依赖解旋酶等温核酸扩增方法检测副溶血性弧菌

针对副溶血性弧菌的tlh基因的保守序列设计一对特异性扩增引物,在解旋酶和DNA聚合酶的存在下进行HDA等温扩增(65℃)。结果表明:HDA方法成功检测了副溶血性弧菌,检测限可达到1×10^(^(-1)1)mol·L^(-1)。该方法在没有靶标的情况下,可以实现零背景信号扩增,在加入其它菌的情况下,该方法具有较强的特异性和抗干扰能力。HDA方法无需大型精密仪器,仅用普通水浴锅即可完成检测,适合基层实验室推广使用,具有广阔的应用前景。

基于纳米金辅助信号生成顺序堆积的毛细管电泳免疫分析研究

短裸甲藻毒素(BTX)是具有极强毒性的生物毒素,能够通过食物链传递引起人类中毒.由于该毒素没有光学和电化学信号,检测十分困难.本工作利用纳米金作为载体,将辣根过氧化物酶(HRP)和毒素抗体同时固定到纳米金表面,通过HRP催化H_2O_2氧化邻氨基酚(OAP)产生的电化学信号检测样品中的毒素,增大纳米金表面HRP和抗体的物质的量比使电化学信号得到极大增强.免疫反应样品电动进样引入分离毛细管中,在毛细管入口端进行顺序堆积在线富集,使检测灵敏度进一步提高.该方法通过纳米金辅助信号生成和顺序堆积在线富集技术实现了对扇贝样品中BTX-B的快速灵敏检测,线性范围为0.1~120 ng/mL,检出限为26 ng/L,检出限比常规酶联免疫分析(ELISA)法低365倍.