化学性食物中毒因子检测技术研究进展

化学性食物中毒因子的确证因其毒物的不确定性和基质的复杂性一直是卫生检验领域的一个难题。本文从目标毒物分析(亚硝酸盐、农药、杀鼠剂、麻醉品及精神药品、生物毒素以及其它药物等)和非目标毒物筛查(样本前处理技术和仪器筛查技术)两个方面综述了当前化学性毒物检测技术的的主要研究进展,介绍了相关方法的原理、应用、不足及发展方向,以期为化学性食物中毒事件处置及未来研究提供借鉴。

北京市市售生禽肉及社区居民冰箱耶尔森菌污染状况及分子特征研究

目的了解北京市市售生禽肉及社区居民冰箱中耶尔森菌污染状况、生物型、血清型、毒力基因携带情况、抗生素敏感性以及分子特征。方法分批采集北京市区超市和农贸市场冷冻冷藏生禽肉60件和同期社区居民冰箱涂抹60件,进行耶尔森菌病原学检测。对分离菌株进行生物分型、血清凝集、PCR毒力基因检测、抗生素敏感性、PFGE分子分型等研究。结果生禽肉和居民冰箱耶尔森菌检出率分别为21.67%(13/60)和6.67%(4/60)。17株耶尔森菌对氯霉素、环丙沙星等10种抗生素100%敏感,对头孢唑林、氨苄西林耐药率较高,分别为76.47%(13/17)、52.94%(9/17)。2株小肠结肠炎耶尔森菌对11种抗生素耐药。除2株中间耶尔森菌不能被Not I酶切外,其他15株耶尔森菌得到14种PFGE带型,相似度为0~100%。结论耶尔森菌是北京市市售生禽肉及社区居民冰箱潜在污染源,对头孢唑林、氨苄西林耐药率较高,PFGE带型多态性分布。

2019年北京市食源性单增李斯特菌的分子特征和耐药性研究

目的研究2019年北京市食源性单增李斯特菌的分子特征和耐药性。方法采用多重PCR进行血清群分型,分离的56株菌株经脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)、多位点序列分析(multilocus sequence typing,MLST)鉴定,使用微量肉汤法检测菌株的耐药性。结果56株单增李斯特菌中有28株分离自冷锅串串和中式凉拌菜,1/2a,3a是主要的血清群。56株菌共分为29个PFGE带型、14个ST型,ST9、ST5、ST8、ST121是优势ST型。2株菌对环丙沙星耐药,1株菌对四环素耐药。结论冷锅串串和中式凉拌菜是单增李斯特菌污染的高危食品。北京市食品来源单增李斯特菌的ST型别与国内其他地方食品来源菌株一致,与北京市临床分离株一致。

2015～2018年北京市食源性金黄色葡萄球菌耐药性分析

目的掌握北京市食源性金黄色葡萄球菌对常用抗生素的耐药谱和耐药趋势。方法收集2015?2018年北京市食源性致病菌监测网分离到的金黄色葡萄球菌103株,采用CLSI推荐的微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌对11种常用抗生素的敏感性。结果 103株菌中有102株表现为对至少1种抗生素耐药,耐药率排在前三位的是青霉素、红霉素和克林霉素,其中对青霉素的耐药率最高,为99.0%。检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌8株,占7.8%,未见万古霉素耐药株。45.6%(47/103)的菌株同时耐受3类和3类以上抗生素,表现为多重耐药,同时耐受抗生素种类最高为7类。共存在26种耐药谱,优势耐药谱为青霉素、青霉素-红霉素-克林霉素-复方新诺明-庆大霉素和青霉素-红霉素。结论 2015～2018年北京市食源性金黄色葡萄球菌整体耐药水平较高,且多重耐药情况严重,并出现MRSA株,应继续加强北京市食源性金黄色葡萄球菌的耐药性监测。

