益消方对糖尿病周围神经病变小鼠的神经保护作用研究

目的探讨益消方对糖尿病周围神经病变小鼠坐骨神经的保护作用。方法选取24只8周龄KKAy小鼠完全随机分为模型组、硫辛酸组、益消方组,每组8只,并以8只同周龄C57BL/6J小鼠作为对照组。硫辛酸组给予硫辛酸60 mg/(kg·d)灌胃,益消方组给予益消方7.7 g/(kg·d)灌胃,对照组及模型组给予同容积的蒸馏水灌胃。每天给药1次,连续12周。比较各组小鼠干预前及干预第4、8、12周的空腹血糖、体重和神经功能等。结果模型组、硫辛酸组、益消方组干预第8、12周空腹血糖和体重均高于对照组(均P<0.05)。硫辛酸组干预第12周空腹血糖低于模型组;益消方组干预第8、12周空腹血糖和体重均低于模型组;益消方组干预第12周体重低于硫辛酸组(均P<0.05)。模型组、硫辛酸组、益消方组干预前和干预第8、12周机械痛阈值均低于对照组(均P<0.05)。模型组、硫辛酸组、益消方组干预前和干预第4、8、12周甩尾时间均长于对照组(均P<0.001)。硫辛酸组和益消方组干预第8、12周机械痛阈值均高于模型组,干预第4、8、12周甩尾时间均短于模型组;益消方组干预第12周机械痛阈值高于硫辛酸组[(2.54±0.24)g比(1.95±0.28)g],干预第4、8、12周甩尾时间均短于硫辛酸组(均P<0.001)。结论益消方可减轻糖尿病周围神经病变小鼠坐骨神经损伤,其机制可能与调节Keap1-Nrf2-ARE信号通路及下游超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的表达有关。

自发性2型糖尿病KKAy小鼠心脏结构和功能改变实验研究

目的观察自发性2型糖尿病KKAy小鼠心脏结构和功能的改变及进展,评估其是否为糖尿病心肌病模型,为后续药效实验的开展提供依据。方法取12周龄雄性KKAy小鼠24只作为模型组,取24只C57BL/6J小鼠作为对照组,分别于14,18,22,26周龄按随机原则各组处死6只,测量2组小鼠体重、空腹血糖和心脏功能学指标,HE染色、Masson染色观察2组小鼠心脏病理改变。结果不同周龄模型组小鼠的体重、空腹血糖水平、舒张期左室前壁厚度(LVAWd)和舒张期左室后壁厚度(LVPWd)均明显高于同期对照组(P均<0.05)。不同周龄模型组小鼠的二尖瓣口血流多普勒E/A、二尖瓣环组织多普勒e’/a’均明显低于同期对照组(P均<0.05),且随周龄增长逐渐降低;而E/e’均明显高于同期对照组(P均<0.05),且随周龄增长逐渐增高;2组小鼠各周龄的左心室射血分数(LVEF)比较差异均无统计学意义(P均>0.05),均在正常范围内。心脏组织病理形态学可见模型组心肌细胞排列紊乱、细胞肥大、空泡样变和心肌细胞纤维化,且心肌间质及血管周围胶原纤维的面积均明显大于对照组(P均<0.05)。结论KKAy小鼠在高脂饮食喂养后血糖持续升高,且心室室壁厚度稳定增加,伴持续性心肌纤维化及心脏舒张功能障碍等特征,符合糖尿病心肌病的发病特征,是较为稳定的糖尿病心肌病模型。

