lncRNA CASC9靶向miR-513a-5p调控高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的机制研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)CASC9对高糖(HG)诱导的人肾小管上皮细胞损伤的影响和可能机制。方法:体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,用25 mmol/L葡萄糖干预24 h,RT-qPCR法检测细胞中CASC9和miR-513a-5p表达。分别转染CASC9过表达载体、miR-513a-5p抑制剂或共转染过表达载体与miR-513a-5p模拟物至HK-2细胞,然后用25 mmol/L葡萄糖干预24 h,ELISA检测细胞培养上清中IL-6和TNF-α表达,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中cleavedcaspase3和cleaved-caspase9蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证CASC9和miR-513a-5p的调控关系。结果:HK-2细胞经高糖处理后,细胞中CASC9的表达量减少(P<0.05),而miR-513a-5p的表达量增加(P<0.05)。上调CASC9或下调miR-513a-5p的HK-2细胞经高糖处理后,细胞培养上清中IL-6和TNF-α表达量减少(P<0.05),细胞凋亡率和细胞中cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达量降低(P<0.05)。CASC9可靶向结合miR-513a-5p,且上调CASC9抑制HK-2细胞中miR-513a-5p表达。上调miR-513a-5p逆转上调CASC9对高糖诱导的HK-2细胞培养上清中IL-6和TNF-α表达量及细胞凋亡率、cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达的影响。结论:上调CASC9可能通过靶向下调miR-513a-5p阻碍高糖诱导的人肾小管上皮细胞HK-2分泌炎症因子及细胞凋亡。

血液灌流联合血液透析治疗尿毒症皮肤瘙痒疗效观察

顽固持续的皮肤瘙痒是尿毒症患者最常见并发症之一,往往会导致患者的生活、生存质量下降。本文就我科所采用的血液灌流联合血液透析治疗尿皮肤瘙痒患者的30个案例,取得的较好疗效,展开讨论和报道。

高原低氧环境下大鼠肾脏水通道蛋白2的表达及意义

目的研究高原低氧环境下大鼠肾脏内髓水通道蛋白2（AQP2）mRNA及蛋白的表达。方法将40只雄性SD大鼠随机分为24h、48h、72h及1周组，同时设立对照组（西宁地区）。将4个实验组由西宁地区（2260m）带至青海大学可可西里高原医学研究基地（4600m），在不同时间点处死取材。用放射免疫法检测血浆抗利尿激素（AHD）浓度，Western印迹、实时定量PCR、免疫荧光等方法检测AQP2蛋白及mRNA的表达。结果暴露于高原低氧环境后，大鼠AHD水平首先呈下降趋势，24h为（142．46±10．57）；48h时达到最低水平，仅为对照组的28．5％[（86．94±6．49）μg／L比（302．53±10．48）μg／L]；后逐渐上升，72h组为（169．65±11．15）μg／L，与对照组差异均有统计学意义（均P〈0．01）；1周时为（306．46±11．14）μg／L达到对照组水平。AQP2 mRNA的表达与AHD水平的变化相一致，初入高原后呈下降趋势，48h时达到最低水平，后逐渐上升，24h、48h、72h组与对照组差异均有统计学意义（分别为0．04±0．005，0．03±0．002，0．04±0．003比0．09±0．008，均P〈0．01），1周时为（0．09±0．01），达到对照组水平。AQP2蛋白表达与mRNA的表达变化一致。免疫荧光结果显示，对照组及1周组大鼠肾脏荧光强度表达一致，其余各组较低，48h组荧光强度最低。结论在高原低氧环境下大鼠肾脏内髓AQP2 mRNA和蛋白的表达在缺氧早期呈下降趋势，后逐渐上升到正常水平，其改变可能和机体对缺氧的程度和高原低氧的习服过程有关。