乌梅等20种中药对胸膜肺炎放线杆菌的体外抗菌活性研究

【目的】观察乌梅Fructus mume等20种中药的体外抗胸膜肺炎放线杆菌Actinobacillus pleuropneumoniae活性．【方法】通过乙醇回流、水煎煮和超声波等方法对20种中药进行提取，采用二倍稀释法测定其对胸膜肺炎放线杆菌的体外抗菌活性；并研究抗菌活性较强的几味中药的体外联合抑菌活性．【结果和结论】乌梅、黄连Rhizoma cop-tidis、诃子Terminalia chebula、秦皮Cortex fraxini、地榆Sanguisorbae officinalis、虎杖Polygonum cuspidatum 6种中药提取物对胸膜肺炎放线杆菌的最小抑菌浓度（ Minimal inhibitory concentration ，MIC）范围是6.25～50.00 mg/mL；大青叶Isatis indigotica、茵陈Artemisia capillaris、甘草Glycyrrhiza uralensis和白鲜皮Dictamnus dasycarpus 4种中药提取物的MIC范围是50.00～100.00 mg/mL；黄柏Phellodendron amurense、杜仲Eucommia ulmoides、金银花Lonicera japoni-ca、柴胡Bupleurum chinense、蒲公英Taraxacum mongolicum、板蓝根Baphicacanthus cusia、栀子Gardenia jasminoides和黄芪Astragalus membranaceus等10种中药提取物的MIC＞100.00 mg/mL．联合抑菌试验结果表明，乌梅、黄连、诃子和虎杖两两联合抑菌指数（FICI）≤1，乌梅、虎杖分别与秦皮的FICI＞2．乌梅、黄连、诃子、虎杖、秦皮、地榆对胸膜肺炎放线杆菌均具有较好的体外抗菌活性；乌梅、黄连、诃子和虎杖两两联合为相加、协同作用；秦皮分别与乌梅、虎杖为拮抗作用．

5味中药对鸡白痢沙门氏菌的体外联合抑菌研究

【目的】探讨诃子、虎杖、紫花地丁、夏枯草和何首乌提取物对鸡白痢沙门氏菌的抑制效果。【方法】采用超声波处理、乙醇回流、水浴加热的方法,提取诃子、虎杖、紫花地丁、夏枯草、何首乌5味中药的有效成分,采用二倍试管稀释法分别测定各中药提取物对鸡白痢沙门氏菌的最小抑菌质量浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌质量浓度(Minimal bactericidal concentration,MBC),并采用肉汤稀释棋盘法,测定中药提取物对鸡白痢沙门氏菌的联合抑菌效果。【结果】诃子、虎杖、紫花地丁、夏枯草、何首乌提取物对鸡白痢沙门氏菌的MIC、MBC值分别为15.60~62.50,15.60~125.00mg/mL(以生药计算)。虎杖、夏枯草、紫花地丁、何首乌与诃子联合用药时,对鸡白痢沙门氏菌的联合抑菌指数(FICI)均为0.25;虎杖与紫花地丁、夏枯草,紫花地丁与夏枯草联合用药时的FICI为1.25~2;何首乌与虎杖、紫花地丁、夏枯草联合用药时的FICI均大于2。【结论】虎杖、夏枯草和诃子提取物对鸡白痢沙门氏菌具有较强的体外抑菌活性。诃子与虎杖、紫花地丁、何首乌、夏枯草联合应用,其抑菌呈协同作用;虎杖与紫花地丁、夏枯草,紫花地丁与夏枯草联合应用,其抑菌呈无关作用;何首乌与虎杖、紫花地丁、夏枯草联合应用,其抑菌呈拮抗作用。

OAS蛋白结构与抗病毒机制关系的研究进展

2＇-5＇寡聚腺苷酸合成酶（2＇-5＇oligoadenylate synthetase,OAS）是由Ian Kerr等最先在人体细胞中发现的,之后在小鼠、猪、牛、犬和低等生物如海绵动物体内也陆续发现了OAS[1-2]。

