双氰基二苯代乙烯型双光子荧光温度敏感探针

对二甲苯分别经过亲电取代、亲核取代、α-位溴代和亲核取代消除反应得到1,4-二氰基-2-甲基-5-(二乙基磷酰基甲基)苯(Ⅴ);咔唑经过亲核取代反应得到中间体4-(9-咔唑基)-苯甲醛(Ⅶ);中间体Ⅴ与Ⅶ经维蒂希-霍纳尔反应得到目标化合物2,5-二氰基-4-甲基-4′-(9-咔唑基)二苯乙烯(供体-π-受体,D-π-A)(SP),反应总产率达45.5%。SP的溶剂生色范围由412 nm(环己烷)红移至541 nm(二甲基亚砜)(最大发射波长),SP具有非常大的双光子吸收截面(δTPA=6930 GM)和高的荧光量子产率[Φ=0.992(环己烷)],其荧光强度对溶剂极性和温度显示很强的依赖性。在单光子荧光发射(OPE)和双光子荧光发射(TPE)谱图中,SP的单、双光子荧光发射强度与温度之间的线性相关系数(R^(2))均>0.998,表达式分别为IF=–0.0141θ+1.2881(OPE)和IF=–0.0143θ+1.2698(TPE)[IF为荧光强度,θ为温度(℃)]。

用于新型冠状病毒快速诊断的荧光免疫层析试纸条的制备及其细胞成像

合成了双光子荧光标记探针LP并对其结构进行了表征,通过LP标记SARS-CoV-2的N-蛋白抗原(Ag)获得LP-Ag,并将LP-Ag制成免疫层析试纸条(TPICS)/试剂盒(TPICK)。临床应用研究表明,与核酸法(PCR)/胶体金法比较,TPICS的阳性符合率、阴性符合率和总符合率分别为98.99%/98.10%、99.55%/99.53%和99.38%/99.06%,其一致性系数Kappa值(K)为0.972/0.975,灵敏度、特异性和准确度分别为98.99%/98.10%、99.55%/99.53%和99.38%/99.06%。检测试剂与参比试剂检测结果一致(K>0.75),无统计学差异。TPICS/TPICK检测所用稀释血样一般为25~50μL(合全血样5~10μL),检测时间在10 min内,既避免了核酸法操作繁琐与检测周期过长的缺点,又克服了胶体金法因吸附官能团脱落而导致的不稳定性,具有良好的应用价值。LP-Ag可用于细胞中SARS-Co V-2成像以鉴定其阴阳性。

衍生于咔唑的双氰基二苯代乙烯型双光子荧光脂筏探针

制备了一个衍生于咔唑的双氰基二苯代乙烯型双光子荧光脂筏探针——(E)-2-甲基-5-{2-[9-正辛基(3-咔唑基)]乙烯基}对苯二甲腈(DLR),并对其结构进行了表征.结果表明,DLR属于推-拉电子结构(供体-桥-受体,D-π-A),其最大发射波长随介质极性递增,而其荧光强度却随极性递减.DLR在二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)中的发射强度是在二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)中的20倍,其对DPPC,模拟脂筏[n(DOPC)∶n(鞘磷脂)∶n(胆固醇)=1∶1∶1]和DOPC的荧光强度比为20∶12.8∶1,在DPPC中的荧光寿命是在DOPC中的2.2倍以上,表明DLR能很好地区分DPPC与DOPC.DLR在DPPC和DOPC中的双光子发射截面(Φδ)分别为1350和67 GM,表明DLR能够很好地识别脂筏,成像脂筏在细胞与组织中的分布动态.