IL-17A基因多态性与儿童鼻咽部肺炎链球菌定植关系的研究

目的了解我国儿童IL-17A基因多态性与鼻咽部肺炎链球菌定植的关系,为预防肺炎链球菌感染提供新的思路。方法对2019年8月至2021年9月就诊于首都儿科研究所附属儿童医院被呼吸科诊断为“喉软骨软化”“气道异物”及泌尿外科诊断为“隐睾”的5岁以下的115例非呼吸道感染儿童进行鼻咽拭子肺炎链球菌检测,并同时进行IL-17A基因2个单核苷酸多态性位点(-197G>A、-737C>T)进行分析及血清IL-17A水平测定。将患儿分为年龄<3岁和3~<5岁两个年龄段,比较分析不同年龄段患儿不同基因型的鼻咽拭子肺炎链球菌带菌率。结果115份鼻咽拭子标本中,共分离到肺炎链球菌24株,总带菌率为20.9%。115例儿童中共有97例进行了IL-17A基因多态性分析,-197G>A、-737C>T位点中不同基因型之间带菌率比较差异无显著性(P>0.05)。在-197G>A位点,A/A基因型中,3~<5岁患儿血清IL-17A水平低于年龄<3岁患儿,差异有显著性(P<0.05);年龄<3岁、3~<5岁患儿中带菌率比较差异无显著性(P>0.05)。在-737C>T位点,C/T基因型中,3~<5岁患儿血清IL-17A水平低于年龄<3岁患儿,差异有显著性(P<0.05);C/T基因型中,3~<5岁患儿带菌率高于年龄<3岁患儿,差异有显著性(P<0.05)。结论-737C>T位点C/T基因型的<3岁儿童鼻咽部肺炎链球菌带菌率低,可能与血清IL-17A水平高有关。

炎琥宁联合干扰素泵吸治疗儿童手足口病的临床疗效观察

目的目的探讨炎琥宁联合干扰素泵吸治疗儿童手足口病的有效性。方法选取首都儿科研究所附属儿童医院门诊确诊并治疗的手足口病患儿55例进行观察,患儿按照数字表法随机分为两组:1治疗组28例:予以炎琥宁(10mg/kg,静点,每日1次),并雾化吸入用重组人干扰素α-1b注射液(2μg/kg,每日1次)。2对照组27例:予以炎琥宁(10mg/kg,静点,每日1次)。患儿分别予治疗后第1、2、3、7天随访。结果显效率:治疗组中为53.6%,对照组为22.2%,两组间差异有显著性。结论炎琥宁联合干扰素泵吸治疗儿童手足口病比可以替代静脉输注炎琥宁。

小剂量氢化可的松对急性肺损伤大鼠血清炎性因子的影响

目的探讨小剂量氢化可的松对大肠杆菌导致的急性肺损伤(ALI)大鼠血清炎性因子的影响。方法Wistar大鼠92只大肠杆菌气管注射制作大鼠肺内源性ALI模型,12 h后存活58只大鼠,随机分为氢化可的松干预组28只(HC组,腹腔注射氢化可的松5 mg/kg)、模型对照组30只(C组,腹腔注射等量9 g/L盐水)。18只健康大鼠为健康对照组(N组,气管注射3 mL/kg 9 g/L盐水,腹腔注射等量9 g/L盐水)。各组分别于给药12、24、36 h三个时间点经气管切开插管机械通气30 min,颈总动脉插管监测其血压、血气。实验结束放血处死动物,取血,4℃4 000 r/min离心10 min分离其血清,测其血清TNF-α、IL-8、IL-10水平。结果1.HC组36 h时间点急性呼吸窘迫综合征(ARDS)发生率与C组比较无明显差异(P>0.05),其余各时间点二组ALI、ARDS的发生率均无统计学差异(Pa>0.05)。HC与C组总死亡率无明显差异(P>0.05)。2.各时间点HC及C组大鼠pa(O2)/FiO2明显低于N组(Pa<0.01),除36 h时间点HC组血压与N组无明显差异(P>0.05),其余各时间点均明显低于N组(Pa<0.01),C组各时间点均明显低于HC组(Pa<0.05)。3.各时间点HC及C组大鼠血清TNF-α、IL-8、IL-10水平均明显高于N组(Pa<0.05),HC组各时间点TNF-α水平均明显低于C组(Pa<0.05)。36 h时间点HC组IL-8水平明显低于C组(P<0.05),12、24 h时间点HC组均低于C组,但无统计学差异(P>0.05)。各时间点HC和C组IL-10水平无统计学差异(Pa>0.05)。结论单次小剂量氢化可的松治疗大肠杆菌导致的大鼠ALI能维持血压稳定,降低血清促炎因子,并对降低ARDS发生率有一定作用。

