北京儿童中发现人感染禽流感病毒H9N2病例一例

患儿男，3岁8月龄。因发热、咳嗽2d就诊。患儿于2016年12月10日起发热，体温39．9℃，咳嗽，12月12日在首都儿科研究所附属儿童医院急诊就诊。作为流感样病例（ILI）的流感病毒常规监测，采集了患儿咽拭子标本，实验室应用实时荧光反转录－PCR，对患儿标本进行了流感病毒核酸检测。

人鼻病毒感染与儿童哮喘的关系研究进展

已有研究表明儿童早期由某些病毒感染引起的喘息发作是随后哮喘性疾病的独立危险因素。人鼻病毒（human rhinovirus，HRV）作为人类呼吸道感染最常见的病毒病原体之一，在儿童急性喘息性疾病中发挥重要作用，其中尤以HRV—C感染的作用更为显著。该文就近年国内外对HRV感染与哮喘发作或加重的关系及可能的潜在机制进行综述。对于HRV感染与哮喘之间的关系的进一步了解将有助于儿童哮喘新防治策略的形成。

2013至2014年北京手足口病流行季相关肠道病毒型别变化和分析

目的分析北京2013至2014年手足口病流行期间肠道病毒的型别、流行趋势和临床特点，为手足口病的防治提供科学依据。方法2013年4至9月和2014年3至10月，首都儿科研究所附属儿童医院感染门诊就诊患儿的咽拭子标本共977份，其中2013年初步诊断手足口病患儿标本147份；2014年初步诊断手足口病患儿标本343例，不典型手足口病患儿标本201份，疱疹性咽峡炎患儿标本83份，发热伴抽搐患儿标本25份，发热伴出疹患儿标本64份，皮疹待查患儿标本114份。采用实时荧光逆转录聚合酶链反应方法检测肠道病毒（EV）通用型，肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CA16）；采用巢式PCR方法对EV通用型阳性而非EV71和CA16的标本核酸进行VP1片段的扩增和测序分析以鉴定型别。分别比较不同年龄组、不同年份间肠道病毒的检出情况，分析其在两个年份的流行趋势。结果977份标本总阳性率为80．1％（783／977），其中CA16为25．6％（250／977），EV71为18．9％（185／977），CA6为20．0％（195／977），CA10为5．0％（49／977），CA4为1．5％（15／977），其他EV为9．1％（89／977），阴性19．9％（194／977）。2013年和2014年检出的各型别地方株同型间均具有较高的同源性，CA6的同源性为94．3％～100％，CA10的同源性为93．8％～99．1％，CA4的同源性为92．7％～99．8％。≤1岁年龄患儿肠道病毒总阳性率为71．1％（106／149），低于其他年龄组（P均〈0．05），但与〉5岁组相近（χ2=1．181，P=0．277）。2013年147例手足口病患儿标本中肠道病毒阳性率为85．7％（126／147），CA6为优势型别占54．8％（69／126），其次是CA16和EV71，分别为20．6％（26／126）和11．9％（15／126）。2014年343例手足口病患儿标本中肠道病毒阳性率为85．4％（293／343），CA16和EV71成为主要型别，分别占42．7％（125／293）和38．2％（112／293），而CA6仅占11．3％（33／293）。2014年不典型手足口病、疱疹性咽峡炎、发热伴抽搐、发热伴出疹和皮疹待查患儿标本的肠道病毒阳性率分别为83．6％（168／201），80．7％（67／83），76．0％（19／25），64．1％（41／64）和60．5％（69／114）。各型肠道病毒的流行高峰主要集中在5至8月份，而每年各型肠道病毒的流行趋势却没有明显的规律。结论北京地区引发儿童手足VI病的肠道病毒，2013年CA6占据第一，2014年CA16和EV71再次成为主要型别；CA6、CA10和CA4等型别肠道病毒引发的临床症状与EV71和CA16引发的临床症状可能存在差异；除EV71和CA16外，也需要重视对CA6、CA10和CA4等其他型别肠道病毒的监测和研究。

