参松养心胶囊联合慢心律治疗频发室性早搏临床观察

目的:观察参松养心胶囊联合慢心律治疗频发室性早搏的临床疗效,并初步探讨其作用机制。方法:将60例频发室性早搏患者随机分为治疗组和对照组,对照组口服慢心律,治疗组在服用慢心律的基础上,服参松养心胶囊,用药4周后观察心电图及24h动态心电图、肝功能、血肌酐、血尿常规、血脂、血糖等指标的变化。结果:治疗组显效率43.3%,总有效率93.3%,无加重病例;对照组显效率30.0%,总有效率66.7%,治疗组优于对照组,差异有显著性(P<0.05);治疗后24h室性早搏总数明显减少,优于对照组(P<0.05);两组未见明显不良反应。结论:参松养心胶囊联合慢心律治疗频发室性早搏疗效优于单独使用慢心律。

局灶性脑缺血预处理上调大鼠梗死区周围巢蛋白的表达

目的观察局灶性脑缺血预处理(IP)对巢蛋白(NESTIN)表达的影响,探讨NESTIN与脑缺血耐受(BIT)的关系及可能的内源性神经保护机制。方法 45只SD雄性大鼠随机分为脑缺血预处理(CIP)组、大脑中动脉阻塞(MCAO)组、假手术(sham)组。采用TTC染色测定脑梗死体积,光镜下观察脑组织病理改变,免疫组织化学染色和图像分析评价各组NESTIN的表达。结果再灌注24及72 h,CIP组脑梗死体积比分别为12.4%±3.2%、9.8%±1.9%,较MCAO组的18.5%±3.7%、15.8%±3.5%明显减小(P<0.05),免疫组化NESTIN阳性细胞数及Western blot测定缺血侧脑组织的NESTIN蛋白表达水平,均高于同时间段的MCAO组(P<0.05)。结论 CIP可有效减小局灶性脑缺血再灌注后的脑梗死体积,并促进梗死区周围脑组织表达敏感的胚性蛋白NESTIN,后者可能与BIT的脑保护机制有关。

高原干部体检者高尿酸血症及相关因素的初步分析

目的 探讨高原干部体验者高尿酸血症的患病情况及与性别、年龄、相关因素的关系。方法 对青海地区干部712人进行健康体检，根据高尿酸血症诊断标准，分为高尿酸血症组及正常尿酸组，对两组性别、年龄、患病率及危险因素和相关疾病进行统计分析。结果 高尿酸血症患病率为29．07％，其中男性36．47％，女性7．22％，两者比较有显著性差异（P〈0．001），高尿酸血症患病率随年龄增长而上升，41～70岁为高发年龄段。结论 高尿酸血症存在性别和年龄差别。是发生代谢综合征的重要危险因素，应当引起高度重视。

藏药丹葛颈舒胶囊中丹参酮ⅡA的RP-HPLC测定法建立

目的建立藏药丹葛颈舒胶囊中丹参酮ⅡA的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)摸索实验条件,建立藏药丹葛颈舒胶囊中丹参酮ⅡA的RP-HPLC测定法。结果该方法的线性范围为2.0～64.0 mg.L-1,r为0.9998,平均回收率为102.14%,RSD为1.22%。结论本法简便、准确、重现性好,可用于藏药丹葛颈舒胶囊的质量控制。

心肌缺血再灌注损伤后家兔血浆ET、CGRP含量变化的研究

目的:研究血浆内皮素(ET)与降钙素基因相关肽(CGRP)在心肌缺血再灌注损伤后含量变化及意义。方法:制作家兔心肌缺血再灌注模型,40只家兔随机分为非缺血对照组(A组)、缺血再灌注损伤组(B组),观察两组家兔血浆ET、CGRP含量变化。结果:与对照组比较心肌缺血再灌注损伤后血浆ET含量明显增高(P<0.05)。而血浆CGRP含量降低(P<0.05)。结论:在心肌缺血再灌注损伤后ET、CGRP含量变化可能在心肌缺血再灌注损伤病理生理过程中起重要作用。