血清细胞因子和磁共振成像检查在英夫利西单抗治疗非全身型幼年特发性关节炎效果评估中的应用

目的探讨血清细胞因子和磁共振成像(MRI)检查在英夫利西单抗(IFX)治疗非全身型幼年特发性关节炎(JIA)效果评估中的应用价值。方法选取2016年3月至2019年12月于首都儿科研究所住院的非全身型JIA患儿25例,均存在预后不良因素(包括年龄小、反复发作、多关节受累、出现骨质破坏)且常规治疗无效,予IFX治疗5次(第1、2、6、14、22周各静脉注射3~6 mg/kg),同时口服甲氨蝶呤和/或来氟米特。治疗前和用药后6、14、30周行红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素2受体(IL-2R)、白细胞介素6(IL-6)水平检测和美国风湿病学会儿科(ACR Pedi)评分;治疗前选取症状最重的关节行MRI检查,用药后30周对同一关节行相同检查。结果25例患儿中治疗前CRP升高8例(32.0%),ESR增快5例(20.0%);用药后6周CRP、ESR均下降至正常范围,与治疗前比较差异均有统计学意义(均P<0.05);用药后14、30周维持在正常范围,均未进一步下降。25例患儿中治疗前TNF-α升高25例(100.0%),IL-2R升高10例(40.0%),IL-6升高20例(80.0%)。用药后6、14、30周TNF-α均较治疗前升高,IL-2R均较治疗前下降(均P<0.05),IL-6与治疗前比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。MRI结果显示,治疗后滑膜增生、关节积液、骨髓水肿均改善,骨质破坏和关节间隙狭窄均无改善。25例患儿用药后30周ACR Pedi 30、50、70改善率分别为92.0%(23/25)、72.0%(18/25)、60.0%(15/25)。结论IL-2R水平和MRI检查有助于评估IFX治疗非全身型JIA的疗效。

肺内源性急性肺损伤大鼠肾上腺皮质功能的变化和意义

目的探讨大肠杆菌导致的肺内源性急性肺损伤(ALI)模型大鼠肾上腺皮质功能的变化。方法Wistar大鼠气管注射3ml/kg大肠杆菌混悬液[(4.4～5.6)×1012CFU/L],制作大鼠肺内源性ALI/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型,存活大鼠随机分为三组,于滴入大肠杆菌混悬液术后6h(n=10)、24h(n=10)、36h(n=10)3个时间点进行观察。每个时间点各8只大鼠作为对照(NS组,气管注射0.9%盐水3mL/kg)。各组分别于术后6、24、36h3个时间点经气管切开插管机械通气,颈总动脉插管监测其血压、血气,取血,PaO2/FiO2<300mmHg(39.9kPa)为ALI,PaO2/FiO2<200mmHg(26.6kPa)为ARDS,符合上述标准的模型大鼠纳入实验。给予小剂量ACTH作ACTH刺激试验,应用ELISA法测定血清中皮质酮、ACTH含量。结果血浆ACTH水平在模型组大鼠各时间点均高于对照组(P均<0.01),24h达峰值(P<0.01)。模型组6h、24h时间点皮质酮较对照组明显升高(P<0.01,P<0.05),36h模型大鼠皮质酮低于对照组(P<0.05)。模型组6h皮质酮达峰值,高于24h时间点皮质酮水平(P<0.05)。模型组大鼠在ACTH刺激后皮质酮于各时间点上升的幅度均低于对照组(6h,P<0.05;24h、36h,P均<0.01)。结论ALI大鼠早期即可存在肾上腺皮质功能不全(AI),随着病情进展,肾上腺储备功能下降,肾上腺对ACTH反应程度降低,存在AI的大鼠比例增加,通过小剂量ACTH刺激试验可评价ALI大鼠肾上腺皮质功能。

