青岛地区幽门螺杆菌对左氧氟沙星耐药性及gyrA基因突变分析

目的分析青岛地区幽门螺杆菌(H.pylori)对左氧氟沙星的耐药现状,探讨H.pylori对左氧氟沙星耐药性与gyrA基因突变之间的关系。方法收集胃癌及胃炎患者的胃窦部黏膜标本,分离培养H.pylori,采用E-test法测定H.pylori对左氧氟沙星的最低抑菌浓度(MIC),提取H.pylori基因组DNA,PCR法扩增gyrA基因片段并对扩增产物测序、分析。结果从患者胃黏膜中成功分离出65例H.pylori菌株,23例对左氧氟沙星耐药(MIC>1μg/ml),占总菌株的35.4%,所有耐药菌株gyrA基因中的喹诺酮类耐药决定区(QRDR)都存在突变位点,且以第87位点的氨基酸发生突变为主,而敏感菌株中未发现基因突变位点。结论青岛地区H.pylori对左氧氟沙星的耐药率高于国内其他地区,表明gyrA基因突变是导致H.pylori对左氧氟沙星耐药的主要原因。

微血管性心绞痛患者亚临床型甲状腺功能减退与心功能的关系研究

目的探讨冠状动脉微血管性心绞痛(coronary microvascular angina,CMVA)患者亚临床型甲状腺功能减退症(subclinical hypothyroidism,SCH)对心脏射血功能的影响.方法应用智业电子病历系统选择2015年5月至2019年5月在我院诊断为CMVA的患者165例为CMVA组,根据是否伴SCH再分亚组为:甲功正常组和CMVA伴SCH组;选择同期健康查体者116例为对照组.应用化学发光免疫法测定甲状腺激素和生化指标,采用彩色超声心动图评价心脏功能.结果CMVA组SCH患病率和TPOAb阳性率显著高于对照组(29.7%比16.4%,26.1%比18.1%;P<0.05).CMVA组TC、TG、HDL-C、LDL-C、CRP、尿酸、ApoB和E/A与对照组比较差异有统计学意义[TC:(5.25±1.26)mmol/L比(4.53±0.65)mmol/L;TG:(1.33±0.67)mmol/L比(1.02±0.31)mmol/L;HDL-C:(1.18±0.28)mmol/L比(1.56±0.33)mmol/L;LDL-C:(3.25±0.83)mmol/L比(3.02±0.18)mmol/L;CRP:(3.21±0.55)mg/L比(2.83±0.33)mg/L;尿酸:(357±72)mmol/L比(268±81)mmol/L;ApoB(1.17±0.30)g/L比(0.86±0.27)g/L;E/A:(0.78±1.54)比(1.15±1.43);P均<0.05].CMVA伴SCH组与甲功正常组比较,E/A比值显著降低(0.61±1.47比1.16±1.62),差异有统计学意义(P<0.05).CMVA患者的TSH水平与LVEF和E/A比值相关,r值分别为0.205和0.305,P均<0.05;FT3水平与E/A比值相关,r=0.260,P<0.05.结论CMVA患者SCH影响了心脏的射血功能,参与了CMVA的发生和发展,其机制可能与脂质代谢有关.

ACE基因多态性与原发性高血压患者血清ACE和血浆AngⅡ水平的相关性

目的研究血管紧张素转化酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性与原发性高血压(EH)患者血清ACE、血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的相关性。方法选择青岛地区EH患者246例和130例正常对照,测定两组血压、血脂、血糖等临床及生化指标,并对高血压进行分级,同时检测血清ACE、血浆AngⅡ水平,采用聚合酶链反应(PCR),检测ACE基因型,比较不同基因型、不同血压分级患者其血清ACE、血浆AngⅡ水平有无差别。结果EH组中,II、ID、DD基因型患者血清ACE水平分别为(36.69±14.05)U/L,(42.98±16.61)U/L,(49.37±17.43)U/L,组间差异有统计学差异(P<0.05);三组基因型患者血浆AngⅡ水平比较,组间差异无统计学差异(P>0.05);随着高血压分级的升高,血清ACE及血浆AngⅡ水平逐渐增加,差异均有统计学意义(P<0.05);EH患者血清ACE水平与ACE基因多态性之间有相关性(r=0.324,P<0.05)。结论 DD基因型EH患者血清ACE水平明显高于ID型和II型患者,血浆AngⅡ水平在不同基因型间无统计学差异。

