基于HPLC/TLC法建立桔梗颗粒中甘草酸铵、绿原酸和桔梗皂苷D的快速指认方法

采用HPLC法和TLC法相结合,建立中成药桔梗颗粒中甘草酸铵、绿原酸和桔梗皂苷D等关键有效成分的快速色谱指认方法。方法 采用高效液相色谱法(HPLC),以色谱指纹指认的方法,确认桔梗颗粒中的绿原酸与甘草酸铵,而色谱柱则运用InertSustain C18柱,参数为4.6 I.D. x 250mm、5μm;流动相采用乙腈-0.05%的磷酸溶液,在梯度洗脱工作开展之时,检测波长选定237nm,控制流速为1mL/min;对桔梗颗粒中桔梗皂苷D采用薄层色谱法(TLC)来完成色谱指认,准备10μl的桔梗颗粒阴性、桔梗皂苷和吸取桔梗颗粒供试品溶液,在相同的硅胶G波层板上点滴后,放置在三氯甲烷、甲醇、水的混合下层溶液中,控制三者的比例为13:7:2。之后进行展开、去除、晾干,喷涂10%硫酸乙醇溶液,加热至温度105℃,当发现斑点清晰显色后,分别放置在日光、365nm紫外线灯下检测,明确色谱出现和桔梗皂苷D对照品的斑点颜色。结果 桔梗颗粒供试品溶液同甘草酸铵、绿原酸标准对照品的溶液,在色谱图位置上相同,存在相同的保留时间色谱峰;而TLC结果显示,在波层板上,供试品与对照品在对应位置上存在同色斑点。结论 使用该方法获得的结果准确可靠,且操作相对便捷,可作为桔梗颗粒中关键有效成分甘草酸铵、绿原酸和桔梗皂苷D的快速指认检测方法。