北京地区A组轮状病毒基因型别与临床特点的观察

北京地区Ａ组轮状病毒基因型别与临床特点的观察北京儿童医院（１０００４５）王殿敏，高萍芝，关德华首都儿科研究所免疫中心实验室钱渊婴幼儿秋冬季腹泻的最常见病原为Ａ组轮状病毒，无论在发达国家还是发展中国家都有较高的发病率，也是婴幼儿死亡率极高的疾病之一，因...

曲美他嗪对病毒性心肌炎小鼠的保护作用及其机制

目的:观察曲美他嗪对M株柯萨奇病毒B3(CVB3m)感染的病毒性心肌炎小鼠的保护作用并探讨其可能作用机制。方法:以CVB3m诱导的病毒性心肌炎Balb/c小鼠模型为研究对象。201只清洁级近交系4～6周龄雄性Balb/c小鼠随机分成5组。正常对照小鼠20只(正常组);病毒性心肌炎小鼠55只(心肌炎组);喂养曲美他嗪10 mg/(kg.d)的正常小鼠20只(药物对照组);喂养曲美他嗪10 mg/(kg.d)的病毒性心肌炎小鼠53只(低剂量治疗组);喂养曲美他嗪20 mg/(kg.d)的病毒性心肌炎小鼠53只(高剂量治疗组)。观察各组血清中肌钙蛋白I(cTnI)水平、血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的变化以及心肌组织中Fas mRNA表达水平的变化。结果:小鼠感染CVB3m后第7天及第14天,与正常组及药物对照组比较,心肌炎组、低剂量治疗组和高剂量治疗组血清cTnI水平、MDA含量显著升高,SOD含量显著降低,Fas mRNA的表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。小鼠感染CVB3m后第7天,与心肌炎组比较,低剂量治疗组和高剂量治疗组血清cTnI水平显著降低,MDA含量显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),与心肌炎组及低剂量组比较,高剂量治疗组SOD含量显著升高,Fas mRNA的表达显著减少,差异有统计学意义(P<0.05)。感染CVB3m后第14天,与心肌炎组比较,低剂量治疗组和高剂量治疗组血清cTnI水平、MDA含量显著降低,SOD含量显著升高,Fas mRNA的表达显著减少,差异有统计学意义(P<0.05),与低剂量治疗组比较,高剂量治疗组上述指标变化更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:曲美他嗪能够减少病毒性心肌炎中心肌细胞的损害。其机制可能与其抗氧化作用以及通过下调Fas mRNA水平抑制心肌细胞凋亡有关。

婴幼儿湿疹和特应性皮炎的血清食物特异性IgE检测

为了解食物变应原在婴幼儿湿疹和特应性皮炎(AD)中的比例及作用,采用免疫CAP诊断系统,以荧光酶联免疫技术对581例婴幼儿湿疹和AD患儿进行血清食物特异性IgE(sIgE)检测,并从中随机抽取114例(19.6%)患儿进行血清多价食物变应原筛查(fx5E)及吸入变应原筛查(Phadiatop)的检测并比较。结果:581例患儿中334例血清食物sIgE升高,阳性率57.5%,其中AD患儿的血清食物sIgE阳性率62.7%;湿疹患儿的血清食物sIgE阳性率56.4%,两者之间差异无显著性意义。血清多价食物变应原阳性率57.9%;血清吸入变应原阳性率19.3%,两者比较差异有显著性意义(P<0.01)。在婴幼儿湿疹和AD患儿中食物IgE阳性率比吸入物IgE阳性率更高,变应原IgE的检测对防治婴幼儿湿疹和AD具有重要意义。

