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青海极端生境植物根围促生菌分离鉴定及生物活性分析 被引量:1
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作者 吴晓晖 谢永丽 +2 位作者 梁欣 张英 芦光新 《湖北农业科学》 2018年第8期61-65,共5页
通过平板对峙试验以分离筛选自青海托格若格半荒漠沙地、托素湖盐碱地、海北爆轰试验场3个极端生境植被根围的菌株为供试菌株,进行拮抗活性检测;采用16S r DNA及gyr B基因序列分析鉴定菌株;采用CMC法及Gram染色法测定菌株降解纤维素活性... 通过平板对峙试验以分离筛选自青海托格若格半荒漠沙地、托素湖盐碱地、海北爆轰试验场3个极端生境植被根围的菌株为供试菌株,进行拮抗活性检测;采用16S r DNA及gyr B基因序列分析鉴定菌株;采用CMC法及Gram染色法测定菌株降解纤维素活性;对具降解纤维素活性的拮抗菌株进行促生活性测定。结果表明,菌株TGRG3、TGRG7、TSH5分别对油菜菌核菌(Sclerotinia sclerotiorum)、小麦赤霉菌(Fusarium graminearum)、小麦长孢蠕菌(Helminthosporium tritici-vulgaris)具有拮抗活性,抑菌圈平均直径均>20 mm。3株菌株均被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),均具降解纤维素及促植物生长活性。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 分子鉴定 降解纤维素活性 拮抗活性 促生
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冻土荒漠区分离低温适生PGPR菌的鉴定及其抗菌促生特性 被引量:18
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作者 谢永丽 马莉贞 +2 位作者 徐志伟 张英 李希来 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期94-100,共7页
对分离自青海昆仑山口冻土荒漠区植被根围的7株可在4及10℃低温条件下正常生长的低温适生菌进行鉴定分析,并检测其拮抗病原菌活性及催芽促生特性。综合理化测定、BOX-PCR及ERIC-PCR指纹图谱分析、16S rDNA及基因gyrB序列鉴定结果,其中6... 对分离自青海昆仑山口冻土荒漠区植被根围的7株可在4及10℃低温条件下正常生长的低温适生菌进行鉴定分析,并检测其拮抗病原菌活性及催芽促生特性。综合理化测定、BOX-PCR及ERIC-PCR指纹图谱分析、16S rDNA及基因gyrB序列鉴定结果,其中6株菌株为简单芽孢杆菌Bacillus simplex,1株菌株为B.malacitensis。平板对峙试验表明,7株菌株对油菜菌核病原菌Sclerotinia sclerotiorum及水稻白叶枯病原菌Xanthomonas oryzae pv.oryzae具有显著拮抗效果。以菌株KLD2(B.simplex)及KLD5(B.malacitensis)发酵菌液处理玉米种子及拟南芥幼苗,结果表明菌株发酵液可明显促进种子萌发及幼苗生长,其鲜重、根长、须根数等表征均有显著增加。几株低温适生PGPR(plant growth promoting rhizobacteria)芽孢杆菌具备抗菌、催芽及促生特性,具有农业应用潜力。 展开更多
关键词 冻土荒漠区 低温适生PGPR菌 芽孢杆菌 分子鉴定 BACILLUS SPP
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高寒草甸根围拮抗芽孢杆菌筛选鉴定及脂肽化合物分析 被引量:20
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作者 谢永丽 高学文 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期367-374,共8页
本研究通过平板对峙法分别从青海日月山及达日地区高寒草甸根围分离菌株中筛选到8株对油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum及水稻白叶枯病菌Xanthomonas oryzae pv.oryzae均具有明显拮抗效果的芽孢杆菌菌株RYS41、RYS42、RYS43、RYS44... 本研究通过平板对峙法分别从青海日月山及达日地区高寒草甸根围分离菌株中筛选到8株对油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum及水稻白叶枯病菌Xanthomonas oryzae pv.oryzae均具有明显拮抗效果的芽孢杆菌菌株RYS41、RYS42、RYS43、RYS44、DR1、DR2、DR3及DR20。