正常宫颈组织,并且差异有统计学意义(P<0.05)。(2)仅在病理学结果为正常宫颈组织中,HPV E6/E7mRNA检测法的HPV阳性率(61.4%)低于HC2法(73.7%)或HPV基因分型法(77.3%),并且差异有统计学意义(P<0.05)。(3)HC2法和HPV E6/E7 mRNA检测法在CIN2+患者中HPV阳性率的粗符合率为82.6%(100/121),Kappa值为0.69。结论 HPV E6/E7mRNA检测法较HC2法,能更好反映宫颈病变的程度。这2种检测方法在宫颈病变CIN2+中HPV阳性率的诊断一致性较好。

神经周围浸润的发生机制及对早期宫颈癌的影响

神经周围浸润（PNI）发生的机制可能有：微环境的影响,癌细胞与神经之间的相互作用,基质细胞的作用,癌细胞自身的作用,神经营养因子与受体及趋化因子与受体参与的癌细胞与神经组织间的信号转导.其对早期宫颈癌在手术方式、辅助治疗、预后等方面产生影响.

人脐带间充质干细胞促进Siha细胞侵袭和迁移作用机制研究

目的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种来源于中胚层的多功能祖细胞,有望成为恶性肿瘤靶向治疗的理想载体,但其对宫颈癌发生发展过程中所起的作用尚不明确。本研究探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSCs)对宫颈癌Siha细胞生物学行为的影响及分子机制。方法体外培养宫颈癌Siha细胞,分为对照组和共培养组。对照组予以常规培养,共培养组与HUC-MSCs共培养,CCK8实验、划痕实验、Transwell实验分别检测HUC-MSCs对Siha细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,实时荧光定量PCR检测Siha细胞基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases-2,MMP2)和MMP9 mRNA的表达量,蛋白质印迹检测Siha细胞MMP2、MMP9、E-cadherin、Vimentin和Snail蛋白表达量的变化。结果 CCK8实验结果显示,HUC-MSCs可促进Siha细胞的增殖能力,且具有时间依赖性,F组别=425.24,F时间=62.15,F组别×时间=24.26,均P<0.001。划痕实验结果显示,共培养组的愈合率为(23.80±1.39)%,高于对照组的(10.35±0.71)%,差异有统计学意义,t=8.62,P<0.001。Transwell实验结果显示,共培养组的穿膜细胞数为80.50±4.94,高于对照组的51.75±6.22,差异有统计学意义,t=3.62,P<0.05。共培养后的Siha细胞与对照组相比,MMP2和MMP9的蛋白(tMMP2=5.25,P<0.01;tMMP9=3.50,P<0.05)和mRNA(tMMP2=4.59,tMMP9=3.46,均P<0.01)表达量均升高,Vimentin(t=8.60,P<0.001)和Snail(t=9.83,P<0.001)的蛋白表达量升高,而E-cadherin的蛋白表达量降低,t=12.76,P<0.001,差异均有统计学意义。结论 HUC-MSCs能够促进宫颈癌Siha细胞的侵袭、迁移能力,其机制可能与MMP2和MMP9表达量的增多及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的发生有关。

整合素α5在子宫颈癌中的表达及其意义

目的研究整合素α5在子宫颈癌中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测青岛市市立医院2014年1月至2017年12月60例子宫颈癌石蜡包埋组织及20例因子宫良性病变行全子宫切除术的正常子宫颈石蜡包埋组织中整合素α5蛋白的表达水平。应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测青岛市市立医院2018年1月至7月20例新鲜子宫颈癌组织及20例良性子宫病变的正常子宫颈组织中整合素α5 mRNA的表达水平。分析整合素α5的表达与子宫颈癌患者临床病理特征的关系。结果整合素α5蛋白在子宫颈癌及正常子宫颈组织中的阳性表达率分别为63.3%(38/60)、35.0%(7/20),差异有统计学意义(χ2=4.893,P<0.05)。整合素α5 mRNA在子宫颈癌中相对于正常子宫颈组织的表达量(2-△△Ct)为1.6±0.4(t=5.529,P<0.01)。整合素α5蛋白的阳性表达与子宫颈癌的淋巴结转移有关(Z=-2.636,P=0.008)。结论整合素α5在子宫颈癌组织中高表达,且与淋巴结转移有关,有望成为子宫颈癌治疗的新靶点。