2008-2018年北京市伤寒、副伤寒沙门菌病原学特征

目的了解北京市伤寒、副伤寒沙门菌流行特征、耐药及分子分型特点,为伤寒、副伤寒防制工作提供依据。方法通过对2008-2018年北京市肠道门诊监测系统收集到的65株伤寒、副伤寒沙门菌,采用最小抑菌浓度(minimal inhibition concentration,MIC)法进行16种抗生素药敏试验;采用脉冲场凝胶电泳PFGE方法进行分子分型研究。结果 65株菌包含4种血清型:伤寒沙门菌24株,占36.9%,甲型副伤寒沙门菌7株,占10.8%,乙型副伤寒沙门菌20株,占30.8%,丙型副伤寒沙门菌14株,占21.5%。随着年代的推移,会出现血清型的交替变迁,2013年以后,以伤寒和乙型副伤寒沙门菌为主。高发年龄组为0～10岁组和31～40岁年龄组。65株菌对阿莫西林-克拉维酸、强力霉素、阿奇霉素和亚胺培南4种抗生素全部敏感,对其他12种抗生素有不同程度的耐药。对磺胺异噁唑、萘啶酸、链霉素和氨苄西林等经典抗生素的耐药性有上升趋势,对头孢菌素和三代氟喹诺酮类环丙沙星不同血清型间耐药性存在差异,多重耐药率为10.8%(7/65)。58株伤寒、副伤寒沙门菌分成34种PFGE型别,带型分散。除2018年一起输入性伤寒暴发识别出9株菌为同一带型,其余每种带型菌株数1～3株不等,相似度为32.2%～100.0%。结论 2008-2018年,北京市伤寒、副伤寒沙门菌维持在较低水平,血清型正逐步转变成以伤寒和乙型副伤寒为主。不同血清型间抗生素耐药程度不同,临床应合理用药。PFGE型别多样,未出现优势克隆群。

一起疑似产气荚膜梭菌食物中毒事件的病原学分析

目的分析一起疑似产气荚膜梭菌食物中毒事件的病原学。方法利用荧光定量PCR方法对一起食物中毒患者的粪便进行产气荚膜梭菌基因的初筛,根据荧光定量PCR初筛的提示结果进行细菌的分离培养,对分离到的菌株进行质谱和生化鉴定、毒力基因检测和PFGE分析。结果从5份食物中毒患者粪便中分离到5株携带肠毒素基因cpe的A型产气荚膜梭菌,并且这5株菌的PFGE带型完全一致。结论此次食物中毒致病因子为携带肠毒素基因cpe的A型产气荚膜梭菌,PFGE结果提示5株菌可能有同一来源。

2012-2019年北京市昌平区散发腹泻病例四种病毒监测结果分析

目的对北京市昌平区2012-2019年散发腹泻病例4种病毒监测结果进行分析,了解其流行特征。方法采集此期间辖区2家哨点医院肠道门诊散发腹泻病例便样本960份,提取核酸后用实时荧光RT-PCR方法检测A组轮状病毒、GⅠ/GⅡ组诺如病毒、星状病毒和肠道腺病毒,用描述性流行病学方法从时间、性别和年龄分布分析其流行特征。结果960份便样本的病毒总检出率为32.29%(310/960),GⅠ/GⅡ组诺如病毒、A组轮状病毒、星状病毒和肠道腺病毒检出率分别为18.96%(182/960)、10.63%(102/960)、1.98%(19/960)和0.73%(7/960);在不同年份、性别和年龄组中,均为GⅠ/GⅡ组诺如病毒检出率最高,A组轮状病毒次之;GⅠ/GⅡ组诺如病毒春季检出率最高(28.33%,68/240),冬季次之(22.50%,54/240);A组轮状病毒冬季检出率最高(25.42%,61/240),春季次之(9.58%,23/240)。结论GⅠ/GⅡ组诺如病毒和A组轮状病毒是北京市昌平区冬春季散发腹泻病例的主要病原。