羟基脲诱导神经管畸形小鼠模型及与其他小鼠模型的比较研究

目的本研究拟通过干扰新的叶酸相关代谢-核苷三磷酸还原成相应的脱氧核苷三磷酸通路中的关键酶-核苷酸还原酶,诱导构建神经管畸形(NTDs)小鼠模型,并且与前期构建的NTDs小鼠模型进行比较。方法实验小鼠选用C57BL/6J小鼠,购自北京华阜康公司,雌鼠60只,雄鼠30只,小鼠年龄7~8周,体重18~20 g,常规饲养于SPF级动物房。小鼠饲养一周后,晚上18∶00按照雄雌(1∶2)进行合拢,早上分笼将有阴栓的小鼠标记为孕0.5 d(E 0.5)。按照随机分组的方法将小鼠分为6组。其中实验组5组,在神经管闭合前的孕7.5 d(E 7.5),给予5种剂量的羟基脲进行腹腔注射;正常对照组,采用0.9%的氯化钠水溶液注射。采用不同剂量的羟基脲(HU)腹腔注射C57BL/6J孕鼠,诱导构建最佳小鼠NTDs模型,筛选出HU的最佳造模剂量为NTDs组。利用Western blot方法和免疫组化方法观察神经上皮细胞增殖和凋亡的情况,与前期诱导的NTDs小鼠模型中的结果进行对比。结果HU可诱导出NTDs的小鼠模型,免疫组化检测结果显示,畸形胚胎中的PCNA的阳性细胞低于正常胚胎组;Caspase3的阳性细胞高于正常组(P<0.05)。PCNA蛋白在NTDs组中的表达水平明显低于正常对照组(P<0.05),Cleaved Caspase-3蛋白在NTDs组中的表达水平明显高于正常对照组(P<0.05),并且与前期诱导模型的结果一致。结论本研究通过干扰核苷酸还原酶,引起了神经管发育过程中细胞增殖和凋亡的失衡,从而诱导构建出NTDs小鼠模型,为进一步研究NTDs的机制提供了新的动物模型。

INPP5E基因影响小鼠胚胎神经管闭合的分子机制研究

目的探讨肌醇多聚磷酸5-磷酸酶(INPP5E)基因影响小鼠胚胎神经管闭合的分子机制。方法采用前期复制的神经管缺陷(NTD)小鼠模型,在体视显微镜下观察胚胎表型、苏木精-伊红染色情况,测量胚胎顶臀长、体重等指标;重亚硫酸盐测序法检测NTD组及对照组胚胎发育第11.5天小鼠胚胎神经组织中INPP5E基因启动子区DNA甲基化情况;实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting检测胚胎神经组织中INPP5E蛋白和mRNA相对表达量;超高效液相色谱串联质谱法检测胚胎神经组织中叶酸(FA)、5-甲基四氢叶酸(5-MeTHF)、5-甲酰四氢叶酸(5-FoTHF)及同型半胱氨酸(Hcy)水平。结果NTD组小鼠胚胎神经组织INPP5E基因启动子区甲基化水平、INPP5E蛋白和mRNA相对表达量在胚胎发育第11.5天时较对照组低(P<0.05)。NTD组胚胎神经组织的FA和Hcy水平较对照组升高(P<0.05),而5-MeTHF和5-FoTHF水平较对照组低(P<0.05)。结论INPP5E基因在调节小鼠胚胎神经管闭合中起重要作用。FA代谢紊乱引起的INPP5E基因启动子区甲基化水平降低,可能通过影响其表达水平参与NTD的发生。

自噬调节基因AMBRA1在神经管发育中的作用及机制研究进展

神经管畸形(NTDs)是在胚胎发育过程中,由于神经管闭合缺陷导致的先天性畸形。在神经管闭合过程中,自噬是必不可少的。许多研究表明,自噬/苄氯素1调节因子1基因(AMBRA1)编码的蛋白质在自噬调节过程中发挥着重要作用。AMBRA1基因缺失导致胚胎发育早期自噬损伤,发生严重NTDs表型。本文从自噬角度对AMBRA1基因在神经管发育过程中的作用及其机制进行综述,以期为进一步阐明NTDs的发生机制提供新思路。

初级纤毛通过信号通路调控胚胎神经发育的研究进展

初级纤毛是从真核细胞表面延伸出来的一种特殊细胞器,细胞可通过初级纤毛来感知外界各种信号的变化,包括机械和化学信号,并且初级纤毛可协助细胞将胞外信号转化为胞内应答,通过信号通路调节各类细胞进程。近年来发现,初级纤毛在神经管畸形的发生发展中也具有重要作用。本文就初级纤毛与信号通路如何调控胚胎神经发育相关研究进展进行综述,以期为神经管畸形的发病机制的深入研究及防治提供参考。