叉头框转录因子O亚族1对高糖环境下胰岛β细胞生长及细胞周期分布影响

目的研究叉头框转录因子O亚族1(FOXO1)对高糖诱导的胰岛β细胞生长和周期分布的影响。方法 INS-1细胞分成对照组、高糖组、阴性+高糖组、干扰+高糖组共4组,处理方法如下:对照组:INS-1细胞不做任何处理。高糖组:用含有25 mmol/L的葡萄糖的细胞培养液培养1 d。阴性+高糖组:用含有25 mmol/L的葡萄糖的细胞培养液培养1 d,细胞为稳定感染shRNA control慢病毒的INS-1细胞。干扰+高糖组:用含有25 mmol/L的葡萄糖的细胞培养液培养1 d,细胞为稳定感染FOXO1 shRNA慢病毒的INS-1细胞。用Western blot和qRT-PCR检测细胞中FOXO1的表达情况,CCK-8测定细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,Western blot方法测定细胞中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p27蛋白水平。结果高糖组胰岛β细胞中FOXO1表达水平高于对照组,干扰+高糖组胰岛β细胞中FOXO1的表达水平低于高糖组,阴性+高糖组细胞中FOXO1的表达水平与高糖组比较没有变化。高糖组胰岛β细胞增殖能力降低,细胞G0/G1期比率升高,细胞中cyclin D1蛋白水平降低,p27蛋白水平升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰+高糖组胰岛β细胞增殖能力升高,细胞G0/G1期比率降低,细胞中cyclin D1蛋白水平升高,p27蛋白水平降低,与高糖组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高糖诱导胰岛β细胞中FOXO1表达,敲低其表达能够逆转高糖对胰岛β细胞的增殖抑制和细胞周期阻滞作用。

不同海拔地区藏、汉族高血压患者血CGRP、ADM含量

目的探讨不同海拔藏、汉族高血压患者血降钙素基因相关肽(CGRP)、肾上腺髓质素(ADM)含量的变化。方法对不同海拔藏、汉族高血压患者及对照组进行分组并留取血浆,采用放免法检测血浆CGRP、ADM。结果 1、不同海拔高血压患者CGRP明显低于正常对照组(均P<0.05),不同海拔高血压患者ADM明显高于正常对照组(均P<0.05),随着海拔的增高高血压患者及正常对照组CGRP明显降低(P<0.05)、ADM明显升高(P<0.05);2、不同海拔藏族高血压患者CGRP含量高于相应海拔汉族高血压患者(均P<0.05)。结论 1、环境因素影响高原居住人群CGRP、ADM含量分泌,其可能是高原不适致血压升高的机制之一;2、藏族CGRP较汉族高,提示作为较好的高原适应人群,CGRP合成的增加可能是其适应机制之一。

高海拔地区慢性心力衰竭患者血尿酸水平变化的临床意义

目的:研究高海拔地区慢性心力衰竭患者血清尿酸水平变化的临床意义。方法:比较97例不同病因、不同心功能状态下的高海拔地区慢性心力衰竭患者血尿酸水平变化。结果:慢性心力衰竭患者血清尿酸水平随心功能的恶化而增高,心功能级组血尿酸为324.11±46.04μmol/L,级组为407.27±67.89μmol/L,级组为484.67±102.97μmol/L,3组血清尿酸水平差异显著(P<0.01)。高原性心脏病慢性心力衰竭患者较其它病因者血尿酸水平明显增高(P<0.05)。结论:检测血尿酸水平,可做为判断慢性心力衰竭患者病情及预后的一个有意义的生化指标。

阿托伐他汀钙对不同海拔地区高脂血症并高粘血症患者血脂及血液流变学的干预研究

目的探讨阿托伐他汀钙对不同海拔地区高脂血症并高粘血症患者血脂及血液流变学指标的影响。方法应用阿托伐他汀钙20 mg分别干预2周、4周后再测血脂及血液流变学指标,并对干预前后各组间血脂、血液流变学结果进行比较。结果①居住在海拔2260 m的高脂血症并高粘血症患者应用阿托伐他汀钙治疗2周、4周后与治疗前比较:总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、全血粘度(低切、高切)、全血还原粘度(低切、高切)明显降低,差异有显著性(P<0.05);治疗4周与治疗2周比较:总胆固醇、低密度脂蛋白、全血粘度(低切、高切)、全血还原粘度(低切、高切)均下降,差异有显著性(P<0.05)。②居住在玉树州结古镇(海拔3681m)、果洛州大武镇(海拔3719m)高脂血症并高粘血症患者应用阿托伐他汀钙治疗2、4周后较治疗前比较:总胆固醇、低密度脂蛋白有显著下降,治疗4周后与2周比较总胆固醇下降显著;血液流变学指标均有下降趋势但无显著差异(P>0.05)。结论①阿托伐他汀钙可纠正海拔2260 m高脂血症并高粘血症患者血脂紊乱及改善血液流变性,并与用药时间呈正相关;②阿托伐他汀钙能够纠正海拔3000 m以上高脂血症并高粘血症患者的血脂紊乱,而对高粘血症改善不明显。考虑高原低氧可能是该类患者血液粘稠度增高的主要因素之一,因此对海拔3000 m以上的高脂血症并高粘血症患者单纯的调节血脂治疗不能改善血液粘度。

