LINC02532调控miR-194-3p/HMGB1分子轴对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究LINC02532调控miR-194-3p/高迁移率族蛋白1(HMGB1)轴对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)增殖和凋亡的影响。方法:RT-qPCR法分析瘢痕疙瘩组织、正常皮肤组织中LINC02532和miR-194-3p表达量。将HKF细胞分为si-NC组、si-LINC02532组、miR-NC组、miR-194-3p组、si-LINC02532+anti-miR-NC组和si-LINC02532+anti-miR-194-3p组。CCK-8法、集落形成实验、流式细胞术和Western blotting分别用于分析HKF活力、集落形成数、凋亡率以及HMGB1蛋白表达。荧光素酶试验、RT-qPCR和Western blotting检测LINC02532与miR-194-3p、miR-194-3p与HMGB1之间的相互作用。结果:与正常皮肤组织比较,瘢痕疙瘩组织中LINC02532表达量明显升高,而miR-194-3p表达量明显降低(均P<0.05)。与si-NC组比较,siLINC02532组细胞活力、集落形成数、HMGB1蛋白表达降低,凋亡率、miR-194-3p表达升高(均P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-194-3p组HKF细胞活力、集落形成数、HMGB1蛋白表达降低,凋亡率升高(均P<0.05)。miR-194-3p与LINC02532、HMGB1互补结合。与si-LINC02532+anti-miR-NC组比较,si-LINC02532+anti-miR-194-3p组HKF细胞活力、集落形成数、HMGB1蛋白表达升高,凋亡率降低(均P<0.05)。结论:人瘢痕疙瘩组织中LINC02532呈高表达,干扰LINC02532可能通过上调miR-194-3p/HMGB1分子轴抑制HKF增殖,诱导细胞凋亡。

LncRNA CEBPA-AS1对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制

目的探讨LncRNA CEBPA-AS1对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制。方法原代分离培养人正常皮肤成纤维细胞与瘢痕疙瘩成纤维细胞,采用RT-qPCR法检测CEBPA-AS1与miR-194-3p表达;siNC、si-CEBPA-AS1、si-CEBPA-AS1与anti-miR-NC、si-CEBPA-AS1与anti-miR-194-3p分别转染瘢痕疙瘩成纤维细胞(si-NC组、si-CEBPA-AS1组、si-CEBPA-AS1+anti-miR-NC组、si-CEBPA-AS1+anti-miR-194-3p组);采用CCK-8实验、划痕实验、Transwell小室实验分别检测细胞增殖、迁移及侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测CEBPA-AS1与miR-194-3p的靶向关系;采用Western blotting法检测ProcollagenⅠ、α-SMA、Col1、N-cadherin、E-cadherin蛋白表达。结果与正常皮肤成纤维细胞比较,瘢痕疙瘩成纤维细胞中CEBPA-AS1表达升高(P<0.05),miR-194-3p表达降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-CEBPA-AS1组细胞存活率降低(P<0.05),迁移距离减小(P<0.05),侵袭细胞数减少(P<0.05),ProcollagenⅠ、α-SMA、Col1、N-cadherin蛋白水平降低(P均<0.05),E-cadherin蛋白水平升高(P<0.05)。CEBPA-AS1可靶向调控miR-194-3p。与si-CEBPA-AS1+anti-miR-NC组比较,si-CEBPA-AS1+anti-miR-194-3p组miR-194-3p表达降低(P<0.05),细胞存活率升高(P<0.05),迁移距离增加(P<0.05),侵袭细胞数增多(P<0.05),ProcollagenⅠ、α-SMA、Col1、N-cadherin蛋白水平升高(P均<0.05),E-cadherin蛋白水平降低(P<0.05)。结论干扰LncRNA CEBPA-AS1表达可通过靶向调控miR-194-3p而抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移、侵袭。