2010-2019年北京市副溶血性弧菌临床分离株血清型和耐药性分析

目的了解副溶血性弧菌(vibrio parahaemolyticus,VP)感染在北京市的流行趋势、血清群分布和耐药情况,为预防和治疗副溶血性弧菌感染性腹泻提供理论依据。方法回顾性分析北京市2010-2019年肠道门诊腹泻患者中分离的副溶血性弧菌;采用玻片凝集法进行血清型检测;纸片扩散法(KB)或最小抑菌浓度(MIC)法进行抗生素的药敏试验。结果2010-2019年从46249份临床样本中共检出1853株副溶血性弧菌,检出率4.0%。20~39岁青壮年感染率最高,为6.1%。共分出9个O血清群,59种血清型。其中O3∶K6血清型共检出1254株(67.7%),是引起腹泻的最主要血清型。前2~10位血清型依次为O4∶KUT、O4∶K8、O1∶KUT、O2∶K3、O4∶K9、O3∶KUT、O10∶K60、O1∶K36和O4∶K6。随着年代的推移,会出现血清型的交替变迁及新血清型的不断涌现。菌株对氨苄西林和多粘菌素E的耐药率最高,分别为51.5%和47.8%;对头孢唑林和链霉素也存在一定程度耐药,耐药率为22.9%和10.5%;对头孢菌素、氯霉素及其他各类抗生素均有少量菌株耐药;对环丙沙星、左氧氟沙星和美洛培南无耐药。伴随着对抗生素敏感率的逐渐降低,耐药率总体呈现逐渐增高趋势,且有多重耐药菌株和ESBLs菌株。结论北京市腹泻人群副溶血性弧菌十年间血清型构成在不断演变,对常用抗菌药物耐药率呈逐年增长趋势,需要加强对血清型和耐药性的持续系统监测及重点人群的监督管理。

北京市房山区腹泻患者空肠弯曲菌感染及菌株分型耐药特征

目的了解北京市房山区感染性腹泻患者空肠弯曲菌感染及分离株的病原学特征。方法2017年5—12月,收集2家医院腹泻患者的粪便标本,进行弯曲菌的分离、培养及鉴定。对分离的空肠弯曲菌进行11种抗生素的敏感性检测,并对菌株进行多位点序列分型。结果共检测标本286份,分离到弯曲菌31份,检出率为10.80%;经质谱鉴定28株为空肠弯曲菌,3株为结肠弯曲菌。空肠弯曲菌可分为23种不同的ST型,其中4株为ST22,2株为ST760,2株为ST6500,其他20株分别属于20种ST型别;研究发现3个新的ST型,分别为ST9253、ST9254和ST9255。28株空肠弯曲菌对萘啶酸、环丙沙星、四环素的耐药率达100.00%,对氟苯尼考的耐药率为39.29%,对红霉素、阿奇霉素、泰利霉素、克林霉素敏感。结论北京市房山区腹泻患者空肠弯曲菌感染率较高,对喹诺酮、氟喹诺酮类、四环素类药物耐药严重,对大环内酯类、酮内酯类和林可酰胺类药物敏感;菌株的ST型呈多样性分布。

北京市不同来源非伤寒沙门菌的分子分型和耐药性分析

目的分析北京市不同来源非伤寒沙门菌的分子流行病学特征及耐药情况。方法对腹泻患者粪便和食品中分离的53株非伤寒沙门菌进行血清分型,并对所有菌株进行PFGE分型和抗生素敏感性检测。结果腹泻患者粪便来源和食品来源沙门菌的血清型分布不同,食品中分离到6株鼠伤寒沙门菌单项变种1,4,[5],12:i:-。53株非伤寒沙门菌通过PFGE分型分为31个不同的带型,每个带型包含1~10株菌,同一血清型菌株PFGE带型聚集成簇。抗生素敏感性结果显示,79.25%的菌株对至少一种抗生素耐药,其中多重耐药菌株14株。耐药率高的前三种抗生素分别是:萘啶酸60.38%、四环素35.85%、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑18.88%。两种来源的印第安纳沙门菌的耐药情况严重。结论北京市不同来源非伤寒沙门菌的耐药情况比严重,多重耐药菌株的PFGE带型多样,加强耐药监测和分子分型网络化、合理使用抗生素意义重大。