生理生化、脂肪酸甲脂、16S rDNA及gyrB基因测序等分析结果表明,菌株RYS41、RYS42、RYS43、RYS44为解淀粉芽孢杆菌Bacillusamyloliquefaciens;菌株DR1、DR2、DR3、DR20鉴定为短小芽孢杆菌B.pumilus。MALDI-TOF-MS质谱分析结果表明,菌株RYS41产生脂肽类化合物Surfactin、Bacillomycins D和Fengycin,菌株DR20产生脂肽类化合物Surfactin、IturinA和Fengycin,推断可能与对油菜菌核菌及水稻白叶枯病菌的拮抗作用有关。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 脂肪酸甲脂鉴定 16S rDNA鉴定 gyrB基因鉴定 脂肽类化合物分析
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3株分离自高寒草甸根际芽孢杆菌的分子鉴定及其生物活性 被引量:6
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作者 吴晓晖 谢永丽 +4 位作者 Renato D′Ovidio 张英 芦光新 辛总秀 Stefania Masci 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2454-2463,共10页
为青海省退化草地植被恢复、提高地上生物量筛选优良的生防芽孢杆菌菌源,采用16SrDNA及gyrB基因序列分析法,鉴定分离自青海省黄南州高寒草甸高山嵩草(Kobresia pygmaea)根围的3株芽孢杆菌菌株;平板对峙试验检测菌株拮抗病原真菌活性;菌... 为青海省退化草地植被恢复、提高地上生物量筛选优良的生防芽孢杆菌菌源,采用16SrDNA及gyrB基因序列分析法,鉴定分离自青海省黄南州高寒草甸高山嵩草(Kobresia pygmaea)根围的3株芽孢杆菌菌株;平板对峙试验检测菌株拮抗病原真菌活性;菌悬液(细胞浓度为106 cfu·mL-1)浸种以检测菌株对植物催芽及促生效果;CMC、Gram染色法及DNS法检测菌株降解纤维素活性,并扩增菌株降解纤维素酶编码基因。结果表明,菌株HNC3被鉴定为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus),菌株HNC8、HNC11被鉴定为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis);3株菌株对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、瓜类枯萎病菌(Fusarium oxysporum)具有明显的拮抗活性(抑菌圈平均直径均≥11mm);3株菌株对小麦(Triticum aestivum)种子具有明显的催芽及促生效果;小麦种子经菌株HNC3菌悬液处理后,芽长、根长增加率分别达55%、80%;菌株HNC3降解纤维素酶活高达367.51U·mL-1,并在该菌株中扩增到地衣聚糖酶(Lichenase,blg1S)、甘露糖苷酶(mannosidase,ManSig)、木聚糖酶(xylanase,xynD、xynB)4个纤维素酶编码基因。分离自青藏高原高寒草甸根围的3株芽孢杆菌兼具拮抗、催芽、促生及降解纤维素活性,在高原草地植被恢复、生态农牧业中具有一定的研究及应用潜力。 展开更多
关键词 高寒草甸 生防芽孢杆菌 分子鉴定 催芽促生
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耐盐、低温适生芽孢杆菌TS1、TS3的拮抗及降解纤维素活性分析 被引量:5
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作者 吴晓晖 谢永丽 +2 位作者 陈兰 柴树芳 赵继丽 《江苏农业科学》 2018年第19期277-281,共5页
为获得在高原生态农牧业中具有研究应用潜力的根围促生菌,从极端环境生境筛选出具有耐盐、耐低温适生性的菌株,并对其进行生理生化及分子鉴定。通过gyr B及16S r DNA基因序列分析,将菌株TS1鉴定为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus),菌... 为获得在高原生态农牧业中具有研究应用潜力的根围促生菌,从极端环境生境筛选出具有耐盐、耐低温适生性的菌株,并对其进行生理生化及分子鉴定。