猪细小病毒VP2蛋白主要抗原域间接ELISA方法的建立

将已获得的含猪细小病毒VP2蛋白主要抗原域编码基因VP2 I重组酵母菌株在优化的条件下进行诱导表达,表达产物蛋白含量达227.6μg/ml,在此基础上以重组蛋白作为包被抗原初步建立了检测猪细小病毒抗体水平的间接ELISA方法,并对该方法进行了优化,结果表明抗原最佳包被浓度5.69μg/ml,而血清最佳稀释倍数为1∶80。阳性标准初步定为:OD待测样品>0.5,且OD待测样品/OD阴性血清>2.0。采用iVP2 I-ELISA对猪血清样品进行检测,结果显示iVP2 I-ELISA与HI试验的符合率为97.2%,与国外同类试剂盒的符合率达到91.2%。