药物联用所致血小板减少5例分析

血小板减少症可能源于血小板产生不足、脾脏对血小板的阻留、血小板破坏或利用增加以及被稀释,无论何种原因所致的严重血小板减少,都可引起典型的出血,多发性瘀斑最常见于小腿,或在受轻微外伤的部位出现小的散在性瘀斑,黏膜出血（鼻出血、胃肠道和泌尿生殖道和阴道出血）和手术后大量出血。近年来有文献报道药物联用所致血小板减少的不良反应,现摘录如下。

145例胃腺癌P21和P53免疫组化分析

目的 :研究同一胃癌中癌基因和抑癌基因蛋白产物的表达。方法 :应用免疫组织化学SP方法检测 10例正常胃粘膜、10例萎缩性胃炎、10例肠上皮化生的胃壁组织和 145例胃癌组织中P2 1和P53蛋白的表达水平。结果 :10例正常胃粘膜、10例萎缩性胃炎、10例肠上皮化生的胃壁组织中未发现P2 1和P53。 145例胃癌组织中P2 1和P53的阳性检出率分别为 55.2 %和 51.2 %。表达阳性的P53定位于肿瘤细胞核内 ,P2 1定位于细胞膜或细胞浆上。P2 1和P53的阳性表达率与胃癌的分化程度呈正相关。结论 :检测P2 1和P53有助于评估胃癌的预后。

151例健康人群ACE基因多态性分析

目的了解青岛地区健康人群ACE基因多态性,为进一步了解该基因与高血压等疾病的相关性奠定基础。方法2001年来我院健康体检人员151例,提取人类基因组DNA,采用荧光定量PCR技术进行ACE基因I/D多态性检测。结果位于ACE基因第16内含子的I/D多态性经荧光定量PCR扩增后可分成纯合子插入型(II)、纯合子缺失型(DD)和杂合子插入/缺失型(I/D)3种。本实验中II基因型占35.7%,DD基因型占23.2%,ID基因型占41.1%。结论青岛地区健康人群中ACE基因多态性分布没有显著倾向性,了解受检者ACE基因多态性,有利于研究这一基因与高血压等疾病的相关性,可以对受检者提供生活上的指导,避免或减少此类疾病的发生。

转化生长因子-β_1和血管紧张素Ⅱ与高血压性肾损害关系的探讨

目的通过测定高血压患者血转化生长因子(TGF )- β1和血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)水平,进一步探讨TGF-β1和Ang Ⅱ与高血压性肾损害发生、发展的关系。方法将101例原发性高血压病人分为肾损害和无肾损害两组。应用酶联免疫吸附实验(ELISA)和放射免疫法分别测定血清TGF-β1和血浆AngⅡ浓度。结果高血压肾损害组血TGF-β1和AngⅡ水平高于无肾损害组和对照组,差异有显著性,P<0.05;TGF-β1与Ang Ⅱ之间具有相关性,r值为0.536 7,P<0.05。结论血管活性物质TGF-β1和Ang Ⅱ在高血压肾损害的发生过程中起重要的作用。血TGF-β1可作为高血压肾损害的早期诊断指标之一。

ACE基因型及多态性检测在特种部队官兵体能训练中的应用

1资料和方法 1.1一般资料某部特种兵大队官兵（特种兵组）170人,年龄18～36岁,均为男性。对照组120人,年龄23～45岁,均为男性,来自笔者所在疗养院常规健康查体人员。体能测试和评定按照《中国人民解放军军事训练大纲》中对特勤人员体育训练标准进行。测试项目有引体向上、双腿深蹲起立、3 km跑、5 km武装越野、背沙袋跑。

波及颧骨、上颌窦的上颌骨巨大角化囊性瘤1例

波及颧骨的角化囊性瘤目前文献报道较为少见,我科近来收治1例巨大角化囊性瘤,波及上颌骨、颧骨、上颌窦等多部位,现报告如下。1病例报告患者,男,25岁,彝族人,因发现右面部膨隆2个月于2011年5月入青岛市立医院口腔医疗中心治疗。