柯萨奇病毒与1型糖尿病发病关系的研究进展

柯萨奇病毒感染引发1型糖尿病(T1DM)的发病机制仍不明确,目前比较认可的学说有“分子模拟学说”,认为柯萨奇病毒B组(CVB)的p2C和VP1蛋白与T1DM相关自身抗原存在相同或相似的氨基酸序列,因而CVB感染可能导致针对β细胞产生自身抗体;“旁路激活学说”则认为CVB感染激活了已经存在的自身反应性T细胞,引发自身免疫反应,破坏β细胞。而在一些T1DM患者却检测不到自身抗体,故有一种新的理论认为是CVB感染破坏了胰腺外分泌部而导致β细胞再生障碍。另外,CVB感染与T1DM的发生是否有关现在仍存在争议。该文就CVB感染与T1DM发病关系的研究进展和存在的争议作一综述。

婴幼儿重症百日咳研究进展

百日咳是一种具有高度传染性的呼吸道疾病,尽管疫苗的广泛接种使得百日咳发病大幅度降低,但是近30年来出现了"百日咳再现",局部地区出现了百日咳暴发。未接种或未完成全程免疫接种的婴儿百日咳感染较重。由于小婴儿症状不典型易出现漏诊、误诊,不能及时诊治,易发展为重症百日咳,甚至死亡。因此,现就近年来重症百日咳的相关研究作一综述,为重症百日咳的临床诊治、预防和基础研究提供参考。

原发性高血压儿童血清转化生长因子β_(1)与颈股动脉脉搏波传导速度的关系

目的 探讨原发性高血压儿童血清转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))与颈股动脉脉搏波传导速度(cfPWV)的关系。方法 此研究为横断面研究设计,选取2021年1月至2022年8月住院诊断为原发性高血压且未经治疗的82例患儿为研究对象,男68例(82.9%),女14例(17.1%),选取42名正常血压儿童为对照组。分析临床特征,应用SphygmoCor心血管功能检测仪检测,以cfPWV作为早期动脉僵硬度增加的评估指标。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清TGF-β_(1)水平。采用Spearman相关系数分析血清TGF-β_(1)水平与cfPWV的相关性;采用多因素逐步logistic回归分析早期动脉僵硬度增加的独立危险因素,应用受试者工作特征(ROC)曲线分析各变量诊断早期动脉僵硬度增加的价值。结果 高血压组患儿血清TGF-β_(1)水平明显高于正常血压组[46.1(38.8~49.0)比41.3(30.3~47.1)ng/L,Z=-2.322,P=0.020]。82例原发性高血压患儿中,高血压2级组血清TGF-β_(1)水平较1级组高[46.1(38.8~49.7)比38.8(35.6~46.1)ng/L,Z=-2.424,P=0.015];16例动脉僵硬度增加组患儿体重指数、血清TGF-β_(1)水平较66例动脉弹性正常组高[(31.4±5.1)比(26.3±4.0)kg/m^(2),t=-4.382,P<0.001;48.8(46.1~55.1)比46.0(38.8~48.1)ng/L,Z=-3.189,P=0.001]。Spearman相关性分析显示,体重指数、心率、舒张压、24 h平均舒张压(24hDBP)、24 h平均动脉压(24hMAP)、TGF-β_(1)与cfPWV呈正相关(r_(s)=0.318,P=0.004;r_(s)=0.239,P=0.031;r_(s)=0.244,P=0.027;r_(s)=0.294,P=0.007;r_(s)=0.267,P=0.015;rs=0.482,P<0.001)。多因素逐步logistic回归分析结果显示,体重指数(OR=1.260,95%CI 1.041~1.525)和TGF-β_(1)(OR=1.149,95%CI 1.013~1.305)是早期动脉僵硬度增加的危险因素。ROC曲线分析显示,联合体重指数、TGF-β_(1)诊断早期动脉僵硬度增加的曲线下面积为0.887(95%CI 0.805~0.970,P<0.001),灵敏度和特异度分别为81.3%和80.3%。结论 血清TGF-β_(1)与cfPWV呈正相关,体重指数、TGF-β_(1)是早期动脉僵硬度增加的独立危险因素,联合体重指数、TGF-β_(1)对原发性高血压儿童早期动脉僵硬度增加具有一定的诊断价值。

