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聚乙烯醇固定化胆固醇氧化酶的研究
被引量:
1
1
作者
李杰民
王双双
+4 位作者
刘倩倩
赵芳
王发合
周河治
杨辉
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期657-661,共5页
【目的】探讨类芽孢杆菌胆固醇氧化酶(COD)的固定化,为COD的应用研究提供参考依据。【方法】以不同浓度的聚乙烯醇、硼酸为主要材料制备固定化酶,并通过试验确定制备固定化酶的最适浓度、最佳反应温度、最适pH、热稳定性、酸稳定性、米...
【目的】探讨类芽孢杆菌胆固醇氧化酶(COD)的固定化,为COD的应用研究提供参考依据。【方法】以不同浓度的聚乙烯醇、硼酸为主要材料制备固定化酶,并通过试验确定制备固定化酶的最适浓度、最佳反应温度、最适pH、热稳定性、酸稳定性、米氏常数及操作稳定性。【结果】选用12%聚乙烯醇、5%硼酸制备的固定化酶形状好、强度适中、易操作、固定化率高,其最适反应温度60℃,最适反应pH7.0,热、酸稳定性比游离酶好,且稳定范围较游离酶宽,表观米氏常数Km(2.55×10-5mol/L)相对游离酶变小,重复使用5次后酶活力仍能保持在67.8%以上,半衰期为8.91次。【结论】聚乙烯醇制备的固定化COD稳定性好,与底物亲和力较强,可重复回收利用,具有良好的应用前景。
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关键词
聚乙烯醇
胆固醇氧化酶
固定化
酶活性
稳定性
米氏常数
下载PDF
职称材料
类芽孢杆菌胞外胆固醇氧化酶的分离纯化
被引量:
1
2
作者
杨辉
吕彦茹
+6 位作者
余磊
赵芳
王发合
李杰民
梁海秋
朱萍
周河治
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期1090-1093,共4页
【目的】探讨类芽孢杆菌产生胞外胆固醇氧化酶(COD)的分离、纯化方法,为其生产和应用提供技术支持。【方法】将类芽孢杆菌发酵液通过旋转蒸发浓缩、蔗糖透析浓缩、DEAE离子交换柱层析和凝胶层析,纯化目的蛋白,然后测定获得酶的基本酶学...
【目的】探讨类芽孢杆菌产生胞外胆固醇氧化酶(COD)的分离、纯化方法,为其生产和应用提供技术支持。【方法】将类芽孢杆菌发酵液通过旋转蒸发浓缩、蔗糖透析浓缩、DEAE离子交换柱层析和凝胶层析,纯化目的蛋白,然后测定获得酶的基本酶学性质。【结果】类芽孢杆菌发酵液经DEAE离子交换柱层析和SephadexG-75凝胶柱层析后,纯化所得的COD比活力达6.83U/mg,酶活力回收为35.6%,纯化倍数为13.4倍。纯化酶经SDS-PAGE显示为均一条带,分子量约58kDa。将纯化的COD作用于不同浓度胆固醇,采用LineweaverBurk作图法,测得其Km=3.3×10-5mol/L。薄层层析结果显示,产物为胆甾-4-烯-3-酮,说明纯化所得酶是COD。【结论】纯化获得电泳纯类的芽孢杆菌胞外COD,其与底物亲和力较强,具有潜在的应用研究价值。
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关键词
类芽孢杆菌
胆固醇氧化酶
分离
纯化
下载PDF
职称材料
题名
聚乙烯醇固定化胆固醇氧化酶的研究
被引量:
1
1
作者
李杰民
王双双
刘倩倩
赵芳
王发合
周河治
杨辉
机构
广西大学生命科学与技术学院
广西农业科学院农产品加工研究所
邯郸职业技术学院
青岛赛特香料有限公司
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期657-661,共5页
基金
广西自然科学基金项目(桂科自0728017)
文摘
【目的】探讨类芽孢杆菌胆固醇氧化酶(COD)的固定化,为COD的应用研究提供参考依据。【方法】以不同浓度的聚乙烯醇、硼酸为主要材料制备固定化酶,并通过试验确定制备固定化酶的最适浓度、最佳反应温度、最适pH、热稳定性、酸稳定性、米氏常数及操作稳定性。【结果】选用12%聚乙烯醇、5%硼酸制备的固定化酶形状好、强度适中、易操作、固定化率高,其最适反应温度60℃,最适反应pH7.0,热、酸稳定性比游离酶好,且稳定范围较游离酶宽,表观米氏常数Km(2.55×10-5mol/L)相对游离酶变小,重复使用5次后酶活力仍能保持在67.8%以上,半衰期为8.91次。【结论】聚乙烯醇制备的固定化COD稳定性好,与底物亲和力较强,可重复回收利用,具有良好的应用前景。
关键词
聚乙烯醇
胆固醇氧化酶
固定化
酶活性
稳定性
米氏常数
Keywords
polyvinyl alcohol
cholesterol oxidase
immobilization
enzymatic activity
stability
Michaelis constant
分类号
Q814.2 [生物学—生物工程]
下载PDF
职称材料
题名
类芽孢杆菌胞外胆固醇氧化酶的分离纯化
被引量:
1
2
作者
杨辉
吕彦茹
余磊
赵芳
王发合
李杰民
梁海秋
朱萍
周河治
机构
广西大学生命科学与技术学院
河北省邯郸职业技术学院
青岛赛特香料有限公司
广西农业科学院
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期1090-1093,共4页
基金
广西自然科学基金项目(桂科自0728017)
文摘
【目的】探讨类芽孢杆菌产生胞外胆固醇氧化酶(COD)的分离、纯化方法,为其生产和应用提供技术支持。【方法】将类芽孢杆菌发酵液通过旋转蒸发浓缩、蔗糖透析浓缩、DEAE离子交换柱层析和凝胶层析,纯化目的蛋白,然后测定获得酶的基本酶学性质。【结果】类芽孢杆菌发酵液经DEAE离子交换柱层析和SephadexG-75凝胶柱层析后,纯化所得的COD比活力达6.83U/mg,酶活力回收为35.6%,纯化倍数为13.4倍。纯化酶经SDS-PAGE显示为均一条带,分子量约58kDa。将纯化的COD作用于不同浓度胆固醇,采用LineweaverBurk作图法,测得其Km=3.3×10-5mol/L。薄层层析结果显示,产物为胆甾-4-烯-3-酮,说明纯化所得酶是COD。【结论】纯化获得电泳纯类的芽孢杆菌胞外COD,其与底物亲和力较强,具有潜在的应用研究价值。
关键词
类芽孢杆菌
胆固醇氧化酶
分离
纯化
Keywords
Paenibacillus
cholesterol oxidase
isolation
purification
分类号
TQ920 [轻工技术与工程—发酵工程]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
聚乙烯醇固定化胆固醇氧化酶的研究
李杰民
王双双
刘倩倩
赵芳
王发合
周河治
杨辉
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
下载PDF
职称材料
2
类芽孢杆菌胞外胆固醇氧化酶的分离纯化
杨辉
吕彦茹
余磊
赵芳
王发合
李杰民
梁海秋
朱萍
周河治
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
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参考文献
引证文献
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