硫酸右旋糖酐对卵巢癌细胞A2780增殖和迁移及侵袭机制研究

目的观察硫酸右旋糖酐(DS)对人卵巢癌细胞A2780生物学行为的影响及可能的分子机制。方法体外培养人浆液性卵巢癌细胞A2780,将其分为空白对照组、不同浓度(质量分数分别为0.1%、0.3%、0.6%和1%)DS处理组及1%DS+AKT激动剂组。通过细胞增殖实验、划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验检测A2780细胞的增殖、迁移和侵袭的影响;蛋白质印迹法检测AKT和p-Akt的表达。两独立样本比较采用t检验,双因素数据间比较采用两因素方差分析。结果细胞实验表明,DS对A2780细胞的增殖具有抑制作用,并呈浓度和时间依赖性,差异有统计学意义(F_(处理)=81.66;F_(时间)=321.2;F_(处理×时间)=15.84,均P<0.0001)。划痕实验显示,DS呈剂量依赖性地抑制A2780细胞迁移,0、0.3%和1%DS处理A2780细胞不同时间后,差异有统计学意义(F_(处理)=40.96,P<0.0001;F_(时间)=73.32,P<0.0001;F_(处理×时间)=5.075,P=0.0017)。Transwell实验结果表明,空白对照组、0.3%DS处理组和1%DS处理组迁移细胞数分别为(514.13±19.56)、(251.59±15.95)和(101.67±10.07)个/HP,两处理组分别与空白对照组相比差异均有统计学意义,t值分别为32.47和18.02,均P<0.0001;0.3%DS处理组和1%DS处理组相比差异有统计学意义,t=13.77,P<0.001。空白对照组、0.3%DS处理组和1%DS处理组侵袭细胞数分别为(553.27±18.79)、(231.67±17.75)和(91.54±7.13)个/HP,两处理组分别与空白对照组相比差异有统计学意义,t值分别为21.55和39.79,均P<0.0001;0.3%DS处理组和1%DS处理组相比差异有统计学意义,t=12.69,P<0.001。蛋白质印迹结果显示,0.3%和1%DS处理A2780细胞24 h后,AKT表达量与对照组相比没有改变;p-AKT蛋白相对表达量均低于对照组,差异均有统计学意义,t值分别为8.143和26.19,均P<0.005;0.3%DS处理组与1%DS处理组相比差异有统计学意义,t=11.67,P<0.001。加入AKT激动剂后,DS对卵巢癌细胞的抑制作用消失。结论DS能够抑制A2780细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与人卵巢癌细胞A2780 p-AKT蛋白表达量降低与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

Irisin通过PI3K/AKT/Cyclin D1途径促进宫颈癌HeLa细胞增殖的机制研究

目的探讨鸢尾素(Irisin)对宫颈癌Hela细胞生物学行为的影响及促增殖分子机制。方法体外培养人宫颈癌Hela细胞,加入不同浓度Irisin处理,CCK-8(cell counting kit-8)法、平板克隆实验检测Irisin对细胞增殖和集落形成能力的影响,划痕、Transwell侵袭实验检测Irisin对细胞迁移、侵袭能力的影响。设置对照组、Irisin组、Irisin+AKT抑制剂组,流式细胞周期实验检测Irisin对细胞周期分布的影响,Western Blot法检测Cyclin D1及AKT、p-AKT表达量的改变。结果CCK-8、平板克隆结果示,Irisin显著促进宫颈癌Hela细胞的增殖和集落形成(P<0.05)。划痕、Transwell结果示,Irisin显著提高划痕愈合率及穿膜细胞数(P均<0.05)。流式细胞周期实验、WB结果示,与对照组相比,Irisin组G1期细胞比例减少,S期比例增多,Cyclin D1和p-AKT/AKT的表达上调(P均<0.05)。与Irisin组相比,Irisin+AKT抑制剂组G1期细胞比例增加,S期比例减少,Cyclin D1和p-AKT/AKT表达下调(P<0.05)。结论Irisin促进宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移及侵袭力,其促增殖机制可能与激活PI3K/AKT信号通路,上调细胞周期蛋白的表达,加快细胞周期进程相关。