脓毒症幼猪连续性静脉-静脉血液滤过中血清皮质醇及炎性介质水平的变化

目的观察脓毒症幼猪连续静脉-静脉血液滤过(CVVH)中血清皮质醇、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、IL-6、IL-10水平的动态变化。方法 12头健康雄性幼猪静脉内注入0.3 mL.kg-1(5×1012CFU.L-1)大肠杆菌,注菌后0.5 h随机分为滤过组和对照组,每组各6头。采用ELISA法检测2组注菌前、治疗后2 h、4 h、6 h、8 h血清皮质醇和MIF、IL-6、IL-10水平。结果对照组注射后血清皮质醇水平升高,4 h达到峰值,后逐渐下降,8 h低于滤过组及注菌前基础值(Pa<0.05)。滤过组血清皮质醇水平各时间点无明显变化,2 h、4 h、6 h明显低于对照组。对照组注菌后血清MIF水平升高,2 h达峰值。滤过组MIF水平注菌前较基础值升高,2 h达峰值,但低于对照组峰值,滤过组、对照组注菌后各时间点MIF水平均高于基础值,且滤过组低于对照组(Pa<0.01,0.05)。滤过组MIF/皮质醇比值治疗后4 h、6 h、8 h均低于对照组(Pa<0.01,0.05)。对照组注菌后IL-6水平升高,4 h达到峰值,后仍保持较高水平。滤过组IL-6水平4 h达峰值,之后IL-6水平降低较明显。滤过组、对照组注菌后各时间点IL-6水平均高于基础值,且滤过组低于对照组(Pa<0.01,0.05)。对照组注菌后血清IL-10水平持续升高。滤过组IL-10水平增高,2 h达峰值,之后逐渐下降。对照组注菌后各时间点IL-10水平均高于注菌前基础值,滤过组注菌后2 h、4 h、6 h IL-10水平高于基础值,且滤过组低于对照组(Pa<0.05)。结论 CVVH可明显降低脓毒症幼猪血清皮质醇、MIF、IL-6、IL-10水平,下调MIF/皮质醇比值,CVVH可能是临床治疗脓毒症的一种有效手段。

原发性高血压患儿血浆成纤维细胞生长因子23与亚临床心血管损伤的关系

目的探讨原发性高血压儿童血浆成纤维细胞生长因子23(FGF-23)水平与亚临床心血管损伤的关系及其诊断预测价值。方法前瞻性研究。以2016年10月至2017年12月在首都儿科研究所附属儿童医院被诊断为原发性高血压且未经治疗的77例患儿为研究对象,男61例、女16例,年龄(11.8±2.2)岁,应用彩色多普勒超声及超声心动图检测,以颈动脉内膜-中层厚度(cIMT)和左心室肥厚(LVH)作为亚临床心血管损伤的评估指标,将研究对象分为cIMT增厚组(18例)和cIMT正常组(46例)(64例患儿cIMT资料完整);LVH组(27例)和正常构型组(50例)。应用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血浆FGF-23水平。采用Mann-WhitneyU检验比较各组血浆FGF-23水平;采用Kendall′s tau-b相关系数分析血浆FGF-23与cIMT及LVH的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆FGF-23对亚临床心血管损伤的诊断预测价值。结果18例cIMT增厚组患儿血浆FGF-23水平较46例cIMT正常组高[55.6(46.2,63.5)比48.6(39.4,57.3)×10^3 RU/L,Z=-2.143,P=0.032],FGF-23与cIMT正相关(r=0.222,P=0.032);ROC曲线显示血浆FGF-23为53.9×10^3 RU/L时,诊断cIMT的灵敏度和特异度分别为55.6%和71.7%。27例LVH组患儿血浆FGF-23水平高于50例正常构型组[55.0(46.8,65.7)比48.2(39.5,56.0)×10^3 RU/L,Z=-2.375,P=0.018],FGF-23与LVH正相关(r=0.224,P=0.018)。向心性重塑者(10例)血浆FGF-23水平显著高于正常构型者[56.9(49.6,66.3)比48.2(39.5,56.0)×10^3 RU/L,Z=-2.093,P=0.036]。ROC曲线显示血浆FGF-23为49.1×10^3 RU/L时,诊断LVH的灵敏度和特异度分别为70.4%和60.0%。结论血浆FGF-23水平与LVH及cIMT增厚正相关,并对其具有一定的诊断预测价值。