北京婴幼儿腹泻中G1、G3型轮状病毒VP7基因分子进化动态分析

北京儿童腹泻中G1和G3型轮状病毒(Rotavirus,RV)的流行随时间动态变化。鉴于G1和G3型RV在疫苗研发设计中的重要地位,本研究依据前期对2007～2017北京腹泻就诊患儿中RV流行的监测结果,分别选取G1(15例)和G3(18例)型RV标本,应用DNAStar、MEGA 6.0和BEAST软件包及Datamonkey在线工具,分析和预测11年来其主要中和抗原VP7基因的分子进化动态。结果显示G1和G3型RV同近年世界各地的各自主要流行株之间的进化距离近,相比同一进化树分支内参考株的VP7基因并没有表现出特有的氨基酸变异,提示并未有特别的基因变异直接改变北京G1和G3型RV的流行。本研究中北京G1和G3型RV最近共同祖先株形成时间分别约为2005年和1996年,其VP7基因平均进化速率分别为2.29×10^(-3)和5.11×10^(-4)氨基酸替换·位点^(-1)·年^(-1)。尽管G1型的变异速率大于G3型,但有意思的是它们均无正向选择变异位点。群体流行历史(Bayesian skyline plot,BSP)分析显示人群中G1和G3型RV的感染水平呈现缓慢下降,并均在2010年前后出现了跳跃式下降,随后有所上升并维持在较平稳的感染水平,基本符合北京腹泻儿童中RV流行趋势监测,据此推测群体免疫压力可能是影响G1和G3型RV的流行分布随时间动态变化的原因。分子分析结果还显示本研究中G1和G3型RV和相应型别疫苗株之间的进化距离远,且均在主要抗原区存在变异,这些是否对疫苗应用效果产生影响仍需要对RV的流行进行持续监测。

儿童呼吸道病毒感染的病原诊断现状与挑战

呼吸道感染是儿科最常见的疾病之一,临床表现多样,严重者可致死亡。病毒是最常见的致病原之一,尤其对于小婴儿。敏感、特异、快速的病原诊断是正确诊治的重要保证。近年来,新的病毒病原诊断方法不断涌现,该文就各种诊断技术和方法的优缺点和临床实际应用价值做一阐述。

基于症候群检测在感染性疾病实验室病原诊断中的应用

急性感染性疾病仍然是儿科最常见的疾病。准确和及时地作出病原学诊断对于帮助这类疾病的有效治疗至关重要。基于症候群检测的多重核酸分子检测技术是指使用单一实验同时检测多种可造成相似症状的病原的检测方法。因其敏感性、特异性高并且快速高效在近几年被迅速广泛用于呼吸道、消化道、血流、中枢神经系统及关节感染的实验室病原快速诊断。