母体肠道微生态与胎儿神经发育

孕期和早期生命阶段是母体肠道微生态对胎儿神经发育可塑性显著变化的关键时期。肠道微生态在大脑发育和功能中扮演着至关重要的角色,近年来,科学家们越来越关注母体肠道微生态与胎儿神经发育之间的关系,本文旨在从母体肠道微生态角度探讨其与胎儿神经发育的关系,以期为儿童早期发展及出生缺陷的预防提供新的视角。

碳酸锂联合长春新碱促进儿童急性T淋巴细胞白血病细胞增殖抑制和凋亡

儿童急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是T系前体细胞发生恶性转化的一种侵袭性肿瘤,化疗药物的毒副作用及耐药性问题仍然是阻碍其治疗成功的难题。长春新碱(vincristine,VCR)是治疗儿童T-ALL疗效显著的传统化疗药物,但其副作用明显。碳酸锂(Li_(2)CO_(3))可增强其它化疗药物的疗效,但其联合VCR的研究未见报道。该研究旨在探讨Li_(2)CO_(3)联合VCR对2种儿童T-ALL细胞系CCRF-CEM和Jurkat细胞增殖、凋亡及细胞周期的作用。噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法结果显示,与对照组比较,单用VCR或Li_(2)CO_(3),随着其浓度的增加,2种细胞存活率均逐渐降低(P<0.05)。2种细胞在相同Li_(2)CO_(3)浓度下存活率不同(P<0.01)。Li_(2)CO_(3)联合VCR处理细胞存活率与单独VCR组处理相比,2种细胞的细胞存活率和VCR的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))值降低,Li_(2)CO_(3)与VCR的2药相互作用指数(coefficient of drug interaction,CDI)均小于1。流式细胞仪检测结果发现,对照组、Li_(2)CO_(3)组、VCR组和Li_(2)CO_(3)联合VCR组,2种细胞Li_(2)CO_(3)联合VCR组的G_(2)/M期和凋亡细胞占比最高,Li_(2)CO_(3)联合VCR组和VCR组比,均存在显著性差异(P<0.05)。总之,我们的研究结果提示,Li_(2)CO_(3)与VCR联合促进T-ALL细胞增殖抑制,使细胞周期阻滞于G_(2)/M期,且促进细胞凋亡,结果为儿童T-ALL临床治疗及减少VCR毒副作用提供了新的实验依据,也为其药物研发提供新的思路。

健康体检儿童肺炎支原体检出情况研究

目的了解参与健康体检儿童人群的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)检出情况。方法随机入组2023年参与健康体检的6~12岁小学生1303人,采集受试者口咽拭子及静脉血标本,使用分离培养、核酸检测以及血清学抗体方法检测受试者Mp检出情况,并进行统计学分析。结果1303例健康儿童中Mp培养阳性检出率为4.1%(53/1303),核酸阳性检出率为7.3%(95/1303),血清学IgM抗体阳性检出率为13.6%(177/1303)。经统计学分析,健康儿童人群中Mp培养与核酸检测以及血清IgM抗体检测阳性率之间的差别均具有统计学意义(P<0.05)。结论2023年健康体检儿童中Mp检出率约为4.1%。分离培养方法对健康人群中Mp检出率检测准确性优于核酸以及血清学方法,核酸和血清学方法会高估正常人群中Mp检出率。

关注生命早期1000 天

生命早期1000 天,是指从怀孕的胎儿期(280 天)到宝宝出生之后的2 岁(720 天)。世界卫生组织(WHO)将这一时期定义为生长发育的“机遇窗口期”, 这个时期不仅会影响孩子身体、大脑的发育,还会影响孩子成人后的健康状况[1]。联合国提出生命早期1000 天是预防成年期慢性疾病,如肥胖、高血压、心脏病及糖尿病等的窗口期。因此,要重视孩子生命早期阶段,保证孕期、哺乳期、婴儿期和幼儿期良好的健康与生活环境,及时纠正营养不良的代际传递。孕前准备和孕期保健对孩子的未来至关重要,营养不良、体重过重或患有慢性疾病,都会影响到胎儿和母体的健康。