自身免疫性疾病患儿CD4^+CD_(25)^+调节性T细胞的变化

目的通过检测外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Treg),了解自身免疫病患儿Treg细胞的变化,以期更好的为临床诊断和治疗提供依据。方法收集2007年11月-2008年6月本院风湿免疫科诊断为自身免疫性疾病患儿93例。本院同期门诊体检健康儿童35例作为健康对照。对发病人数在前3位的类风湿性关节炎(JRA,22例)、SLE(12例)和过敏性紫癜(HSP,12例)分别与健康对照组进行比较。采用流式细胞术检测2组儿童外周血CD4+CD25+T淋巴细胞和CD4+T淋巴细胞,计算CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞百分数。应用SPSS 11.5统计软件对数据进行独立样本t检验。结果1.自身免疫性疾病患儿组CD4+CD25+Treg细胞/CD4+T淋巴细胞、CD4+CD25+T淋巴细胞分别为(21.85±11.68)%、(6.14±3.21)%,健康对照组为(12.83±3.61)%、(3.68±1.02)%,2组比较前者显著高于后者(Pa<0.05)。2.JRA患儿CD4+CD25+Treg细胞/CD4+T淋巴细胞、CD4+CD25+T淋巴细胞分别为(19.49±8.60)%、(6.22±3.11)%,SLE患儿为(31.04±17.38)%、(7.38±4.09)%,HSP患儿为(19.0±9.33)%、(5.80±2.44)%,均显著高于健康对照组(Pa<0.05)。结论自身免疫性疾病患儿CD4+CD25+Treg细胞显著升高,其可能参与了自身免疫性疾病的病理过程。

北京市三家妇幼保健院产妇及脐带血百日咳抗体水平调查

目的了解北京市产妇及初生新生儿血清百日咳抗体水平,为今后开展针对性干预工作提供指导.方法选取2016年12月至2017年3月北京市朝阳区、门头沟区、大兴区妇幼保健院收治的产妇及其分娩的新生儿为研究对象进行前瞻性研究,采集产妇分娩前或分娩时静脉血、新生儿生后即刻脐带血各3 ml,采用酶联免疫吸附试验法分别检测百日咳杆菌IgG抗体(pertussis bacillus IgG antibody,PER-IgG)及百日咳毒素IgG抗体(pertussis toxin IgG antibody,PT-IgG)滴度,应用χ^2检验比较3家妇幼保健院产妇静脉血和新生儿脐带血百日咳抗体水平及阳性率,对各医院配对的产妇静脉血及新生儿脐带血抗体水平进行相关分析.采用问卷调查方法收集研究对象的信息、包括百日咳患者接触史、孕前3个月至孕期咳嗽病史及百日咳疫苗接种史.结果总计收集612例产妇静脉血及其新生儿脐带血标本,其中4例产妇分娩双胎,故母血612份,脐带血616份.612例产妇孕期均无诊断百日咳病史.616份脐带血标本中,PER-IgG阳性率13.3%(82/616),PT-IgG阳性率0.5%(3/616).612份产妇静脉血标本中,PER-IgG阳性率7.7%(47/612),PT-IgG阳性率0.3%(2/612).产妇PER-IgG及PT-IgG阳性率与居住地点不相关(P值分别为0.676和0.544);产妇静脉血PER-IgG滴度与新生儿脐带血PER-IgG滴度成正相关(r=0.842,P<0.001),产妇静脉血PT-IgG滴度与新生儿脐带血PT-IgG滴度成正相关(r=0.619,P<0.001).结论北京市产妇和新生儿百日咳抗体水平及百日咳抗体阳性率均较低,产妇静脉血与新生儿脐带血百日咳抗体水平正相关,多数产妇及新生儿无百日咳免疫保护抗体.