北京地区急性呼吸道感染住院患儿腺病毒感染临床特征

目的比较北京地区急性呼吸道感染住院患儿中不同型别腺病毒感染临床特征,明确腺病毒分型的临床必要性。方法采用横断面研究,纳入2017年11月至2019年10月在首都儿科研究所附属儿童医院因急性呼吸道感染住院的9022例次患儿呼吸道标本,经直接免疫荧光(DFA)和(或)核酸检测确定为腺病毒阳性者进行五邻体、六邻体及纤维蛋白基因扩增并测序,构建系统进化树区分腺病毒型别。收集并分析腺病毒主要型别感染患儿的实验室检查、影像学资料等临床资料,采用t检验、U检验、χ^(2)检验进行型别间临床特征差异的统计学分析。结果9022例次急性呼吸道感染住院患儿中腺病毒阳性检出率为4.34%(392例次),成功分型205例,其中男131例、女74例,年龄22.6(6.7,52.5)月龄,3型腺病毒阳性102例(49.76%),7型86例(41.95%),1、2、4、6、14、21型共17例。7型与3型腺病毒感染患儿临床特征比较,在出现喘息[10例(11.63%)比25例(24.51%)]、白细胞计数>15×10^(9)/L[4例(4.65%)比14例(13.73%)]、白细胞计数<5×10^(9)/L[26例(30.23%)比11例(10.78%)]、降钙素原水平>0.5 mg/L[43例(50.00%)比29例(28.43%)]、多肺叶浸润[45例(52.33%)比38例(37.25%)]、胸腔积液[23例(26.74%)比10例(9.80%)]、危重症腺病毒肺炎[7例(8.14%)比2例(1.96%)]比例方面,差异均有统计学意义(χ^(2)=5.11、4.44、11.16、9.19、4.30、9.25、3.91,P=0.024、0.035、0.001、0.002、0.038、0.002、0.048);住院时间差异也有统计学意义[11(8,15)比7(5,13)d,Z=3.73,P<0.001]。结论北京地区急性呼吸道感染住院患儿中腺病毒感染以3、7型为主要型别。与3型感染比较,7型感染炎症反应更明显,肺部症状更重,住院时间更长,区分腺病毒型别具有临床必要性。

肠道病毒基因重组研究进展

肠道病毒(enterovirus, EV)可引起多种感染性疾病, 临床表现复杂多样。作为RNA病毒, EV的RNA依赖的RNA聚合酶缺乏校对功能, 导致其基因发生高频率的突变和重组, 从而使EV获得进化优势, 进而发生对宿主的免疫逃逸、对抗病毒药物的抗性, 也可使病毒的传播力和致病性增强或组织嗜性发生改变。本文综述了EV的重组机制, 并对部分重要型别和新型别EV的重组情况以及重组对病毒流行、致病性的影响进行了概述。

一株与儿童腹泻相关的跨多种属的基因重配G3P[3]型轮状病毒

G3P[3]型别多见于猫/狗A组轮状病毒(Group A rotavirus,RVA)。本研究前期工作中从广西农村一名腹泻儿童粪便标本中检测到1例在人的感染中少见的G3P[3]型RVA(命名M2-102),但经初步基因分析提示其VP7和VP4基因均同猫/狗G3P[3]RVAs进化距离远。为了解M2-102的种属来源,本研究对其全基因组11条基因进行了RT-PCR扩增、测序和序列分析。使用RotaC分型工具对所获得的M2-102全基因组基因序列进行分型。结果显示RVA/Human-wt/CHN/M2-102/2014/G3P[3]具有G3-P[3]-I3-R3-C3-M3-A9-N3-T3-E3-H6基因组型。序列分析进一步显示M2-102基因组中有5条基因(VP7、VP1、VP2、NSP2和NSP3)同云南蝙蝠MYAS33株亲缘关系近,处于相同的进化树支;另有5条基因(VP4、VP3、NSP1、NSP4和NSP5)同猿猴RRV株进化距离近,位于相同的进化树支;仅有1条基因VP6同人AU-1样RVAs处在相同进化树支,并具有较高核苷酸同源性。推测M2-102是一例由人AU-1样病毒同蝙蝠株MYAS33及猿猴株RRV类似病毒经基因重配而产生的多种属来源的重配毒株。

