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基于牛结节性皮肤病病毒ORF61基因荧光定量检测方法的建立
1
作者
马春玲
任善会
+7 位作者
杨雪
蔺玉刚
李积雲
王相伟
殷相平
孙跃峰
万学瑞
陈豪泰
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期1800-1809,共10页
基于国内流行的牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)的基因组序列,建立了靶向ORF61基因的MGB探针荧光定量PCR检测方法。本研究基于LSDV基因序列设计出带有MGB探针的特异性荧光定量PCR引物,并进行特异性和灵敏性筛选验...
基于国内流行的牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)的基因组序列,建立了靶向ORF61基因的MGB探针荧光定量PCR检测方法。本研究基于LSDV基因序列设计出带有MGB探针的特异性荧光定量PCR引物,并进行特异性和灵敏性筛选验证。最终,筛选得到靶向于LSDV ORF61基因的一对qPCR引物;利用pCAGGS-ORF61真核表达质粒,获得标准曲线y=-3.287 5x+47.87,线性相关系数R^(2)=0.998 6,扩增效率达101%;荧光定量PCR特异性、重复性和灵敏性试验结果表明,该引物的特异性高、重复性良好和灵敏度高等优点;该引物的最低检测限为6.71拷贝·μL^(-1),各批次内与批次间重复性结果的变异系数均小于2%。以上结果表明,作者建立特异性LSDV的荧光定量PCR检测方法,为LSD预防和控制提供有效的检测手段。
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关键词
牛结节性皮肤病病毒
ORF61
MGB探针
荧光定量PCR
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职称材料
题名
基于牛结节性皮肤病病毒ORF61基因荧光定量检测方法的建立
1
作者
马春玲
任善会
杨雪
蔺玉刚
李积雲
王相伟
殷相平
孙跃峰
万学瑞
陈豪泰
机构
中国农业
科学
院兰州兽医
研究所
甘肃农业大学
塔里木大学
青海省科学技术研究院信息研究所
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期1800-1809,共10页
基金
国家自然科学基金(32302850)
甘肃省科技计划资助(22JR5RA035)
+1 种基金
甘肃省科技重大专项(22ZD6NA001)
中国农业科学院兰州兽医研究所基本科研业务费(1610312021008)。
文摘
基于国内流行的牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)的基因组序列,建立了靶向ORF61基因的MGB探针荧光定量PCR检测方法。本研究基于LSDV基因序列设计出带有MGB探针的特异性荧光定量PCR引物,并进行特异性和灵敏性筛选验证。最终,筛选得到靶向于LSDV ORF61基因的一对qPCR引物;利用pCAGGS-ORF61真核表达质粒,获得标准曲线y=-3.287 5x+47.87,线性相关系数R^(2)=0.998 6,扩增效率达101%;荧光定量PCR特异性、重复性和灵敏性试验结果表明,该引物的特异性高、重复性良好和灵敏度高等优点;该引物的最低检测限为6.71拷贝·μL^(-1),各批次内与批次间重复性结果的变异系数均小于2%。以上结果表明,作者建立特异性LSDV的荧光定量PCR检测方法,为LSD预防和控制提供有效的检测手段。
关键词
牛结节性皮肤病病毒
ORF61
MGB探针
荧光定量PCR
Keywords
lumpy skin disease virus
ORF61
MGB probe
fluorescence quantitative PCR
分类号
S852 [农业科学—基础兽医学]
S659.1 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于牛结节性皮肤病病毒ORF61基因荧光定量检测方法的建立
马春玲
任善会
杨雪
蔺玉刚
李积雲
王相伟
殷相平
孙跃峰
万学瑞
陈豪泰
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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