INPP5E基因在初级纤毛相关儿童疾病中的研究进展

肌醇多聚磷酸-5-磷酸酶(INPP5E)基因编码INPP5E,其广泛分布于人类和小鼠的多种组织内,如心脏、大脑和睾丸等,通过调节细胞内磷脂酰肌醇三磷酸含量影响磷酸肌醇代谢通路,从而参与细胞内信号转导、细胞增殖及分化、细胞极性等过程,在初级纤毛的发生过程中发挥重要作用,与儿童纤毛疾病密切相关。现针对INPP5E基因在初级纤毛相关儿童疾病中的研究进展进行综述,结合实验室研究结果,以期为INPP5E基因在初级纤毛的调控及儿童纤毛疾病的防治提供新思路。

PI3K/Akt信号通路在小鼠胚胎神经发育中的作用及机制

目的探究磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol-3-kinase/serine-threonine kinase,PI3K/Akt)信号通路对小鼠胚胎神经发育的影响及作用机制,进一步阐明PI3K/Akt信号通路相关胚胎神经发育异常的分子机制。方法实验动物为C57BL/6J小鼠,胚胎第7.5天(embryonic day,E7.5)孕鼠随机分为6组,实验组分别腹腔注射12.5、25、50、75、100 mg/kg的LY294002(PI3K/Akt信号通路抑制剂),对照组注射生理盐水。E13.5解剖,观察小鼠胚胎畸形情况。确定最佳造模剂量后,取该组小鼠胚胎神经及脊柱样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测细胞凋亡及音猬因子(sonic hedgehog,Shh)信号通路关键基因的mRNA表达水平,采用免疫印迹法检测蛋白质表达水平。实验细胞选用小鼠神经干细胞NE-4C细胞系,采用噻唑兰法(methylthiazolyldiphenyl tetrazolium bromide,MTT)检测不同浓度LY294002处理后细胞存活情况;采用原位末端标记(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)实验检测细胞凋亡;采用流式细胞术检测细胞周期。统计学方法采用单因素方差分析和Dunnett’s t检验。结果动物实验结果显示,LY294002给药组出现神经管畸形(neural tube defect,NTD)表型;50 mg/kg组的NTD发生率80.7%(46/57),均为脊髓脊膜膨出和脊柱裂,选为最佳造模剂量。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,给药无畸形组、脊髓脊膜膨出组及脊柱裂组的细胞凋亡标志物肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene P53,P53)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(cysteinyl aspartate-specific proteinase 3,Caspase3)的相对mRNA表达均上升(P<0.01),磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸-3-激酶催化亚基α基因(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate-3-kinase catalytic subunit alpha,PIK3CA)及Shh信号通路关键基因[平滑蛋白(smoothened,Smo)、神经胶质瘤相关癌基因同源物(glioma-associated oncogene homolog,Gli)1及Gli2]的相对mRNA表达均显著降低(P<0.01)。免疫印迹结果显示,与对照组相比,给药无畸形组、脊髓脊膜膨出组和脊柱裂组的PI3K、Gli2相对蛋白表达均降低(P<0.01);脊髓脊膜膨出组和脊柱裂组的Smo、Gli1相对蛋白表达均降低(P<0.01),但给药无畸形组与对照组比较差异无统计学意义。细胞实验结果显示,LY294002抑制细胞增殖,细胞周期阻滞在G1期,诱导NE-4C细胞凋亡。MTT检测结果显示,随着LY294002浓度的增大,对细胞存活的抑制作用越强。TUNEL染色结果显示,20μmol/L与25μmol/L处理组中阳性细胞数与总细胞数的比例均高于对照组(4.22±0.16、8.56±0.24、1.00±0.14,t值分别为6.225和15.089,P值均<0.001)。流式细胞术检测结果显示,随着LY294002浓度增加(0、20、25μmol/L),G1期细胞占总细胞的百分比显著升高[(53.1±3.1)%、(66.4±2.1)%、(76.3±1.6)%,F=31.627,P<0.001],S期与G2期细胞比例逐渐减少。结论在小鼠胚胎神经发育过程中,抑制PI3K/Akt信号通路导致Shh信号通路传导受到抑制,促进细胞凋亡,影响小鼠胚胎神经管闭合,导致NTD的发生。

脊柱裂相关基因的研究进展

脊柱裂是神经管畸形的表型之一,由遗传与环境等因素共同影响。与脊柱裂发生相关的基因很多,主要基因和动物模型主要集中在信号通路上。本文就脊柱裂的发病机理和关键基因的关系的研究进展进行综述,以期进一步阐明脊柱裂的发病机制。

