小细胞肺癌耐药细胞的建立及生物学特性和多药耐药性鉴定

目的建立对顺铂与依托泊苷抵抗的小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)耐药细胞NCI-H446/EP,对其生物学特性和多药耐药性进行评价。方法裸鼠皮下接种SCLC NCI-H446细胞构建异种移植瘤体内模型,给予SCLC一线EP方案治疗,诱导体内耐药,剥离瘤组织体外培养获得耐药细胞。体外实验检测其耐药系数,细胞倍增时间,细胞周期分布,多药耐药基因(MDR1)、耐药相关蛋白的表达,体内验证其耐药性。结果NCI-H446成瘤裸鼠给予EP治疗,8周后产生获得性耐药,经分离培养获得耐药细胞株NCI-H446/EP。该细胞株对顺铂、依托泊苷、SN38和阿霉素的耐药系数分别是12.01、18.36、65.4和10.12。与亲本细胞相比,耐药细胞G 0/G 1期比例明显增加,G 2/M期细胞比例减少,倍增时间延长。耐药细胞MDR1在mRNA及蛋白水平均高于亲本细胞,在体内也具有耐药性。结论成功构建了SCLC耐药细胞株NCI-H446/EP,该细胞具有多药耐药的基本特征,可用于抗SCLC药物筛选及耐药机制的研究。

液质联用法在药理学实验教学中的应用

采用液相色谱-串联质谱联用技术(LC-MS/MS)测定血液中磺胺嘧啶,并将该方法应用于药理学实验教学。血液样品经乙腈(含1%甲酸)萃取后,可直接采用液相色谱-质谱联用仪分析检测磺胺嘧啶。该方法线性范围为:150~30000 ng/mL,线性系数r=0.9998。回收率在88.1%~97.3%之间,日内、日间精密度小于10%,最低检出限为31.8 ng/mL,定量限为175.9 ng/mL。该方法检测家兔静脉注射磺胺嘧啶钠后血药浓度,具有操作简便,灵敏度高,数据重现性好等优点,可满足药理学实验教学的需求。

磷酸甘油酸激酶1与肿瘤

磷酸甘油酸激酶1(PGK1)是糖酵解过程中一个重要的催化酶,催化1,3-二磷酸甘油酸转变成3-磷酸甘油酸,产生一分子ATP。研究表明,PGK1在多种肿瘤中高表达,既可以作为蛋白激酶也可以作为代谢酶,通过影响肿瘤的代谢而影响肿瘤的发生发展过程,还与多种肿瘤患者的放化疗抵抗和预后不良有关。本文就其功能及与肿瘤的关系进行综述,旨在为靶向PGK1进行药物开发提供理论基础。