叶酸缺乏对小鼠胚胎干细胞增殖和凋亡影响

目的探讨叶酸缺乏对小鼠胚胎干细胞增殖和凋亡的影响。方法小鼠胚胎干细胞分别置于完全培养基和无叶酸培养基中(对照组与无叶酸组)培养四天;采用CCK-8法检测叶酸对小鼠胚胎干细胞增殖能力的影响;流式细胞学方法检测细胞凋亡及周期变化情况;实时荧光定量PCR法和免疫印记法检测Caspase-3表达变化情况。结果①与对照组相比,小鼠胚胎干细胞无叶酸培养72h后增殖能力明显下降(P<0.01),凋亡率明显增加(P<0.01),细胞周期在G0/G1期阻滞;②Caspase-3在mRNA和蛋白水平表达均显著上调。结论叶酸缺乏可抑制小鼠胚胎干细胞增殖,其机制可能与叶酸缺乏诱导的细胞周期特异性凋亡相关。

脓毒症患儿外周血中ATPase相关基因及关联长链非编码RNA的差异表达

目的筛选和验证脓毒症患儿外周血中差异表达的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNAs),探讨其在儿童脓毒症发病机制中的作用。方法选取2016年1月至12月在首都儿科研究所附属儿童医院ICU进行救治的3例脓毒症患儿和3例健康儿童的外周血标本,通过lncRNA测序技术筛选出差异表达的lncRNAs和mRNAs;对差异表达的lncRNAs进行靶基因预测,并根据GO分析结果选出与线粒体ATP合酶(F1FO-ATPase)活性相关的lncRNA-mRNA关系对;进一步扩大样本量,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)技术对筛选结果中F1FO-ATPase活性相关的部分mRNAs及lncRNAs进行验证。结果测序结果显示,与健康儿童相比,脓毒症患儿外周血中差异表达的lncRNAs共252个(86个表达上调,166个表达下调),差异表达的mRNAs共2652个(955个表达上调,1697个表达下调);qRT-PCR验证结果显示:lncRNA ENST00000621933.1、ENST00000616950.1、ENST00000595748.1在脓毒症患儿中表达升高(P<0.05),MT-ATP8、ATP5E以及lncRNA ENST00000624705.1和ENST00000615535.1在脓毒症患儿中表达降低(P<0.05),与测序结果一致。结论脓毒症患儿外周血中存在差异表达的lncRNAs,以MT-ATP8及ATP5E作为靶基因的lncRNA ENST00000621933.1、ENST00000616950.1、ENST00000595748.1、ENST00000624705.1和ENST00000615535.1的表达水平可能与儿童脓毒症的发生发展有关。

