二倍体马铃薯原生质体的游离与培养

以3种不同基因型的二倍体马铃薯为材料,研究了材料来源和不同预处理及游离过程中渗透浓度对原生质体游离质量和后期发育的影响。结果表明,不同基因型二倍体马铃薯细胞酶解时的适宜渗透浓度不同,Dd-Ⅲ-5为0.35～0.40 mol/L,JK3为0.35 mol/L,而Dd-Ⅱ-10的适宜渗透浓度范围较广,在0.30～0.45mol/L内均可;不同预处理所游离的原生质体质量及后期发育存在差异,经预处理后的原生质体活性均高于85%,且分化能力强;同一基因型的叶肉和愈伤组织所游离的原生质体活性差异不大,在产量上叶肉细胞高于愈伤组织;愈伤组织分化时,分化培养基附加的3个激素组合中,NAA 1 mg/L+ZT 0.2 mg/L时愈伤组织全部褐化死亡,而NAA 1 mg/L+2,4-D 1 mg/L+GA30.2 mg/L和NAA 1 mg/L+BA 1 mg/L上的愈伤都分化,后者分化较早;基因型对原生质体后期发育影响较大,经培养后,仅Dd-Ⅲ-5得到完整植株。