临床常见多药耐药菌的感染分布及耐药性特点分析

目的分析多药耐药菌的感染分布和耐药性特点,为临床预防控制和治疗多药耐药菌感染提供依据。方法采用VITEK-32细菌鉴定仪将临床分离菌鉴定到种,同时进行药物敏感性试验,检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、C类头孢菌素酶(AmpC)和金属β-内酰胺酶(MBL)及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。结果多药耐药菌共388株,其中多药耐药鲍氏不动杆菌分离率为19.4%,泛耐药鲍氏不动杆菌为13.2%,泛耐药铜绿假单胞菌为23.7%,产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌为38.9%、大肠埃希菌为45.4%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌为59.1%;绝大部分革兰阴性菌耐受>10种常用抗菌药物,肠杆菌科细菌产ESBLs检出率为42.5%,以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主,AmpC酶检出率为16.3%,MBL酶检出率为2.2%。结论革兰阴性菌是多药耐药菌的主要构成菌,对常用抗菌药物几乎全部耐受,MRSA分离率较高不容忽视。

幽门螺杆菌23s rRNA基因突变与克拉霉素耐药性关系的研究

目的:通过对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)23s rRNA基因突变位点分析,观察23s rRNA各突变点与克拉霉素耐药的关系。方法:分离培养HP、提取DNA、扩增其23s rRNA基因片段及测序;运用Clustal W软件进行序列比对找出突变点。选用GenBank中已全基因组测序的35株HP,根据其mutY、ppa、efp和ureI 4个管家基因建立Neighbour-joining树,根据进化树结果将35株HP分为欧非和东亚菌群;观察各突变点与菌群分布的关系。结果:与耐药有关的A2143G突变率为32.8%,T2182C突变率为90.6%但与耐药无关,其碱基分布具有菌群差异:东亚菌群以C碱基为主,欧非菌群以T为主(P<0.05),其他可能与耐药有关的各位点分别为A2223G(6.25%)、T2190C(1.6%)、C2195T(1.6%)。结论:青岛地区HP克拉霉素耐药率为32.8%并表现为23s rRNA基因A2143G突变,而2182位点突变是由于菌群分布差异导致的与克拉霉素耐药无关。

妊娠不同时期铅暴露对大鼠胎盘细胞凋亡的影响

目的观察妊娠不同时期铅暴露对大鼠胎盘细胞凋亡的影响。方法研究共分为4组，每组27只Wistar大鼠，雌性18只，雄性9只。雌雄2：1合笼，以发现雌鼠阴栓次日为妊娠第0天。妊娠期全程铅暴露组大鼠妊娠期全程（妊娠1～20d）饮服0．025％醋酸铅溶液染毒，妊娠早期铅暴露组大鼠妊娠早期（妊娠1～10d）饮服0．025％醋酸铅溶液染毒，妊娠晚期铅暴露组大鼠妊娠晚期（妊娠11～20d）饮服0．025％醋酸铅溶液染毒，对照组大鼠妊娠期全程饮服蒸馏水。原子吸收光谱法测定妊娠末期（妊娠19～21d）血铅水平；Hoechst染色法和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术检测胎盘细胞凋亡并计算凋亡指数。各组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用q检验。结果妊娠末期血铅水平在妊娠期全程铅暴露组[（1．74±0．19）μmol／L]、妊娠早期铅暴露组[（1．27±0．26）μmol／L]、妊娠晚期铅暴露组[（0．60±0．11）μmol／L]和对照组[（0．04±0．01）μmol／L]依次降低，差异均有统计学意义（F=12．10，P〈0．01）。Hoechst染色法显示，铅暴露组胎盘滋养层凋亡细胞核浓染，部分核内可见致密块状荧光颗粒，对照组凋亡细胞呈散在分布。脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术检测显示，铅暴露组大鼠胎盘滋养层凋亡细胞核呈棕黄色，部分核中有棕黄色颗粒。凋亡细胞核较正常增大，呈椭圆形或不规则形，核内染色质聚集于边缘处。2种凋亡检测方法均显示各铅暴露组胎盘细胞凋亡指数均高于对照组，且妊娠期全程铅暴露组高于妊娠早期和妊娠晚期铅暴露组（P均〈0．05）。结论妊娠期铅暴露大鼠血铅水平升高，促进胎盘细胞凋亡的发生。