2014～2018年北京市人源性肠产毒性大肠埃希菌耐药性与PFGE分子分型研究

目的分析北京市门诊腹泻病例肠产毒性大肠埃希菌(enterotoxigenic Escherichiacoli,ETEC)分离株抗生素敏感性及分子分型特征。方法采用微量肉汤稀释法对2014~2018年北京市门诊腹泻病例ETEC分离株进行8大类14种抗生素敏感性检测。参照PulseNet中非O157大肠埃希菌脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)分型方法,对不同区县不同采样时间分离的菌株采用随机抽样原则,对178株菌基因组经限制性内切酶Xba I酶切后进行分子分型和聚类分析。结果 578株2014~2018年北京市门诊腹泻病例ETEC菌株总耐药率为94.29%,对萘啶酸、氨苄西林、头孢唑林耐药率较高,分别为61.58%、60.38%、36.19%。578株菌分为152个耐药谱,耐3种及3种以上抗生素的菌株数达340株(59.00%),有1株菌对12种抗生素耐药。常见耐药谱为耐喹诺酮类的萘啶酸,占20.18%,其次为耐β-内酰胺类的氨苄西林-头孢唑林-头孢噻肟,占12.29%,再次为耐β-内酰胺类的氨苄西林-喹诺酮类的萘啶酸-大环内酯类的阿奇霉素,占6.79%,且耐药谱种类逐年缓慢上升。其中178株菌共产生153种PFGE带型,带型分布较为分散,无优势带型,菌株之间的相似系数为31.60%~100.0%。结论 2014~2018年北京市腹泻病例肠产毒性大肠埃希菌耐药情况严重,耐药谱复杂广泛,多重耐药菌株占比呈逐年缓慢上升趋势。PFGE带型呈多态性分布。

北京市市售花蛤诺如病毒和轮状病毒检出情况及基因特征分析

目的了解北京市市售花蛤诺如病毒和轮状病毒检出情况,分析其基因特征。方法2014年11月-2015年10月,采集北京市三个水产品销售市场新鲜花蛤各24件。用两种方法对花蛤鳃和肠内容物进行病毒浓缩,提取核酸后用实时荧光RT-PCR法检测诺如病毒GI/GII组和A组轮状病毒核酸。用半巢式RT-PCR方法,扩增诺如病毒阳性样本衣壳蛋白VP1区基因,对PCR阳性产物进行测序,用诺如病毒分型工具进行基因亚型鉴定,用MEGA软件最大似然法构建进化树。结果72件花蛤中未检出A组轮状病毒,诺如病毒检出率为34.7%(25/72),GII组、GI组和GI/GII组混合检出率分别为27.8%(20/72)、4.2%(3/72)和2.8%(2/72)。11月诺如病毒检出率最高,为100.0%(6/6);三个水产销售市场诺如病毒检出率分别为25.0%(6/24)、50.0%(12/24)和29.2%(7/24)。10件测序成功,其中6株为GII.17,GII.6、GII.2、GI.3a和GI.4各1株。这些毒株与腹泻患者和外环境参考毒株相似性为97.9%~100.0%。结论北京市市售花蛤存在诺如病毒污染,而且与腹泻患者和外环境参考毒株高度同源,应加强花蛤及销售人群和环境的诺如病毒监测。

2022年北京市一起产气荚膜梭菌引起的食源性疾病暴发事件病原学分析

目的 对一起北京市某学校由产气荚膜梭菌导致的腹泻暴发事件进行病原学分析,为类似疫情的快速精准分析与处置提供参考。方法 采用实时荧光聚合酶链式反应(PCR)方法对样本进行多重病原筛查;根据初筛结果进行常规细菌分离培养、生化鉴定和质谱分析;分离到的产气荚膜梭菌进行PCR毒力基因检测和脉冲场凝胶电泳分子分型。结果 28份病例肛拭子样本中有26份产气荚膜梭菌核酸初筛阳性,分离菌株26株;13份粪便样本有10份产气荚膜梭菌核酸初筛阳性,4份样本分离到20株产气荚膜梭菌;其他样本未检测到病原;46株菌均携带cpa基因和cpe基因,为携带肠毒素CPE基因的A型产气荚膜梭菌;46株菌中41株菌集中在2个脉冲场凝胶电泳带型。结论 本次腹泻暴发事件由产气荚膜梭菌(含肠毒素)导致,分子生物学方法可用于产气荚膜梭菌暴发事件的快速检测。