20味中药提取物对无乳链球菌的体外抑菌活性研究

【目的】筛选对无乳链球菌Streptococcus agalactiae具有良好体外抑菌效果的中药．【方法】通过乙醇回流、超声波方法提取20味中药的抗菌活性部位，采用试管二倍稀释法测定黄连Coptis chinensis等20味中药提取物对无乳链球菌的最低抑菌浓度（ Minimal inhibitory concentration ，MIC）和最低杀菌浓度（ Minimal bactericidal concentration ， MBC），并评价抗菌活性较强的几味中药的体外联合抑菌效果．【结果和结论】乌梅Prunus mume、黄连、黄芩Scutel-laria baicalensis、虎杖Polygonum cuspidatum和地榆Sanguisorba officinalis 5味中药提取物对无乳链球菌的MIC范围为7.80～31.25 mg/mL．蒲公英Taraxacum mongolicum、茵陈Artemisia scoparia、秦皮Fraxinus rhynchophylla、艾叶Arte-misia argyi、黄柏 Phellodendron chinense、鱼腥草 Houttuynia cordata、紫花地丁 Violae yedoensis 和白头翁 Pulsatilla chinensis 8味中药提取物的MIC范围为62.50～125.00 mg/mL．何首乌Po．multiflorum、苦参Sophora flavescens、穿心莲Andrographis paniculata、杜仲Eucommia ulmoides、连翘Forsythia suspensa、金银花Lonicera japonica和夏枯草Prunel-la vulgaris 7味中药提取物的MIC范围为250.00～500.00 mg/mL．联合抑菌试验结果表明，黄芩、虎杖、地榆和黄连的联合抑菌指数（FICI）≤1，虎杖、黄芩和地榆的FICI＞2．黄连、黄芩、虎杖和地榆对无乳链球菌均具有很强的体外抗菌活性，地榆、黄连为相加作用，黄连、黄芩和虎杖为协同作用，地榆与黄芩、虎杖为拮抗作用．

18味中药提取物体外抗鸭瘟病毒活性的研究

我国传统中药在临床中广泛用于抗病毒疾病的治疗,该研究以18味传统中药为研究对象,希望找到对鸭瘟病毒具有良好抑制作用的中药原料。首先,通过细胞病变观察法(cytopathic effect,CPE)初步筛选了18味中药水提取物和醇提物进行体外抗鸭瘟病毒活性研究,发现当虎杖醇提物质量浓度为0.062 5mg/mL和0.031 3mg/mL,茜草醇提物质量浓度为0.007 8mg/mL时,可抑制鸭瘟病毒引起的鸭胚成纤维细胞病变。进而通过四甲基偶氮唑盐法[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]进一步研究了虎杖和茜草醇提物的体外抗鸭瘟病毒活性。结果显示:当虎杖质量浓度为0.062 5mg/mL、茜草质量浓度为0.007 8mg/mL时,对鸭瘟病毒的体外抑制率分别为76.50%、48.91%,虎杖醇提物的半数有效质量浓度(50%inhibitory concentration,IC50)为0.022 7mg/mL,茜草醇提物的IC50>0.007 8mg/mL。提示虎杖和茜草醇提物均有不同程度的体外抗鸭瘟病毒活性,其中虎杖效果优于茜草,具有进一步研究的价值。

沙门氏菌分子生物学研究进展

自1885年Sal mon等分离得到猪霍乱沙门氏菌以来,目前已检出沙门氏菌血清型2500余种,我国已有292个血清型报道[1]。沙门氏菌是重要的人兽共患病病原菌之一,本文就沙门氏菌基因组学、鞭毛蛋白。

鸭疫里默氏杆菌病原及其防控关键技术研究

文章回顾了鸭疫里默氏杆菌的病原鉴定、主要抗原、耐药机制等若干基础问题的研究进展,分析了鸭疫里默氏杆菌全基因组测序工作的完成对进一步深入开展致病机理研究和疫苗研发的重要意义。同时,从我国水禽生产的角度对鸭疫里默氏杆菌病的防控关键技术进行了详细阐述。

乌梅等三味具有抑菌活性中药的最佳提取工艺研究

优选乌梅等三味具有抗胸膜肺炎放线杆菌活性中药的有效物质提取工艺。以浸膏得率、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)为指标,采用正交设计实验,综合考虑溶剂浓度、料液比、提取次数、提取时间、提取温度等影响因素,对三味中药有效物质提取工艺进行优选研究。优选出的最佳提取工艺为:黄连粗粉70%乙醇浓度(8倍量),加热回流提取2次,每次2 h;乌梅粗粉95%乙醇浓度(10倍量),90℃加热回流提取1次,每次8 h;虎杖粗粉60%乙醇浓度(6倍量),90℃加热回流提取3次,每次2 h。最佳提取工艺下,黄连、乌梅和虎杖三种提取物浸膏对胸膜肺炎放线杆菌的MIC值分别为15.60、10.40、15.60 mg/m L,MBC值分别为26.00、18.20、15.60 mg/m L。