Smad4在孕期不同阶段铅暴露大鼠胎盘中的表达

目的观察孕期不同阶段铅暴露对大鼠胎盘中信号蛋白Smad4表达的影响。方法将72只健康清洁级Wistar妊娠大鼠随机分为4组,分别为孕早期铅暴露组[孕早期(妊娠1～10 d)饮用0.25g/L乙酸铅溶液染毒,孕晚期(妊娠11～20 d)饮用蒸馏水],孕晚期铅暴露组(孕早期饮用蒸馏水,孕晚期饮用0.25g/L乙酸铅溶液染毒),孕全期铅暴露组[孕期全程(妊娠1～20 d)饮用0.25 g/L乙酸铅溶液染毒],对照(蒸馏水)组,每组18只。测定孕末期腹腔静脉血铅水平;足月剖宫取胎盘并称重,统计不同妊娠结局。并测定大鼠胎盘中Smad4的表达。结果剔除自然分娩与异常妊娠结局大鼠后,最终入组大鼠分别为:孕早期铅暴露组16只,孕晚期铅暴露组15只,孕全期铅暴露组15只,对照组17只。大鼠孕末期血铅水平由低至高依次为对照组<孕晚期铅暴露组<孕早期铅暴露组<孕全期铅暴露组,胎盘重量由高至低依次为对照组>孕早期铅暴露组>孕晚期铅暴露组>孕全期铅暴露组,任意两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。大鼠胎盘重量与孕末期血铅水平呈显著负相关(r=-0.652,P<0.01)。与对照组比较,各实验组大鼠胎盘中Smad4的表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与孕早期铅暴露组比较,孕晚期及孕全期铅暴露组大鼠胎盘中Smad4的表达均下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论铅暴露使得胎盘中Smad4的表达升高,早期铅暴露时Smad4的表达水平明显高于晚期铅暴露组及全程铅暴露组,血铅水平增高导致Smad4表达的异常可能是致胎盘损伤的毒性机制之一。

铅染毒大鼠胎盘组织错配修复基因突变的研究

金属及其化合物过量地进入机体会产生各种毒性效应而造成损害，严重者可以致癌。错配修复（mismatch repair，MMR）基因是生物进化过程中的保守基因，具有修复DNA碱基错配、增强DNA复制准确性、维持基因组稳定性及降低自发突变的功能。胎盘是孕期胎儿由母体获得营养的重要媒介。由于胎盘组织的特殊性，有人将孕期胎盘结构的改变结合毒物的分析作为环境污染对人体毒性的评价指标。为进一步探讨铅的毒性损伤机制，应用PCR—SSCP技术，观察不同孕期染铅大鼠的胎盘hMLH2和hMSH1基因的第12外显子突变情况，研究铅对胎盘组织中错配修复基因突变的影响，以期为铅染毒的发病机制提供分子遗传学的依据。

人胃粘膜乳酸杆菌与幽门螺杆菌感染的相关性

目的:探讨胃内正常菌群乳酸杆菌对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)的影响。方法:51例胃粘膜活检标本均取自于行胃镜检查的胃炎患者,分离培养乳酸杆菌,通过扩增其16S rRNA基因并测序来鉴定乳酸杆菌的种类;胃炎程度及活动度的分类依据悉尼分类系统,运用改良Gimesa染色鉴定HP感染。结果:胃粘膜中共分离出9种乳酸杆菌,分离阳性率为49.0%;乳酸杆菌阳性病人与阴性病人的HP感染率、胃炎程度的差异及胃炎活动度的差异均无统计学意义(P>0.05);HP阳性病人的胃炎程度较HP阴性病人更严重(P<0.05);有益生菌作用的乳酸杆菌与非益生菌类乳酸杆菌的HP感染率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胃内乳酸杆菌的存在对HP感染无影响。