猪囊尾蚴铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)基因的克隆和表达

目的克隆猪囊尾蚴胞质含铜/锌的超氧化物歧化酶基因(Cu/ZnSOD),并比较其与其它寄生蠕虫相应基因结构的相似性。方法通过获取其它生物Cu/ZnSOD基因的保守区域,设计保守引物,用于扩增该寄生虫的Cu/ZnSOD基因。结果Cu/ZnSOD基因编码一15.6kDa的蛋白,该蛋白的推导序列中含有这类酶的活性和二级结构所需要的所有保守的氨基酸残基,并且与其它寄生虫的相应序列有高达70.6%的相似度。抑制剂研究试验表明所克隆的SOD属于Cu/ZnSOD,该蛋白在大肠杆菌中得以成功表达,表达产物具有SOD活性。免疫印迹试验发现猪囊尾蚴Cu/ZnSOD对人不仅具有抗原性,而且与其它几种蠕虫的Cu/ZnSOD有广泛的交叉免疫反应。结论克隆并表达出猪囊尾蚴Cu/ZnSOD,它与其它寄生吸虫和绦虫的Cu/ZnSOD在氨基酸水平具有很高的相似度,因此是理想的广谱抗寄生虫药物和疫苗的靶蛋白,值得进一步研究。