用无菌小猪模型研究轮状病毒腹泻

实验无菌小猪作为轮状病毒 ( RV)腹泻研究模型 ,具有很多优点。建立起该腹泻模型 ,可以研究人轮状病毒的体内感染、RV致病机理、毒力和宿主限制性相关基因 ,评价不同种类疫苗的保护作用以及确定保护作用相关因素等 ,对 RV腹泻的防治有重要指导作用。

北京地区2株人偏肺病毒的P和M蛋白基因序列分析

目的 进一步了解北京地区人偏肺病毒 (hMPV)编码基因的特征。方法 从分属于hMPV的两个不同基因进化簇 (即基因型 )的 2份临床标本BJ1816和BJ1887中扩增P和M全基因 ,克隆至pBS T载体中并进行测序 ,与GenBank中的hMPV的基因序列进行比较分析和种系进化分析。结果 经扩增BJ1816和BJ1887的P基因全长为 885个核苷酸 ,编码 2 94个氨基酸 ;M基因全长 76 5个核苷酸 ,编码 2 5 4个氨基酸。BJ1816和BJ1887的P和M蛋白基因与同一基因簇内的hMPV有相当高的氨基酸同源性 (91.9%～ 10 0 % )。BJ1816和BJ1887间P基因的氨基酸同源性仅为 85 .8% ,而M基因的氨基酸同源性为 96 .9%。结论 BJ1816和BJ1887的P和M蛋白基因特征与其他国外文献中所报道的hMPV相似 ,不同型的hMPV的P基因之间比M基因显示了更强的基因多样性。

用逆转录-聚合酶链反应鉴别甲型和乙型流感病毒感染

目的 建立快速、特异、有效的鉴别甲、乙型流感病毒的方法。方法 根据编码甲、乙型流感病毒膜蛋白M基因的核苷酸序列设计两对引物 ,将这两对引物用于同一逆转录 聚合酶链反应(RT PCR) ,甲、乙型毒株的扩增产物分别为 5 0 6bp和 2 40bp ,根据这些产物在 1.2 %的琼脂糖凝胶电泳上的大小 ,即可鉴别所测毒株的型别。结果 用这一方法对我国 2 4株甲型和 5株乙型流感病毒分离株进行型别鉴定 ,分型结果与血凝抑制试验和核苷酸测定结果完全相符。结论 用上述根据M基因序列设计的RT PCR方法鉴别甲、乙型流感病毒具有快速、简便、特异等特点 ,适用于流感病毒型别鉴定 。

2004年北京婴幼儿中甲3型流感病毒血凝素基因特性对其抗原性改变的提示

目的了解2004年流感流行季节(2004年8月—2005年4月)北京地区婴幼儿急性呼吸道感染患儿中分离到的甲3型流感病毒是否存在抗原性的改变以及其变异程度。方法提取1株于2004年3月和32株于2004年流感流行季节从北京地区急性呼吸道感染患儿中分离到的甲3型流感病毒的病毒RNA,经RT-PCR扩增得到HA1区基因片段并进行核苷酸序列测定,使用生物信息软件分析HA1区基因序列。结果所测定的血凝素HA1区基因均为987bp,编码一个含329个氨基酸的蛋白质。将33株甲3型流感病毒流行株的血凝素(HA1)氨基酸序列与近年WHO推荐的参考疫苗株比较,我们发现一致的多处位点的氨基酸突变,而且突变位点涉及2个抗原决定簇(A、B)和受体结合部位。而2004年3月分离到的毒株在进化分析和氨基酸变异上均不同于2004年流行季节的毒株。结论对血凝素基因HA1区的序列分析结果提示2004—2005年流行季节的甲3型流感病毒较春季的流行株和2004年疫苗株出现了较大的漂移,提示其抗原性可能出现了改变。这种变异对于病毒抗原性的影响以及对于疫苗效果评价的意义值得密切关注。