人呼吸道合胞病毒快速抗原检测方法的床旁检测适用性探讨

目的探讨呼吸道合胞病毒（RSV）快速抗原检测方法的临床实用性，为临床选择床旁检测方法提供依据。方法收集2015年1月5日至2月7日首都儿科研究所附属儿童医院临床疑为病毒感染的急性呼吸道感染（ARI）住院患儿呼吸道标本209份，其中包括咽拭子标本78份、鼻咽分泌物标本131份。应用免疫层析方法，对上述标本进行RSV快速抗原检测，应用转录（1iT）-巢式PCR进行RSV核酸检测。对其中的鼻咽分泌物标本，同时应用直接免疫荧光进行RSV抗原检测。统计学分析快速抗原检测方法的灵敏度、特异度及与对照方法间的一致性。结果RSV快速抗原检测方法与直接免疫荧光相比较，在鼻咽分泌物检测中特异度为97．3％，灵敏度为83．9％，两种方法的一致性检验Kappa=0．86；X^2=73．9561，P〈0．01；与RT-巢式PCR相比较，特异度在鼻咽分泌物中为100．0％，咽拭子中为92．0％，灵敏度在鼻咽分泌物中为74．2％，咽拭子中为77．8％，两种方法的一致性检验在鼻咽分泌物中Kappa=0．74，X^2=73．9561，P〈0．01，在咽拭子中Kappa=0．62，X^2=25．2478，P〈0．01。采用RSV快速抗原和RT-巢式PCR检测，咽拭子标本的RSV阳性检出率（21．7％、7．3％）均明显低于鼻咽分泌物标本（78．3％、78．0％）。RSV快速抗原检测方法可床旁、手工操作，整体操作所需时间约为10min。结论RSV快速抗原检测方法与直接免疫荧光及RT-巢式PCR方法相比较，有很好的灵敏度与特异度，RSV快速抗原检测为RSV阳性的标本可确定为阳性，但阴性结果需要进一步经直接免疫荧光及RT-巢式PCR方法确证；对临床诊断为急性呼吸道感染的儿童进行RSV检测时更适合用鼻咽分泌物标本；RSV快速抗原检测方法具有快速、高效、操作方便等特点，适合于床旁检测。

柯萨奇病毒A6手足口病在不同年龄组的临床特征分析

目的回顾性分析柯萨奇病毒A组6型(coxsackievirus A6,CV-A6)感染在不同年龄组手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)的临床特点。方法对2015年1月—2017年12月疑似或临床诊断为HFMD的患儿留取咽拭子标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)方法检测标本中肠道病毒核酸,将CV-A6阳性病例按年龄进行分组比较。结果467例CV-A6阳性HFMD病例,年龄3月~16岁,婴幼儿组(≤3岁)273例,学龄前期组(3~6岁)131例,学龄期组(>6岁)63例,5~11月份为发病高峰;发热为常见症状,其中婴幼儿组发热发生率最高(220/273,80.5%);婴幼儿组白细胞升高比例最高(127/273,46.5%),高于学龄期组(17/63,27.0%),组间比较存在统计学意义;CV-A6所致HFMD皮疹形态多样,婴幼儿组皮疹多形性比例最高(163/273,59.7%);学龄期组分布部位数最少(0.89±0.86);婴幼儿组肘关节(109/273,39.9%)、膝部(88/273,32.6%)、大腿(112/273,41%)、臀部(122/273,44.7%)皮疹发生率高于其他两组,学龄期组前臂(0/63,0%)、足心(41/63,65.1%)、小腿(0/63,0%)、大腿(6/63,9.5%)皮疹发生率低于其他两组,组间比较差异均存在统计学意义;全部病例均临床痊愈,无重症病例发生,发病6个月后共有288例接受随访,其中33例发生甲脱落(33/288,11.5%)。结论不同年龄组CV-A6所致HFMD临床表现存在差异,婴幼儿组更常出现发热症状,皮疹分布范围更广,皮疹形态更具多形性,血常规白细胞升高更为多见。

一起旅游团中急性胃肠炎的暴发与GII. 17型诺如病毒相关

为了解2016年夏季一起发生在某赴内蒙古旅游团游客中的急性胃肠炎暴发流行的病毒病原。分别采集此次胃肠炎暴发流行中两名患病游客腹泻症状发生后第3天、5天和7天的粪便标本,提取核酸后首先用荧光定量PCR扩增诺如病毒核酸进行检测,阳性标本分别用RT-PCR扩增病毒VP1基因和RdRp区域基因,通过基因测序和序列比对进行基因分型,构建进化树确定进化同源性。通过荧光定量PCR法检测到两名患者的粪便标本均为诺如病毒阳性,提示此次胃肠炎暴发流行的病原为诺如病毒,进一步的RT-PCR扩增病毒基因分析显示检测到的诺如病毒为GII.P17-GII.G17型;构建系统进化树分析显示本次与2014~2015年度广州、中国香港、中国台湾和日本等地的病毒亲缘关系更为接近;氨基酸序列分析显示该基因型与2014年以来流行的毒株同源性较近,与2014年之前流行的毒株相比变异较大,氨基酸变异主要出现在主要衣壳蛋白的P结构域。提示GII.P17-GII.G17型诺如病毒也是引起内蒙地区急性胃肠炎暴发流行的病毒病原。