肌醇缺乏环境下骨形成蛋白/Smad1/5/8通路对小鼠神经干细胞增殖的影响

目的探究肌醇缺乏环境下骨形成蛋白(bone morphogenetic proteins,BMP)/果蝇与秀丽隐杆线虫蛋白同源物(homologues of the drosophila protein,mothers against decapentaplegic and the caenorhabditis elegans protein,Smad)1/5/8通路对小鼠神经干细胞增殖的影响,进一步阐明胚胎神经发育异常的分子机制。方法选取NE-4C细胞系,分为对照组和0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、50、100、150和200 mmol/L肌醇处理组;应用肌醇合成酶抑制剂碳酸锂处理细胞,分为对照组和0.75、1、1.25、1.5、1.75、2和2.5 mmol/L碳酸锂处理组;用BMP信号通路抑制剂LDN-193189进行挽回实验,分别将细胞分为对照组和0.05、0.1、0.5、1、2、4和8μmol/L LDN-193189处理组;以及对照组、碳酸锂组、无肌醇组、碳酸锂+LDN-193189组和LDN-193189组,培养24 h,3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-di-phenyltetrazolium bromide,MTT]法检测各组细胞活性;逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测BMP信号通路关键基因Bmp2、Bmp4、Smad1、Smad5、Smad8以及下游靶基因Runx家族转录因子2(Runx family transcription factor 2,Runx2)的表达情况;免疫印迹法及免疫荧光检测BMP/Smad1/5/8通路关键基因的表达及定位。统计学方法采用方差分析和Dunnett's t检验。结果①0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、50、100、150和200 mmol/L肌醇处理组与对照组细胞活性分别为(119.1±1.5)%、(101.7±2.6)%、(98.9±1.4)%、(101.5±1.2)%、(97.9±1.5)%、(97.5±1.0)%、(96.5±1.2)%、(97.8±1.1)%、(94.4±1.2)%、(92.9±1.9)%、(82.9±1.5)%、(63.6±1.7)%与(147.8±2.4)%,随着培养基中肌醇浓度增加,细胞增殖能力逐渐降低(P值均<0.01)。1、1.25、1.5、1.75、2和2.5 mmol/L碳酸锂处理组与对照组细胞活性分别为(119.8±1.6)%、(128.1±1.8)%、(138.5±2.2)%、(114.4±2.3)%、(111.0±1.9)%、(106.3±1.7)%与(99.5±1.6)%,碳酸锂显著促进细胞增殖(P值均<0.05),且浓度为1.5 mmol/L时细胞增殖作用最明显。②碳酸锂组、无肌醇组与对照组Bmp2(2.17±0.26、19.81±0.92与1.00±0.13)、Bmp4(1.97±0.18、4.23±0.31与1.00±0.27)、Smad1(1.91±0.15、4.10±0.25与1.00±0.37)、Smad5(1.94±0.20、2.88±0.27与1.00±0.28)、Smad8(1.62±0.14、3.20±0.18与1.00±0.13)及Runx2(1.79±0.13、5.31±0.49与1.00±0.21)的mRNA水平比较,碳酸锂组和无肌醇组基因表达增强(P值均<0.01)。③0.05、0.1、0.5、1、2、4和8μmol/L LDN-193189处理组与对照组细胞活性分别为(96.5±0.7)%、(80.4±1.6)%、(63.8±1.1)%、(56.9±1.8)%、(29.3±2.4)%、(4.6±0.2)%、(2.6±0.2)%与(99.4±1.0)%,LDN-193189抑制细胞增殖且具有剂量依赖性(P值均<0.001)。碳酸锂组、无肌醇组、碳酸锂+LDN-193189组、无肌醇+LDN-193189组、LDN-193189组与对照组细胞活性分别为(122.1±2.0)%、(144.7±2.7)%、(82.6±2.3)%、(66.6±2.0)%、(57.3±2.1)%与(101.2±2.2)%,LDN-193189能逆转碳酸锂或无肌醇诱导的细胞增殖(P值均<0.001)。④碳酸锂组、无肌醇组、碳酸锂+LDN-193189组、LDN-193189组与对照组磷酸化Smad1/5/8相对表达量分别为1.30±0.10、1.62±0.10、0.59±0.15、0.11±0.08与1.00±0.18,表明LDN-193189能逆转肌醇缺乏环境下磷酸化Smad1/5/8蛋白表达上调(P<0.01)。⑤免疫荧光结果显示,红色荧光标记的Runx2蛋白定位于细胞核,与对照组比较,碳酸锂组和无肌醇组Runx2表达增高,LDN-193189组几乎无表达,碳酸锂+LDN-193189组表达降低,LDN-193189能逆转肌醇缺乏环境下诱导的Runx2表达上调。碳酸锂组、无肌醇组、碳酸锂+LDN-193189组、LDN-193189组与对照组Runx2蛋白相对表达量分别为2.00±0.08、2.09±0.11、1.75±0.05、1.76±0.13与1.04±0.10,表明肌醇缺乏促进Runx2表达上调(P<0.01),LDN-193189逆转碳酸锂诱导的Runx2表达上调的作用不明显,但P值接近0.05(P=0.051)。结论肌醇缺乏环境会导致BMP/Smad1/5/8通路被异常激活,调控下游靶基因Runx2,可促进神经干细胞异常增殖。