JEV入侵BHK-21细胞内吞途径的初步研究

目的利用Real-time RT-PCR技术研究,对乙型脑炎病毒入侵细胞的内吞途径进行初步研究。方法选用氯丙嗪、制霉菌素和细胞松弛素D3种药物分别处理细胞,以分别阻滞网格蛋白介导内吞途径、细胞膜穴样内陷途径和巨胞饮途径,然后进行JEV感染实验,通过Real-time RT-PCR方法测定感染后1h、12h、24h细胞内的病毒拷贝数。结果与仅实施感染实验、未进行药物处理的对照组比较,3种药物处理组的细胞内病毒拷贝数在感染后各时相点均呈现不同程度的下降,在感染1h、12h和24h后,氯丙嗪处理组细胞内病毒拷贝数分别下降了59.58%,53.34%和61.35%;细胞松弛素D组细胞内病毒拷贝数分别下降了23.59%,30.77%和30.14%;制霉菌素组细胞内病毒拷贝数分别下降了35.56%,34.40%和34.40%。结论乙型脑炎病毒主要利用网格蛋白介导内吞途径进入BHK-21细胞。

RNA干扰的研究方法

RNA干扰(RNA i)技术是把与内源mRNA编码区同源的小片段外源双链RNA(doublestranded RNA)导入细胞中,导致特定基因表达沉默的一种技术。本文简要描述了RNA i的起源、原理、在动物方面的应用领域;主要叙述了RNA i技术的机制以及siRNA试验步骤,包括siRNA的设计、合成、检测方法等;比较了各种方法的特点。

α-疱疹病毒US5基因及其编码蛋白研究进展

主要对α-疱疹病毒US5基因及其表达的囊膜糖蛋白gJ的特点进行总结,对其在抗细胞凋亡、宿主细胞呼吸链中的氧化磷酸化作用及调节病毒释放的作用进行阐述,以便深入研究α-疱疹病毒对宿主细胞的感染机制,为进一步开展相关研究提供参考。

禽类干扰素受体介导的抗病毒免疫机制研究进展

干扰素受体作为一种"分子开关",参与调控宿主抗病毒免疫状态和细胞免疫因子的表达水平。作为抗病毒信号传导中的重要枢纽,干扰素受体表达水平的高低直接影响着机体抗病毒免疫反应状态。干扰素受体通过介导宿主抵抗外来病原体的信号级联放大效应来增强机体的抗病毒免疫状态。该正反馈调控机制是抗病毒感染中最重要的免疫扩大反应,也是宿主抵御病毒入侵和增殖的核心反应。禽类干扰素受体研究尚处于起步阶段,本文就干扰素受体的结构和分类,抗病毒效应蛋白质,以及禽类干扰素受体介导的抗病毒免疫机制的最新研究进展作一综述。

多杀性巴氏杆菌脂多糖的结构与功能研究进展

多杀性巴氏杆菌是一种兼性厌氧的革兰阴性菌,能够造成多种动物的巴氏杆菌病。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)既是细菌重要的毒力因子,又是主要的保护性抗原。依据LPS血清学反应,多杀性巴氏杆菌可分为16个血清型。与大多数革兰阴性菌不同,多杀性巴氏杆菌的脂多糖不含O-抗原,仅由类脂A和核心寡糖两部分组成。近年来人们通过质谱检测和基因测序陆续揭示了这16个血清型核心寡糖的化学结构和合成基因。研究表明,各血清型内核心寡糖结构十分保守,合成基因分散存在于基因组;外核心寡糖的化学组成具有多样性,其合成基因成簇存在,形成外核心寡糖基因簇。虽然有些血清型共享同样的外核心寡糖基因簇,但由于基因突变造成它们外核心寡糖结构的异质性。研究还发现核心寡糖的结构与多杀性巴氏杆菌的毒力有关。作者在本文中综述了多杀性巴氏杆菌16个血清型的核心寡糖的化学结构、基因组成及其结构与毒力的关系,为多杀性巴氏杆菌病的防治提供借鉴。

鸭疫里默氏杆菌TbdR1表位抗原免疫原性研究

TbdR1(Ton B-dependent receptor 1)是鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)血清1、2和10型中的一个很好的交叉免疫原性抗原。通过生物信息学分析,分段表达TbdR1的表位抗原,并对其免疫原性进行初步探究。结果表明,分段后的表位抗原对雏鸭均具有一定的保护力,这为深入研究鸭疫里默氏杆菌亚单位疫苗奠定了基础。