通过gyr B及16S r DNA基因序列分析,将菌株TS1鉴定为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus),菌株TS3鉴定为解淀粉芽孢杆菌(B. amyloliquefaciens);平板对峙试验发现,菌株TS1、TS3均具有拮抗植物病原真菌及细菌的活性(抑菌圈直径≥8 mm);经Landy培养基发酵提取的菌株脂肽类化合物可在血平板上形成直径≥11 cm的透明圈;通过基质辅助激光解吸附-离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析所产生的脂肽类化合物,菌株TS1可产生表面活性素(Surfactin)、泛革素(Fengycin),菌株TS3可产生表面活性素、伊枯草菌素(Iturin A),推测菌株的拮抗活性与脂肽类化合物合成有关;羧甲基纤维素钠(CMC-Na)法检测发现,菌株具有降解纤维素活性; 3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定菌株解纤维素酶活性分别为116. 76、150. 12 U/m L;菌株TS1可在含Na Cl浓度为13%的LB培养基平板上及4、10℃低温条件下正常生长,表现出良好的耐低温及耐盐性。2株耐盐、耐低温适生芽孢杆菌兼具多种功能特性,在高原生态农牧业中具有一定的研究应用潜力,有望进一步研究并开发成为微生物肥料生产菌种。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 分子鉴定 拮抗活性 耐盐及低温适生 解纤维素活性
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青海柴达木极端干旱沙地分离芽孢杆菌的分子鉴定及拮抗活性分析 被引量:11
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作者 谢永丽 马莉贞 +2 位作者 徐志伟 杜卓 高学文 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1079-1086,共8页
【目的】研究高原极地环境微生物资源。【方法】采用rep-PCR指纹图谱分析、gyrB基因及16S rDNA基因序列分析等多项分子鉴定技术对分离自青海柴达木极端干旱沙地的8株芽孢杆菌菌株进行分类鉴定;通过平板对峙及接种离体叶片试验检测分离... 【目的】研究高原极地环境微生物资源。【方法】采用rep-PCR指纹图谱分析、gyrB基因及16S rDNA基因序列分析等多项分子鉴定技术对分离自青海柴达木极端干旱沙地的8株芽孢杆菌菌株进行分类鉴定;通过平板对峙及接种离体叶片试验检测分离菌株的拮抗活性及对病原菌侵染的防效;采用MALDI-TOF-MS质谱分析生防菌株的活性成分。【结果】8株分离菌株鉴定为Bacillus amyloliquefaciens(6株)、Bacillus axarquiensis(1株)和Bacillus atrophaeus(1株);各菌株对油菜菌核病原真菌(Sclerotinia sclerotiorum)均具有显著的拮抗活性;接种离体叶片试验表明菌株对油菜菌核病菌的侵染具有较好防效;MALDI-TOF-MS质谱分析结果显示菌株DGL1(B.amyloliquefaciens)产生脂肽化合物Fengycin,菌株DGL6(B.axarquiensis)产生脂肽化合物Surfactin、BacillomycinsD和Fengycin,菌株DCD1(B.atrophaeus)产生脂肽化合物Surfactin、Fengycin。【结论】为高原干旱沙地极端环境微生物资源研究及生防菌资源开发和应用提供了研究材料。 展开更多
关键词 青海柴达木 极端干旱沙地 芽孢杆菌 分子鉴定 拮抗活性分析
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青海北山林场桦树根围芽胞杆菌分子鉴定及其拮抗活性分析 被引量:15
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作者 谢永丽 徐志伟 +1 位作者 马莉贞 高学文 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期246-252,共7页
自青海北山林场桦树根围分离筛选到芽胞杆菌菌株166株,根据菌落特征分为6个类群,选择其中31株菌株纯化保存并进行BOX-PCR及ERIC-PCR指纹图谱分析、16S rDNA及gyrB基因序列分析,鉴定出球形赖氨酸芽胞杆菌Lysinibacillus sphaericus 12株... 自青海北山林场桦树根围分离筛选到芽胞杆菌菌株166株,根据菌落特征分为6个类群,选择其中31株菌株纯化保存并进行BOX-PCR及ERIC-PCR指纹图谱分析、16S rDNA及gyrB基因序列分析,鉴定出球形赖氨酸芽胞杆菌Lysinibacillus sphaericus 12株、解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliq-uefaciens 5株、韦氏芽胞杆菌Bacillus weihenstephanensis 7株、芽胞杆菌Bacillus sp.5株、苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis 2株。通过平板对峙试验筛选得到11株对油菜菌核病原真菌Sclerotiniasclerotiorum具有显著拮抗活性的菌株。以MALDI-TOF-MS质谱分析拮抗菌株QB11的活性成分,可产生脂肽化合物表面活性素和泛革素,表明其拮抗活性与脂肽化合物的合成和分泌有关。 展开更多
