硫酸右旋糖酐对卵巢癌细胞A2780增殖和迁移及侵袭机制研究

目的观察硫酸右旋糖酐(DS)对人卵巢癌细胞A2780生物学行为的影响及可能的分子机制。方法体外培养人浆液性卵巢癌细胞A2780,将其分为空白对照组、不同浓度(质量分数分别为0.1%、0.3%、0.6%和1%)DS处理组及1%DS+AKT激动剂组。通过细胞增殖实验、划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验检测A2780细胞的增殖、迁移和侵袭的影响;蛋白质印迹法检测AKT和p-Akt的表达。两独立样本比较采用t检验,双因素数据间比较采用两因素方差分析。结果细胞实验表明,DS对A2780细胞的增殖具有抑制作用,并呈浓度和时间依赖性,差异有统计学意义(F_(处理)=81.66;F_(时间)=321.2;F_(处理×时间)=15.84,均P<0.0001)。划痕实验显示,DS呈剂量依赖性地抑制A2780细胞迁移,0、0.3%和1%DS处理A2780细胞不同时间后,差异有统计学意义(F_(处理)=40.96,P<0.0001;F_(时间)=73.32,P<0.0001;F_(处理×时间)=5.075,P=0.0017)。Transwell实验结果表明,空白对照组、0.3%DS处理组和1%DS处理组迁移细胞数分别为(514.13±19.56)、(251.59±15.95)和(101.67±10.07)个/HP,两处理组分别与空白对照组相比差异均有统计学意义,t值分别为32.47和18.02,均P<0.0001;0.3%DS处理组和1%DS处理组相比差异有统计学意义,t=13.77,P<0.001。空白对照组、0.3%DS处理组和1%DS处理组侵袭细胞数分别为(553.27±18.79)、(231.67±17.75)和(91.54±7.13)个/HP,两处理组分别与空白对照组相比差异有统计学意义,t值分别为21.55和39.79,均P<0.0001;0.3%DS处理组和1%DS处理组相比差异有统计学意义,t=12.69,P<0.001。蛋白质印迹结果显示,0.3%和1%DS处理A2780细胞24 h后,AKT表达量与对照组相比没有改变;p-AKT蛋白相对表达量均低于对照组,差异均有统计学意义,t值分别为8.143和26.19,均P<0.005;0.3%DS处理组与1%DS处理组相比差异有统计学意义,t=11.67,P<0.001。加入AKT激动剂后,DS对卵巢癌细胞的抑制作用消失。结论DS能够抑制A2780细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与人卵巢癌细胞A2780 p-AKT蛋白表达量降低与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

丹参酮ⅡA对大鼠心肌肥厚的影响

目的 研究丹参酮ⅡA对大鼠心肌肥厚的影响及相关机制.方法 将40只2~3月龄的SD大鼠随机分为4组,每组10只.应用腹主动脉缩窄术(TAC)制造压力负荷模型.4组大鼠分别做如下处理:对假手术组只开腹不作特殊处理;对手术处理组行TAC(TAC组);对丹参酮ⅡA干预组行TAC后,给予腹腔注射丹参酮ⅡA8周(20 mg· kg-1·d-1);对阴性对照组行TAC后,给予腹腔注射生理盐水8周(20 mg℉kg-1·d-1).8周后从各组随机选取6只小鼠,对小鼠麻醉后行超声心动图检查评估心脏结构和功能;测量小鼠体重后进行心脏取材,测量心脏重量,计算大鼠心脏重量指数(HWI);制作心肌组织切片,进行苏木精-伊红染色(HE)和Masson染色,检测心肌细胞横切面积(CSA)以及胶原体积分数(CVF);用免疫印迹法检测心肌组织钙调蛋白激酶Ⅱ(CAMKⅡ)和钙调神经磷酸酶(CAN)的蛋白表达水平.结果 对比TAC组,丹参酮ⅡA组大鼠左心室后壁舒张末厚度(LVPWd)和室间隔舒张末厚度(IVSd)均显著下降[LVPWd:(0.2±0.01)cm比(0.22±0.01) cm,P<0.05;IVSd:(0.18±0.02) cm比(0.22±0.02) cm,P<0.05],HWI下降[(43.43±5.1) mg/g比(49.38±3.8) mg/g,P<0.05];组织染色结果显示,丹参酮ⅡA干预组显著降低了TAC引起的CSA和CVF升高[CSA:(555.48±879.81) μm2比(514.74±1 281.16) μm2,P<0,05;CVF:(8.63%±2.26%比12.39%±1.9%,P<0.05)];免疫印迹法结果提示,丹参酮ⅡA组大鼠较TAC组心肌组织内CAMKⅡ和CaN的蛋白表达量显著下降[CAMKⅡ:(1.2±0.1)比(1.83±0.25),P<0.05;CAN:(1.27±0.12)比(1.93±0.49),P<0.05].结论 丹参酮ⅡA能抑制压力负荷引起的心肌肥厚.