一起O10:K4型副溶血弧菌食物中毒的病原学特征分析

目的 对北京市丰台区一起O10:K4型副溶血弧菌食物中毒进行病原学特征分析。方法 2021年10月10日北京市丰台区辖区哨点医院上送的食物中毒病例粪便标本共4件,标本编号为FTSY1~4。疾控中心现场处置共采集标本30件,其中食品标本13件、环境标本15件、餐厅用水2件。采用实时荧光PCR法和传统细菌分离鉴定法相结合的方式进行病原学鉴定。副溶血弧菌分离株采用玻片凝集法进行血清分型、PCR法检测毒力基因、微量肉汤稀释法进行药敏试验,选用SfiI酶进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)实验,BioNumerics v6.0软件进行分子分型和聚类分析。采用全基因组测序(WGS)技术及CSIPhylogeny软件进行全基因组单核苷酸多态性分析(wgSNP)。结果 34件标本共分离出4株O10:K4型副溶血弧菌,均为临床分离株。4株菌均为产毒株,携带毒力基因tdh、T3SS1和T3SS2,不携带trh。4株菌对17种抗生素(氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦、头孢噻肟、头孢他啶、头孢他啶/阿维巴坦、厄他培南、美罗培南、阿奇霉素、链霉素、阿米卡星、四环素、替加环素、氯霉素、萘啶酸、环丙沙星、复方新诺明、多粘菌素E)敏感,均携带bla_(CARB-22)基因。PFGE结果显示,4株菌带型完全一致,同源性为100%。WGS分析结果显示,4株菌属ST3序列型、CC3克隆群,为同一克隆。4株菌均携带大流行株标志基因tdh+、trh-、toxRS/new和orf8。结论 O10:K4型副溶血弧菌可引起食物中毒暴发,其致病性强,有产生耐药性和成为大流行株的可能。应进一步加强监测和分析,加强预防宣传和规范临床用药。

全基因组测序分析北京地区人源结肠弯曲菌基因组特征和耐药性

目的 了解北京地区人源结肠弯曲菌的耐药特征、毒力特征及多位点序列分型等遗传进化关系。方法 对2019-2021年北京市肠道门诊腹泻病例中分离到的36株结肠弯曲菌,采用琼脂稀释法进行抗生素敏感性检测;基于全基因组测序结果分析其耐药基因、毒力基因、多位点序列分型及全基因组单核苷酸多态性(whole genome single nucleotide polymorphisms, wgSNPs)遗传进化分析。结果 36株结肠弯曲菌对萘啶酸和四环素的耐药率为100.0%,对环丙沙星的耐药率为97.2%,对红霉素和阿奇霉素的耐药率为38.9%;36株菌均为多重耐药株,有10种耐药模式。基于全基因组测序结果,36株结肠弯曲菌分为21种ST型,优势克隆群为CC828;携带大环内脂类、喹诺酮类、氨基糖苷类、酰胺醇类、四环素类等多种类型耐药基因;携带6类38种毒力基因。wgSNPs遗传进化分析显示克隆群CC1150与优势克隆群CC828相距较远,处于独立的分枝,CC828克隆群内菌株聚集成3簇,呈现多样性分布。结论 北京市人源结肠弯曲菌分离株耐药严重,多重耐药谱广泛;耐药基因与耐药表型有一定的关联;克隆复合体以CC828为主,具有较高的遗传多样性。