IFN-γ、IL-4与IL-6在胃癌患者血清中的动态表达及意义

目的观测胃癌患者血清中IFN-γ、IL-4和IL-6水平的变化,探讨其临床意义。方法采用ELISA法测定28例胃癌病人和36例正常人血清中三种细胞因子含量。结果胃癌病人血清中IFN-γ水平较正常人明显降低(P(0.01),IL-4和IL-6水平较正常人明显增高(P(0.01),其变化值与临床分期有关(P(0.01)。结论胃癌病人机体免疫功能紊乱,血清中IFN-γ、IL-4和IL-6水平的变化与疾病的发生、发展有关。

高碘调控PTEN诱导甲状腺细胞凋亡的实验研究

目的探讨高碘调控第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)对甲状腺细胞凋亡的影响及其机制。方法以不同浓度(0、10 mmol/L、20 mmol/L、40 mmol/L)碘化钾染毒人正常甲状腺Nthy-ori3-1细胞24 h后,采用RT-PCR和Western blot检测PTEN mRNA和蛋白的表达。将Nthy-ori3-1细胞随机分为空白组(不做处理)、髙碘组(以40 mmol/L碘化钾染毒48 h)、髙碘+空载体组(转染pc DNA3.0质粒后,以40 mmol/L碘化钾染毒48h)和髙碘+PTEN组(转染pc DNA3.0-PTEN质粒后,以40 mmol/L碘化钾染毒48 h)。流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,RT-PCR检测细胞中PTEN mRNA表达,Western blot检测PTEN、Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果 10 mmol/L、20 mmol/L和40 mmol/L碘化钾染毒后Nthy-ori3-l细胞中PTEN mRNA和蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05),且20 mmol/L剂量组和40 mmol/L剂量组明显高于10 mmol/L剂量组(P<0.05),而20 mmol/L剂量组和40 mmol/L剂量组差异无显著性(P>0.05)。与空白组相比,髙碘组、髙碘+空载体组和髙碘+PTEN组的凋亡率、PTEN mRNA表达和PETN、Bax蛋白表达均显著升高,而Bcl-2蛋白表达均明显降低(P<0.05);与髙碘组相比,髙碘+PTEN组凋亡率、PTEN mRNA表达和PETN、Bax蛋白表达显著升高,而Bcl-2蛋白显著降低(P<0.05),而髙碘+空载体组与髙碘组各指标相比,差异无显著性(P>0.05)。结论高碘可通过上调PTEN表达诱导甲状腺细胞凋亡。

塔斯品碱在Caco-2细胞模型中的吸收机制研究

目的研究塔斯品碱在Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法用Caco-2细胞单层模型研究塔斯品碱的双向转运,考察时间、药物质量浓度对塔斯品碱吸收的影响。采用高效液相色谱法检测塔斯品碱的质量浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果塔斯品碱在Caco-2细胞模型中,从单层细胞层顶端到基底端的转运与基底端到顶端的转运大致相同。结论塔斯品碱在Caco-2细胞模型中的吸收主要是被动转运。

攻下清热活血方对重症急性胰腺炎大鼠血清相关炎性因子及肠黏膜屏障功能的影响研究

目的:探讨攻下清热活血方对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血清相关炎性因子及肠黏膜屏障功能的影响。方法:将90只SD大鼠随机分为正常对照组与造模组,雌雄各占50%,其中正常对照组大鼠10只,造模组大鼠80只。采用牛磺胆酸钠于胰胆管逆行注射构建SAP大鼠模型,模型组大鼠40只,奥曲肽治疗组大鼠20只,攻下清热活血中药治疗组大鼠20只。待造模过程完成之后开始给药,奥曲肽组于皮下注射16.0μg/kg的奥曲肽;中药组以8.33 g/kg的量灌胃。正常对照组与模型组均给予等剂量的生理盐水进行灌胃,上述操作每次间隔为8 h,共3次。比较各组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平、MUC2免疫组化评分。结果:奥曲肽组大鼠24 h存活率为40.00%(8/20),中药组大鼠24 h存活率为45.00%(9/20),模型组存活率为25.00%(10/40)。两治疗组大鼠存活率均分别显著高于模型组,奥曲肽组与中药组差异无统计学意义;模型组、奥曲肽组大鼠血清TNF-α及IL-1β水平均分别显著高于正常对照组(P<0.05),奥曲肽组大鼠血清TNF-α及IL-1β水平均分别显著小于模型组(P<0.05),中药组大鼠血清TNF-α及IL-1β水平均分别显著低于模型组、奥曲肽组(P<0.05),但中药组与正常对照组大鼠血清大鼠血清TNF-α及IL-1β水平差异无统计学意义(P>0.05);采用免疫组化法对各组大鼠MUC2表达情况进行观察,结果表明:正常对照组MUC2阳性细胞表达率较高,模型组与正常对照组相比,MUC2阳性细胞表达率较低,染色程度相对较低,免疫组化评分显著低于正常对照组(P<0.05);奥曲肽组MUC2阳性细胞表达率显著高于模型组,中药组MUC2阳性细胞表达率显著高于奥曲肽组(P<0.05)。结论:攻下清热活血中药可对SAP大鼠具有理想的治疗作用,可通过降低血清TNF-α及IL-1β水平来实现,此外其还能对SAP大鼠肠黏膜具有保护效果,加快肠黏膜屏障功能地恢复。