鸭瘟病毒致病性研究进展

鸭瘟病毒(DPV)是一种主要感染鸭、鹅等雁形目禽类的一种泛嗜性病毒,感染机体后可在全身各组织器官中广泛分布并导致病理变化,主要侵嗜机体的免疫器官、神经组织以及消化器官等。DPV可诱导机体细胞凋亡,使机体的免疫器官受到损伤导致机体免疫力下降,进而有利于病毒在机体各组织器官的扩散;DPV可潜伏感染,并与细胞凋亡之间存在一定的关联。近年来,有关DPV的毒力基因等分子致病机制研究也取得一定进展。本文就DPV致病机理的研究进行总结,以期为鸭瘟的防控及以DPV为载体的禽类活载体疫苗的研究提供理论依据和参考。

禽类抗病毒相关TOLL样受体研究进展

先天性免疫系统是机体抵抗病原微生物的第一道防线，在机体免疫反应中起着至关重要的作用。过去对动物机体免疫反应的研究多集中于适应性免疫，然而近年来先天性免疫或称固有免疫越来越受到重视，先天性免疫系统既可以直接对抗某些病原体，又参与诱导机体适应性免疫应答的起始阶段。

禽疱疹病毒活载体疫苗研究进展

禽疱疹病毒主要包括α疱疹病毒亚科的鸡马立克氏病毒(Marek’s disease virus,MDV)、传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus,IBDV)和鸭肠炎病毒(duck enteritis virus,DEV)。作为疱疹病毒家族的成员,禽疱疹病毒基因组庞大,存在多个复制非必需区,可容纳多个外源基因的插入,是表达其他禽类病原抗原基因的理想载体。总结了禽疱疹病毒的构建方法、外源基因表达水平,并对MDV、IBDV和DEV三种禽疱疹病毒的不同重组病毒疫苗免疫效果评价进行归纳,旨在为畜禽传染病防治提供参考依据。

重组鸭肠炎病毒载体疫苗研究进展

重组病毒载体疫苗是一种以减毒活病毒为载体承载表达其他病原抗原性基因的新型疫苗,能感染宿主细胞、递呈外源基因所表达的抗原蛋白、诱导机体产生体液免疫应答和细胞免疫应答,从而有效地预防多种疾病。鸭肠炎病毒基因组长约160kb,包含多个非编码区和病毒复制非必需区,可携带多个或较大的外源基因,是构建重组活病毒疫苗的理想载体。随着分子生物学研究的不断深入和分子生物学实验技术的飞速发展,对鸭肠炎病毒基因组进行遗传修饰的技术手段已十分成熟,目前已通过这些技术成功构建了多株重组鸭肠炎病毒活载体疫苗。研究表明构建的重组鸭肠炎病毒活载体疫苗可成功抵抗鸭肠炎病毒和其他相应病原的攻击,具有作为重组病毒疫苗载体的潜力,并在未来的禽类新型疫苗研制中发挥重要作用。本文对以鸭肠炎病毒作为载体的重组病毒活载体疫苗的研究进展进行综述,以期为鸭肠炎病毒载体疫苗的研发提供参考。

干扰素刺激基因viperin所编码蛋白的结构与抗病毒功能的研究进展

Viperin（Virus inhibitory protein，endoplasmic reticulum—associated，interferon—inducible）是近年来新鉴定的定位于内质网膜上的抗病毒蛋白，主要通过干扰素依赖或非依赖途径被多种病毒等诱导表达而参与宿主抗病毒免疫反应。固有免疫是机体抵御外源病原体的第一道防线。病原以相关分子模式（Pathogen-associated molecular pattems，PAMPs）进入宿主体，随即被其相应特异性模式识别受体（Patternrecognition receptors，PRRs）识别并结合，激活信号通路，诱导产生包括趋化因子及干扰素（Interferon，IFN）在内的细胞因子等广谱抗病原效应物质。

肠道病毒与宿主固有免疫系统相互作用的研究进展

肠道病毒（Enterovirus,EV）属于小RNA病毒科,为无囊膜、单股正链RNA病毒,包括肠道病毒A-D型、鼻病毒A-C型以及肠道病毒E-J型等共12个属,包含多种人类和动物病毒,如肠道病毒71型（EV-71）、柯萨奇病毒B3（Coxsackievirus B3,CVB3）、脊髓灰质炎病毒（Poliovirus,PV）等[1,2]。