基于高内涵分析技术表征磷酸三苯酯的肺细胞毒性

磷酸三苯酯(triphenyl phosphate,TPhP)是环境中最常见的有机磷酸酯阻燃剂之一,具有较强的挥发性,每天持续摄入TPhP,可能对人体肺部组织产生不利影响。本研究以人源的非小细胞肺癌细胞系(A549)为研究对象,采用高内涵分析系统检测50、100和200μmol·L^(-1) TPhP对细胞核形态、核膜通透性、线粒体纹理结构、线粒体膜电位、细胞内氧自由基水平、磷酸化组蛋白H2AX(phosphorylated histones H2AX,pH2AX)、细胞色素C和细胞凋亡等参数的影响。结果显示,与对照组相比,随着TPhP暴露浓度的增加,A549细胞活性显著下降,细胞核面积增加、核亮度降低和核碎片化程度加剧,核膜通透性增高,细胞核的各参数在200μmol·L^(-1) TPhP组变化最显著;细胞内氧自由基水平的显著升高,进一步导致线粒体损伤和细胞色素C释放,当TPhP为100μmol·L^(-1)时,线粒体损伤程度最严重;当TPhP为100μmol·L^(-1)和200μmol·L^(-1)时,pH2AX含量显著升高,表明DNA受到损伤;100μmol·L^(-1) TPhP主要诱导细胞发生早期凋亡,而200μmol·L^(-1) TPhP诱导细胞发生早期凋亡和晚期凋亡。TPhP对人肺细胞呈现明显的细胞毒性,可引起氧化应激介导的DNA损伤和线粒体损伤,并最终导致人肺细胞发生凋亡。本研究结果为科学评估TPhP对人体健康的危害提供了数据支持和理论依据。

蜡样芽胞杆菌呕吐毒素引发的米面制品食物中毒快速确证方法研究

目的建立快速测定米面制品中蜡样芽胞杆菌呕吐毒素的超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS),为蜡样芽胞杆菌呕吐毒素引起的食物中毒提供应急处置措施。方法单一基质米面样品用乙腈水溶液提取,以盐析分层,离心过膜后直接上机检测;炒米饭、炒面等复杂基质样本用乙腈水溶液提取,经HLB-P小柱净化,采用ACQUITY UPLC Peptide BEH C18300?色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离后于电喷雾正离子模式下,采用多反应监测扫描(multiple reaction monitoring,MRM)进行测定,以溶剂标准曲线法定量。结果蜡样芽胞杆菌呕吐毒素在蒸米饭、馒头、面条等阴性样品中加标水平在0.5、1.0和5.0μg/kg下回收率为87.4%~98.3%,精密度为1.4%~4.2%(n=6)。在炒米饭、炒面等阴性样本中加标水平在1.0、2.0、5.0μg/kg下,回收率为89.5%~99.3%,精密度为1.1%~7.5%(n=6)。目标化合物的检出限为0.2~0.3μg/kg,定量限为0.5~1.0μg/kg。对北京某地引起食物中毒的实际样品进行了检测,中毒样品中蜡样芽胞杆菌呕吐毒素含量为1287~7398μg/kg,2份原料凉面中蜡样芽胞杆菌呕吐毒素含量分别为0.4和9.4μg/kg。结论该方法操作简便、快速,灵敏度和准确度高,实现了蜡样芽胞杆菌引发食物中毒的快速处置。