2009—2021年中国九省份发热呼吸道症候群监测病例中常见病毒感染情况分析

目的了解我国九省份发热呼吸道症候群(FRS)监测病例中常见病毒感染情况。方法研究资料来源于中国疾病预防控制中心"传染病监测技术平台信息管理系统"中九省份(安徽、北京、广东、河北、湖南、吉林、山东、陕西和新疆)2009年1月至2021年6月间的FRS病例监测数据,最终将具有8种病毒[人流感病毒(HIFV)、人呼吸道合胞病毒(HRSV)、人腺病毒(HAdV)、人副流感病毒(HPIV)、人鼻病毒(HRV)、人偏肺病毒(HMPV)、人冠状病毒(HCoV)以及人博卡病毒(HBoV)]核酸检测结果的8 243例FRS监测病例纳入研究。采用χ2检验/Fisher确切概率法分析不同年龄组、不同地区和不同季节病例的病毒检出率差异。结果 8 243例FRS病例年龄M(Q1,Q3)为4(1,18)岁,<5岁以下儿童占56.56%(4 662例);男性占58.1%(4 792例);病例主要来源于门、急诊病例和住院病例,其中门急诊病例数为2 043例,住院病例数为6 200例。FRS病例的病毒检出率从高到低依次为HRSV、HIFV、HPIV、HRV、HAdV、HMPV、HCoV和HBoV。有524例病例同时检出两种及两种以上病毒,占病毒检测阳性病例数的15.66%。不同年龄组中病毒检出率的差异具有统计学意义(均P<0.05),<5岁以下儿童的病毒检出率较高(49.96%)。南方任一病毒阳性检出率高于北方(P<0.001)。FRS病毒阳性病例全年均有检出,HRSV检出率在秋、冬季较高,HIFV检出率在冬季较高,HMPV检出率在冬、春季较高;而HPIV、HRV、HCoV和HBoV的检出率在夏、秋季节较高,而HAdV在不同季节检出率的差异无统计学意义。与2009—2019年相比,2020—2021年的任一病毒阳性检出率有所下降,由原来的41.37%下降至37.86%;HIFV检出率由原来的10.62%急剧下降至1.37%;HPIV检出率由原来的8.24%下降至5.88%。而HRV和HBoV的检出率则由原来的5.43%和1.79%,分别上升至9.67%和3.19%。结论 2009—2021年中国九省份FRS病例以HRSV和HIFV感染较为常见,8种常见呼吸道病毒的流行特征存在年龄、地区和季节差异。

埃博拉病毒感染

埃博拉病毒属丝状病毒科埃博拉病毒属，感染人类所致疾病为埃博拉出血热，致死率高。在非洲一些国家流行，传播途径为人-人，方式为直接接触患者的血液或体液，病毒通过破损的皮肤或黏膜感染；不通过空气和水传播。感染的症状有发热、剧烈的头痛、肌肉疼痛、虚弱、疲劳、腹泻、呕吐、腹痛（胃疼）和无法解释的出血（大出血或者渗血）。治疗的方法为对症，疾病的恢复依靠支持疗法和患者的免疫反应，幸存者在恢复期产生埃博拉特异性抗体。尚无获批准的疫苗和药物。