青南高原多房棘球蚴SBACT5基因的克隆和生物信息学分析

目的胆汁酸钠协同转运蛋白在棘球绦虫发育过程中起着重要作用。文中研究克隆多房棘球蚴(Em)的胆汁酸钠协同转运蛋白5(Em SBACT5)基因,并对其编码蛋白进行生物信息学分析。方法采用RT-PCR技术扩增Em SBACT5基因并测序,采用生物信息学软件对编码蛋白的理化性质、亲/疏水性、跨膜域、翻译后修饰位点、结构域、二级结构、三级结构、亚细胞定位和生物学功能进行预测分析。结果扩增出654 bp的完整开放阅读框,其编码217个氨基酸,与公布的细粒棘球蚴(Eg)的Eg SBACT5基因核苷酸和氨基酸同源性分别达98%和96%。蛋白分析结果显示,Em SBACT5蛋白分子式为C1141H1797N273O284S11,相对分子量为24 240,p I为8.99。含有9个翻译后修饰位点和4处典型的结构域。α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲所占的比例分别为29.95%、31.80%、7.83%和30.41%。该蛋白为疏水性跨膜蛋白,主要定位于细胞质膜中,可能在物质转运和信号传递过程中发挥作用。结论成功克隆出Em SBACT5基因并获得其编码蛋白的的信息学特征,为包虫病防治提供基础信息。

低氧下K562细胞红系分化模型的构建

目的通过筛选更优条件,构建不同低氧(1%和3%O_2)下K562细胞红系分化模型,为后期miRNA的检测奠定基础。方法将K562细胞分别置于常氧、低氧(1%和3%O_2)条件下经不同浓度(30和40μM)氯化血红素(hemin)诱导0、48、72、96 h,以不同培养时间下的细胞浓度增长速率判断指数生长期;用联苯胺染色法选择合适的hemin浓度;结合联苯胺染色阳性细胞率、γ-globin的mRNA水平的变化以及CD235a的表达水平的变化判断细胞分化效率; MTS细胞增殖实验检测细胞增殖的情况与流式细胞周期检测结果分析细胞增殖水平的变化;用流式检测细胞凋亡率判断氧浓度对凋亡的影响。结果 (1)不同培养时间的计数结果显示48～72 h间细胞增殖速率最快。(2)联苯胺染色结果提示以40μM的hemin诱导细胞获得的阳性率更高。(3)联苯胺染色结果显示,1%O_2条件下72、96 h即刻细胞的阳性率明显高于常氧(P<0.05);而3%O_2条件下常氧低氧各时间点间无明显差异;γ-globin的检测结果显示,1%O2条件下96 h的表达水平是常氧的2.5倍(P<0.05),而同样时间、3%条件下仅为常氧的1.4倍(P<0.05);流式检测CD235a结果显示,1%O_2条件下,CD235a阳性细胞率表现为48～72 h下降,72～96 h上升的变化趋势,且96 h常氧低氧差异明显(P<0.05); 3%O_2条件下则表现为随时间延长逐步下降的趋势,96 h常氧低氧差异有统计学意义(P<0.05)。(4)结合MTS及细胞周期检测结果发现,不同氧浓度下细胞的增殖水平与常氧组无明显差异(P>0.05)。(5)流式检测细胞凋亡情况显示,1%O_2条件下72、96 h即刻凋亡率略高于常氧,但差异无统计学意义(P>0.05); 3%O_2条件下常氧低氧各时间点凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验确立的实验参数,构建了符合试验要求的较为理想的K562红系分化模型(低氧下),为后期miRNA的检测奠定了基础。

青海省不同地区地下水中总α和总β放射性水平

水的放射性主要来自岩石、土壤及空气中的放射性物质。岩石、土壤中的天然放射性核素可形成各种水溶物，被流水带到各种水源中，不溶性的放射性物质也会随泥沙等固体微粒进入水体中。为了解青海省地下水中放射性物质污染水平，