高分子聚合物逆转/减轻血浆诱导的肺表面活性物质失活的机制

目的探讨高分子聚合物是否能逆转或减轻血浆诱导的肺表面活性物质（PS）失活。方法应用闭泡式表面张力仪分别测定高分子聚合物葡聚糖（Dextran）、聚乙二醇（PEG）和透明质酸（HA）、PS及加入了1%~3%血浆的混合物的最大表面张力（γmax）和最小表面张力（γmin）,并计算其稳定系数（S.I.）。结果不同的高分子聚合物、血浆及其混合物的γmin均大于10 mN-m,S.I.小于0.8。PS（0.84 g·L-1）的γmin及S.I.分别是（1.78±0.03）mN-m和1.71±0.01。当PS与1%、2%、3%血浆混合后,其混合物的γmin分别上升为（21.96±0.15）mN-m,（22.31±0.34）mN-m和（28.02±1.36）mN-m;S.I.下降为0.14±0.03,0.12±0.01和0·36±0·03;再加入5%PEG,5%Dextran或0.25%HA后,其γmin分别下降为（1.60±0.04）mN-m,（1.35±0.06）mN-m,（18.66±0·73）mN-m;（1.13±0.01）mN-m,（1.28±0.01）mN-m,（16.68±0.31）mN-m和（1.16±0.01）mN-m,（1.22±0.01）mN-m,（1.23±0·01）mN-m。S.I.分别为1.76±0.01,1.77±0.01,0.31±0.03;1.82±0.01,1.80±0.00,0.46±0.03和1.82±0.01,1.81±0.00,1.81±0.01。PEG（0%、2.5%、5.0%、10.0%）＋PS＋血浆（2%）组γmin分别为（22.32±0.34）mN-m,（1.09±0.01）mN-m,（1.35±0.06）mN-m,（0.96±0.02）mN-m;Dextran（0%、2.5%、5.0%、10.0%）＋PS＋血浆组γmin分别为（22.32±0.34）mN-m,（2.03±0·04）mN-m,（1.28±0.01）mN-m,（1.10±0.09）mN-m;HA（0%、0.125%、0.250%、0.500%）＋PS＋血浆组γmin分别为（22.32±0·34）mN-m,（9.60±0.20）mN-m,（1.22±0.01）mN-m,（0.92±0.01）mN-m。结论在体外实验中,国产PS具有很好的表面活性;高分子聚合物（PEG、Dextran、HA）可以逆转血浆引起的PS失活;与PEG和Dextran比较,HA和PS混合,对抗血浆引起的PS失活效果更好。

原发性高血压儿童降压治疗前后外周血循环内皮细胞和内皮祖细胞水平的变化

目的探讨原发性高血压儿童外周血循环内皮细胞(CEC)和内皮祖细胞(EPC)在血压控制前后的动态变化,以揭示血压动态变化对血管内皮损伤和修复的影响。方法采用前瞻性研究,以2019年6月至2020年2月在首都儿科研究所附属儿童医院诊断为原发性高血压且未经治疗的患儿57例(男44例、女13例)为高血压组,年龄(13.3±1.2)岁;同时纳入在门诊体检的健康儿童30名(男19名,女11名)作为对照组,年龄(13.0±1.1)岁。应用流式细胞仪测定外周血CEC和EPC的数量,经过3个月系统化治疗后,再次测定外周血CEC和EPC的数量。结果治疗前,高血压组儿童外周血CEC数量高于对照组[55.0(32.5~104.0)/μL比21.0(14.0~25.3)/μL,Z=-6.199,P<0.001];外周血EPC数量低于对照组[3.0(1.5~4.5)/μL比17.5(13.8~30.0)/μL,Z=-6.859,P<0.001]。与高血压组治疗前相比,高血压组治疗后收缩压水平下降[(123.2±5.2)比(137.7±8.9)mm Hg,t=17.666,P<0.001];舒张压水平下降[(70.5±4.4)比(80.0±6.4)mm Hg,t=14.740,P<0.001];外周血CEC数量减少[29.0(13.0~46.5)/μL比55.0(32.5~104.0)/μL,Z=-6.567,P<0.001];外周血EPC数量增高[9.0(5.0~18.0)/μL比3.0(1.5~4.5)/μL,Z=-6.515,P<0.001]。Spearman相关性分析显示,治疗前,收缩压与外周血CEC呈正相关(r;=0.583,P<0.001),与外周血EPC呈负相关(r;=-0.384,P=0.030)。多元线性回归分析显示,收缩压是外周血CEC和EPC的主要影响因素。结论原发性高血压患儿存在CEC升高和EPC降低的情况。治疗前外周血CEC和EPC水平与收缩压水平相关,收缩压是外周血CEC和EPC的危险因素。在有效抗高血压治疗后,外周血CEC和EPC有明显改变。