毛细支气管炎患儿呼吸道合胞病毒分子生物学及临床特征分析

目的 探讨呼吸道合胞病毒（RSV）毛细支气管炎患儿的临床特征和病毒的分子生物学特征.方法 系统性回顾性研究,收集2006年7月至2016年6月首都儿科研究所毛细支气管炎患儿的鼻咽部分泌物标本（NPA）进行多种呼吸道病毒抗原检测;RSV阳性标本实时PCR法区分亚型;扩增RSV G蛋白全基因确定基因型别;改良Tal评分法评价疾病严重程度.采用t检验、MannWhitney U检验及x2检验.结果2 296例分泌物标本中,961例（41.9％）为RSV阳性,其中719例（74.8％）为RSV A亚型,236例（24.6％）为B亚型;10年间亚型转换模式为A-A-B-B-A-A-B-AB-A-AB,且在A亚型流行季发病例数较多.RSV G蛋白全基因序列分析结果提示6种A亚型基因型（NA1、NA2、NA3、NA4、GA5、ON1）和5种B亚型基因型（BA3、BA7、BA9、BA10、CB1）在北京地区被检出,A亚型中以NA1基因型（55.9％）和ON1基因型（39.1％）为主导基因型,2014年以前以NA1为主（50.0％～100％）,之后以ON1为主（68.0％～90.9％）;B亚型以BA9（90.6％）为绝对优势基因型.对比NA1感染与ON1感染患儿,NA1感染者中位住院时间8d、ON1患儿中位住院时间6d（U=1.035,P=0.005）,且其中重度者（中度：41.0％,重度：10.0％）比ON1患儿（中度：22.9％,重度：4.3％）多（U=9.785,P=0.008）;而ON1患儿出现发热症状的比例（38.6％）较NA1感染者（15.0％）高（x^2 =11.064,P=0.001）,其低月龄者（0～3月龄）所占比例（54.3％）高于NA1感染者（33.0％）（x^2=77.408,P＜0.001）.结论 北京地区毛细支气管炎患儿中RSVA、B亚型轮换或共同主导不同的流行季,多个基因型共同存在,基因型别与疾病的临床特征和严重程度存在一定相关性.

中枢神经系统感染和脓毒症患儿人副肠孤病毒和非脊髓灰质炎肠道病毒感染的特征

目的 通过检测患儿脑脊液和血清标本中的HPeV和NPEV,结合临床探讨其在儿童中的感染特征.方法 收集2014年1月至12月首都儿科研究所附属儿童医院来自600例16岁以下怀疑中枢神经系统感染或脓毒症患儿的脑脊液标本543份和血清标本173份,其中116例患儿同时收集到脑脊液和血清标本.通过实时荧光RT-PCR和巢式RT-PCR的方法对HPeV和NPEV进行筛查及分型.结果 在最终诊断为CNS感染的136例患儿中,HPeV阳性率为1.5％,NPEV阳性率为16.9％;诊断为脓毒症的51例患儿中,HPeV阳性率为5.9％,NPEV阳性率为3.9％;其他诊断的413例患儿中,HPeV阳性率为3.4％,NPEV阳性率为2.9％.HPeV感染患儿以0月～＜3月年龄组最多,而NPEV则以3岁～＜7岁组最多.NPEV感染的高峰为7月～9月,而HPeV感染的高峰为11月和12月.结论 HPeV感染患儿年龄低于NPEV感染患儿,HPeV和NPEV可在儿童中引起脓毒症或CNS感染等严重疾病.

关注细菌感染中抗菌药物的耐药性

当抗菌药物在20世纪初问世时,医疗卫生界曾认为人类已经赢得了这场与细菌的战争。然而,随着微生物的持续进化,人们很快就发现,微生物能够对几乎所有正在使用的抗菌药物产生抵抗。感染性疾病一直为人类疾病与死亡的重要原因。抗微生物药物耐药性的出现对感染性疾病的病种与发病人数以及医疗费用的增长都产生了巨大的影响。因此,医疗卫生界有必要对常见的细菌感染的抗微生物药物耐药性问题给予极大的关注。