热休克对肌原纤维蛋白-1在成纤维细胞中表达水平的影响

目的:观察热休克后,人成纤维细胞中肌原纤维蛋白-1mRNA的表达水平及培养上清中蛋白质含量的变化,以探讨热休克后人体皮肤真皮组织中肌原纤维蛋白-1表达下降的可能机制,并建立皮肤光老化修复的体外试验模型。方法:将人成纤维细胞加热至43℃,30min后恢复常规培养,分别于24h,48h及72h收集细胞,以Northernblot方法及Westernblot方法分别检测成纤维细胞表达肌原纤维蛋白-1mRNA的水平及培养上清中的蛋白含量。结果:热休克后24h及48h,成纤维细胞中肌原纤维蛋白-1mRNA表达水平明显下降,72h略有回升。培养上清中肌原纤维蛋白-1的蛋白质含量变化与此相似。结论:热休克后,人体皮肤真皮组织中肌原纤维蛋白-1的表达降低,与成纤维细胞转录、合成及分泌肌原纤维蛋白-1的水平下降密切相关,提示该体外试验模型可用于进一步研究热休克对肌原纤维蛋白-1的调控机制,也可用于评价皮肤光老化治疗药物的疗效。

热休克诱导弹性蛋白原在培养的人真皮成纤维细胞中异常表达

目的 :观察热休克对体外培养的人类真皮成纤维细胞中弹性蛋白原mRNA以及蛋白质表达的影响 ,以阐明环境因素中的热休克效应在皮肤日光弹力变性中所起的作用。方法 :将原代培养的人类真皮成纤维细胞置于 4 3℃水浴箱中 30min ,然后恢复 37℃ ,5 % (体积分数 )CO2 恒温培养 ,分别于 2 4h以及 4 8h收集标本 ,以Northernblot和Westernblot方法分别检测弹性蛋白原mRNA及蛋白质的表达水平。结果 :热休克刺激后弹性蛋白原mRNA表达明显上升 ,热休克后 2 4h上升为对照组的 (16 3± 12 ) % (P <0 .0 5 ) ,4 8h上升为对照组的 (2 2 1± 2 2 ) % (P <0 .0 5 ) ,同时成纤维细胞培养上清液中弹性蛋白原的蛋白质表达水平也明显增高 ,2 4h上升为对照组的 (14 9± 12 ) % (P <0 .0 5 ) ,4 8h上升为对照组的 (783± 10 ) % (P <0 .0 5 )。结论 :在体外原代培养的人类真皮成纤维细胞中 ,热休克可诱导弹性蛋白原mRNA以及蛋白质的过度表达 ,提示该异常增多的弹性蛋白原可能在日光弹力变性的发生、发展中起重要作用。