2022年北京市通州区一起霍乱疫情分离菌株的病原学特征分析

目的分析2022年北京市通州区一起霍乱弧菌引起的疫情的病原学特征,并与引起通州区过往疫情的菌株进行比对分析。方法用实时荧光PCR方法检测样本中O1/O139群霍乱弧菌的特异性基因,同时按常规法对样本进行菌株的分离培养鉴定;用普通PCR方法检测霍乱弧菌的11种毒力基因;用微量肉汤稀释法进行12种药物的敏感性试验,采用NotⅠ限制性内切酶进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)和聚类分析,基于全基因组序列进行菌株遗传学分析。结果本次疫情共检出5株O1群小川型非产毒霍乱弧菌,所有菌株均携带ompU、toxR、tcpI、tcpA^(EL)、hlyA^(EL)、hlyA^(CL)和rtxC基因,不携带ctxAB基因,5株菌耐药情况一致,均为美罗培南–头孢噻肟–头孢他啶–链霉素–氨苄西林–氨苄西林/舒巴坦6种药物耐药,为多重耐药菌株。PFGE分6种带型Ⅰ~Ⅵ,本次疫情菌株带型为Ⅱ型。与通州区既往检出的菌株相比,与2011年2株产毒O1群小川型霍乱弧菌带型较为接近,耐药情况一致,毒力基因携带情况有所差异,但都携带tcpA^(EL)基因。遗传学分析显示本次疫情菌株为不同于第七次世界大流行菌株的新出现的克隆群。结论通州区流行的O1群霍乱菌株以多重耐药小川型非产毒株为主,PFGE带型分散,本次疫情菌株是新出现的克隆群,以后的霍乱防控工作中应重视此类菌株并制定相应的策略。

2020-2021年北京市昌平区诺如病毒急性胃肠炎聚集性疫情流行病学特征

目的 分析2020-2021年北京市昌平区诺如病毒急性胃肠炎聚集性疫情流行特征,为科学制定诺如病毒急性胃肠炎疫情防控措施提供依据。方法 收集2020-2021年北京市昌平区诺如病毒急性胃肠炎聚集性疫情流调和临床资料,用实时荧光PCR方法检测诺如病毒;采用描述性的流行病学方法,分析疫情三间分布等流行病学特征。结果2020-2021年北京市昌平区共报告51起诺如病毒急性胃肠炎聚集性疫情,疫情样本中诺如病毒检出率为20.08%(303/1 509);诺如病毒疫情冬季高发,发生在冬季的疫情占52.94%(27/51),其中12月占50.98%(26/51);城乡结合部的2个镇发生疫情起数最多,占47.06%(24/51),不同地区罹患率差异有统计学意义(χ^(2)=653.553,P<0.05);托幼机构发生疫情起数最多,占58.82%(30/51),不同人群罹患率差异有统计学意义(χ^(2)=797.526,P<0.05);病例最常见的症状是呕吐,占78.61%(305/388),呕吐、腹泻和发热症状在不同人群间差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 城乡结合部和托幼机构更易发生诺如病毒疫情;一年四季均有诺如病毒疫情发生,冬季高发,12月为流行高峰;病例以呕吐为主要临床表现。

超高效液相色谱-串联质谱法测定燕麦粉和小米粉中白僵菌素和恩镰孢菌素

目的建立一种超高效液相色谱-串联质谱法测定谷物性食品燕麦粉和小米粉中白僵菌素(beauvercin,BEA)、恩镰孢菌素A、恩镰孢菌素A_(1)、恩镰孢菌素B和恩镰孢菌素B_(1)残留的分析方法。方法样品采用乙腈-水-甲酸(84:15:1,V:V:V)提取、经过Oasis Prime HLB固相萃取柱净化后,WatersBEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)分离,在正离子模式下,以5 mmol/L乙酸铵水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,在多反应监测模式下进行定性定量检测分析,基质匹配标准曲线外标法定量。结果BEA和4种恩镰孢菌素在各自的线性范围内具有良好的线性关系(r^(2)>0.999),方法检出限为0.02~0.05μg/kg,定量限为0.05~0.15μg/kg。按线性范围的最低浓度、中浓度和最高浓度3个水平进行加标回收实验,燕麦粉和小米粉的平均回收率分别是83.6%~105.2%和88.5%~104.2%,相对标准偏差分别为1.3%~8.2%和1.3%~3.2%(n=6)。对北京市采集的10份燕麦粉和10份小米粉样品进行检测,5种化合物均有不同程度检出,其中,恩镰孢菌素B和恩镰孢菌素B_(1)的检出率为100%。结论本方法简单快速、准确性好、灵敏度高,可以实现对燕麦粉和小米粉中白僵菌素和恩镰孢菌素进行准确的定性定量。