乙硫氨酸对神经管畸形胎鼠脑组织Fos和Cyp2e1基因表达的影响

目的采用乙硫氨酸诱导小鼠胚胎神经管畸形(neural tube defects,NTDs),观察乙硫氨酸对NTDs小鼠胚胎脑组织基因表达的影响。方法SPF级C57BL/6J孕鼠80只,随机分为模型组42只和对照组38只。孕7.5 d时,模型组孕鼠腹腔注射乙硫氨酸500 mg/kg,对照组腹腔注射等剂量磷酸盐缓冲液。孕10.5 d时体视显微镜下分离胚胎并行HE染色,观察胚胎及神经管发育情况。取模型组NTDs胚胎脑组织和对照组正常胚胎脑组织进行转录组测序,并对差异表达基因进行GO功能注释分析、KEGG通路富集分析、蛋白质互作网络分析。采用实时荧光定量PCR法检测差异表达基因mRNA相对表达量,采用Western blot法检测差异表达基因的蛋白相对表达量,对差异表达基因进行验证。结果模型组吸收胎、生长缓慢、NTDs发生率(10.3%、19.5%、56.0%)均高于对照组(2.4%、4.5%、0)(P<0.05),正常胚胎发生率(12.6%)低于对照组(93.1%)(χ^(2)=353.690,P<0.001),其他畸形发生率(1.6%)与对照组(0)比较差异无统计学意义(χ^(2)=4.144,P=0.113)。对照组胚胎神经管发育良好,管腔规则;模型组NTDs胚胎发育迟缓,端脑和后脑形态异常,结构紊乱。与对照组正常胚胎比较,模型组NTDs胚胎差异表达基因119个,其中表达上调基因30个,表达下调基因89个;差异表达基因主要参与多器官发育、细胞增殖及分化、氧转运等功能,主要富集于代谢通路;蛋白质互作网络分析细胞代谢相关差异表达基因前10位为Cyp4a10、Cyp4a12a、Cyp4b1、Cyp2e1、Cyp2j5、Ugt2b34、Ugt2b38、Fos、Hoxa5、Hoxa7。模型组NTDs胚胎脑组织Cyp4a10、Cyp4a12a、Cyp4b1、Cyp2e1、Cyp2j5、Ugt2b34、Ugt2b38 mRNA相对表达量均低于对照组正常胚胎(P<0.05),Fos、Hoxa5、Hoxa7 mRNA相对表达量均高于对照组正常胚胎(P<0.05),其中Cyp2e1、Fos mRNA相对表达量差异最大。模型组NTDs胚胎脑组织Cyp2e1蛋白相对表达量(0.187±0.030)低于对照组正常胚胎(1.978±0.125)(t=13.970,P<0.001),Fos蛋白相对表达量(2.042±0.251)高于对照组正常胚胎(0.539±0.036)(t=5.927,P=0.004)。结论乙硫氨酸可能通过影响Cyp2e1和Fos等代谢通路相关基因表达,参与NTDs发生。