关键词 芽胞杆菌 分子鉴定 拮抗活性分析
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几株解纤维素生防芽孢杆菌的分子鉴定及其抗逆促生特性分析 被引量:19
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作者 谢永丽 Renato D’Ovidio +2 位作者 Stefania Masci 范晶 李云龙 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期348-357,共10页
【目的】探究青藏高原解纤维素生防芽孢杆菌资源。【方法】采用BOX-PCR指纹图谱分析、gyr B基因及16S r RNA基因序列分析,对分离自青海互助北山桦树根围的5株芽孢杆菌进行分子鉴定;通过CMC法检测菌株降解纤维素活性;平板对峙法检测菌株... 【目的】探究青藏高原解纤维素生防芽孢杆菌资源。【方法】采用BOX-PCR指纹图谱分析、gyr B基因及16S r RNA基因序列分析,对分离自青海互助北山桦树根围的5株芽孢杆菌进行分子鉴定;通过CMC法检测菌株降解纤维素活性;平板对峙法检测菌株拮抗病原真菌及病原细菌活性;检测菌株的耐盐性、低温适生性;测定菌株促种子萌发及幼苗生长特性。【结果】5株菌均鉴定为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens;具有显著降解纤维素的特性,在CMC平板上形成纤维素降解透明圈直径≥20 mm;对油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、瓜类枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)及植物梨火疫病菌(Erwinia amylovora)均有显著拮抗活性;菌株可在含Na Cl浓度为11%的LB平板上正常生长,在10°C低温条件下生长良好;菌株BS11、BS12菌悬液(细胞浓度106 CFU/m L)可促进水稻种子萌发及幼苗生长。【结论】5株B.amyloliquefaciens菌株为抗逆性强的、具有降解纤维素活性的生防芽孢杆菌,在青藏高原生态农业及畜牧产业中具有应用潜力。 展开更多
关键词 解纤维素活性 芽孢杆菌 拮抗活性 分子鉴定 促生及抗逆性
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可可西里低温适生拮抗芽孢杆菌的筛选鉴定及脂肽化合物分析 被引量:16
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作者 谢永丽 高学文 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期149-155,共7页
极端环境特殊微生物资源研究和开发具有广阔的应用前景和研究意义.对分离筛选自青海可可西里境内植被根围的8株在4和10℃条件下生长良好的低温适生芽孢杆菌进行鉴定分析.结果表明:通过生理生化特征分析、rep-PCR指纹图谱分析、16SrDNA及... 极端环境特殊微生物资源研究和开发具有广阔的应用前景和研究意义.对分离筛选自青海可可西里境内植被根围的8株在4和10℃条件下生长良好的低温适生芽孢杆菌进行鉴定分析.结果表明:通过生理生化特征分析、rep-PCR指纹图谱分析、16SrDNA及gyrB基因序列分析鉴定,8株供试菌株分别为莫哈韦芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)3株,解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)1株和简单芽孢杆菌(B.simplex)4株.采用平板对峙试验从中筛选到4株对油菜菌核病原真菌(Sclerotinia sclerotiorum)及水稻白叶枯病原细菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae)均具有显著拮抗活性的生防菌株;采用MALDI-TOF-MS质谱分析生防菌株的拮抗活性物质,结果显示菌株KKD1(B.mojavensis)产生脂肽类化合物泛革素和表面活性素,菌株KKD2(B.amyloliquefaciens)产生脂肽类化合物伊枯草菌素A、泛革素和表面活性素,推断生防菌株的拮抗活性可能与脂肽化合物的合成及分泌有关.该研究为低温适生性芽孢杆菌生物肥料和生物农药的研发提供了菌株资源. 展开更多
关键词 低温适生芽孢杆菌 rep-PCR指纹图谱分析 16S RDNA序列分析 gyrB序列分析脂肽化合物
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