组织学和生物学检测对小儿血管瘤临床治疗价值的探讨

目的通过对小儿血管瘤标本的组织形态学观察和生物学特性测定,探讨血管瘤分类、分期的诊断指标,为临床选择治疗方案提供客观依据。方法①采用苏木素伊红染色(HE)法,根据镜下组织形态学特点进行分类及分期;②采用甲苯氨蓝染色法进行肥大细胞数测定;③采用免疫组化(SP)法,测定血管瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮细胞生成因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在血管瘤与血管畸形中的表达。结果①增生期血管瘤(55例)内皮细胞增殖活跃,形成细胞团;消退期血管瘤(7例)内皮细胞减少,可见呈岛状分布的脂肪和纤维组织;血管畸形(40例)为毛细血管、小动脉、静脉的异常扩张,内皮细胞无异常增殖;②增生期血管瘤肥大细胞计数为33.30±18.66,高于消退期的26.16±19.09(P<0.05),二者均明显高于血管畸形的7.27±13.01(P<0.01);③PCNA在增生和消退期血管瘤标本中表达的阳性率分别为100%和42.9%,血管畸形仅为22.5%,组间有非常显著性差异(P<0.01)。VEGF在三种组织中表达的阳性率分别为89.6%、42.9%和5%,组间有非常显著性差异(P<0.01)。bFGF在三种组织中表达的阳性率分别为89.6%、100%和25.1%,血管瘤与血管畸形组间有非常显著性差异(P<0.01)。结论肥大细胞可能与血管瘤组织纤维变性及导致血管瘤自然消退有关。PCNA、VEGF与bFGF是判断血管内皮细胞增殖与否的较准确与实用的指标,可作为诊断增生期血管瘤、消退期血管瘤,抑或血管畸形的重要参考。

自杀基因治疗神经母细胞瘤的实验研究

目的 探讨自杀基因疗法对神经母细胞瘤的作用 ,为临床应用打下基础。方法 利用含胸苷激酶基因 (tk)与潮霉素磷酸转移酶基因 (hy)的融合基因的真核表达载体及仅含hy的空载体 ,以脂质体为介导 ,将这两种质粒分别转染神经母细胞瘤细胞系SH SY5Y。利用潮霉素药物敏感实验筛选SH SY5Y ,用不同浓度的丙氧鸟苷 (GCV)分别作用于SH SY5Y、SH SY5Y hytk及SH SY5Y hy。 结果 利用潮霉素药物敏感实验筛选SH SY5Y ,12d时SH SY5Y全部死亡的最低浓度为6 0 μg/ml,30 μm丙氧鸟苷可最大限度杀死SH SY5Y hytk。杀伤效应为 96h死亡率 >80 %。仅含有18%的SH SY5Y hytk就可使周围的 2 0 %的SH SY5Y细胞死亡 ,总死亡率为 38%。 结论 6 0 μg/ml潮霉素是筛选SH SY5Y hytk及SH SY5Y hy阳性克隆的最佳剂量。 30 μM丙氧鸟苷是作用于SH SY5Y hytk的最佳剂量。tk/GCV系统大于 18%SH SY5Y hytk具有旁观者效应 ,可极大地提高疗效。

先天性食管闭锁17例治疗体会

目的:总结11年来先天性食管闭锁17例手术治疗的经验,介绍经胸膜外手术技术及其优点。方法:经胸膜外入路法即切开4/5肋间,小心分离肋间肌,先以小蚊式钳小心分开肋骨,再用食指剥离胸膜。注意操作轻柔,仔细剥离胸膜顶及肺门处。胸膜有少许破损可继续完成剥离。术后胸膜外间隙不需引流,食管内亦不留置支架。结果:17例中5例经胸食管吻合仅存活1例,11例胸膜外吻合存活8例(72.7%)。1例Ⅰ型结肠代食管成功。结论:通过17例先天性食管闭锁的治疗,体会到经胸膜外手术后呼吸系统并发症少,及早正确的诊治,熟练的手术技巧,减少食管吻合的张力是提高治愈率的关键。

犬辅助性原位肝左叶移植模型的建立

目的建立稳定可靠的辅助性肝移植动物模型。方法杂交犬14条8-25 kg随机分两组。供体组肝脏均采用尸体肝左叶;受体组行标准左叶切除,供肝左叶原位移植于受体体内。结果供肝热缺血时间为零,冷缺血时间平均36．3 min;灌注液的量平均2．96 L,切取修剪肝左叶时间为23-40 min。受体手术平均时间5．3 h,平均出血量140 ml,肝脏血管重建后红润柔软,5-11 min内即见胆汁从胆管中溢出。受体组术后全部存活,围手术期未用任何血管活性药物、抗生素及免疫抑制剂,术后存活超过6 h者5例,最长存活者达5．7 d。结论犬是建立辅助性肝移植模型的理想动物。