儿童肺炎支原体感染合并凝血功能障碍的临床资料分析

目的比较肺炎支原体感染伴凝血功能障碍患者和单纯肺炎支原体感染患者临床特征、实验室检查结果、影像学表现的不同,并分析相关指标对肺炎支原体感染伴凝血功能障碍的预测价值。方法收集首都儿科研究所附属儿童医院2021年肺炎支原体伴凝血功能障碍(病例组)65例和单纯肺炎支原体(对照组)92例,比较两组的临床资料并绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,分析有差异指标对病例组的预测价值。结果病例组和对照组的一般临床特征和影像学表现无明显差异;病例组的纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-Dimer)、纤维蛋白原降解产物(FDP)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、IgE、乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清腺苷脱氨酶(ADA)、C-反应蛋白(CRP)、血小板计数(PLT)、中性粒细胞数、住院天数、热峰、咳嗽天数、发热天数均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),LDH、CRP、热峰、ADA、ALT、中性粒细胞数、AST、IgE预测病例组ROC曲线下面积分别为0.855、0.810、0.730、0.716、0.692、0.648、0.631、0.603,LDH、CRP和热峰联合诊断ROC曲线下面积为0.901。结论LDH、CRP、热峰、ADA、ALT、中性粒细胞数、AST、IgE对病例组也具有预测价值,其中LDH、CRP和热峰的预测价值较高,LDH、CRP和热峰联合诊断价值最高(AUC=0.901)。

神经纤维瘤病1型并癫痫发作15例临床特征

目的:总结神经纤维瘤病1型(NF1)并癫痫发作的临床特征。方法:病例系列研究,收集2017年1月至2023年7月在首都儿科研究所附属儿童医院就诊的15例NF1并癫痫发作患儿的病例资料,对其临床特征、治疗情况和预后进行总结分析。结果:15例NF1并癫痫发作患儿中男12例、女3例。15例患儿均有皮肤咖啡牛奶斑,6例存在神经发育障碍以智力障碍或发育落后为主。首次癫痫发作年龄为2.5(1.2,5.5)岁,癫痫发作形式多样,包括全面强直-阵挛发作8例、局灶运动性发作6例、痉挛发作4例、强直发作1例、失神发作1例、全面性肌阵挛发作1例、局灶性继发双侧强直-阵挛发作1例。14例可获得颅脑磁共振成像结果的患儿中,6例胼胝体、基底节、丘脑、小脑等部位点片状异常信号,3例不同程度脑室扩大,2例灰白质分界模糊,1例胼胝体发育不全,余无明显异常。13例符合癫痫诊断的患儿中,8例应用1~2种抗癫痫药物后不再发作,1例药物难治性癫痫患儿在接受左侧颞叶切除术后未再发作,4例曾应用2~9种抗癫痫药物,仍未控制发作。1例复杂热性惊厥患儿发热时口服地西泮预防性治疗,未再发作,1例患儿仅非诱发性癫痫发作1次,未应用抗癫痫药物,未再发作。结论:NF1患儿的首次癫痫发作多于婴幼儿期出现,以全面强直-阵挛发作和局灶运动性发作为主,可合并智力障碍或发育迟缓。对于诊断癫痫者,多数可经抗癫痫药物治疗完全缓解。

人类白细胞抗原-DPA1基因多态性与无胚胎妊娠的相关性

目的探讨人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)-DPA1基因多态性与无胚胎妊娠的相关性。方法选取110例无胚胎妊娠病例,同时以150例非自然流产对象作为对照组(两组均为汉族),采集妊娠期外周血,通过高通量DNA技术分析HLA-DPA1基因的14个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),并通过统计学方法分析HLA-DPA1的SNP与无胚胎妊娠的相关性。同时将对照组与不同民族或种族人群基因型/等位基因频率进行比较。结果与对照组相比,有1个SNP位点rs1431403的纯合子分型(CC、TT)及纯合子突变组合(CC+TT)均显著增加了病例组无胚胎妊娠的风险(OR分别为2.93、4.15、3.58,95%CI分别为1.53~5.62、2.20~7.83、2.05~6.04,P分别为0.001、0.000、0.000),且rs1431403在不同民族或种族人群中具有不同的基因型/等位基因频率分布。结论 HLA-DPA1的基因多态位点rs1431403可能是中国汉族人群发生无胚胎妊娠的一个潜在危险因素。