TRIM33对人脑胶质瘤U251细胞生物学功能影响的实验研究

目的观察低氧条件下TRIM33基因表达的变化情况及对胶质瘤U251细胞生物学功能的影响。方法将U251细胞分别在低氧及常氧条件下培养不同时间，采用实时荧光定量PCR及Western blot检测TRIM33的表达变化情况。通过构建TRIM33过表达慢病毒转染U251细胞，采用Western blot检测转染后U251细胞TRIM33的表达，低氧条件下利用CCK-8检测细胞增殖，Transwell检测细胞迁移及侵袭，Western blot检测上皮－间质转化（EMT）相关蛋白的表达情况。结果（1）与常氧条件培养的U251细胞相比，低氧条件下U251细胞中的TRIM33表达发生下调（P〈0.001）。（2）与空白对照组相比，TRIM33组的TRIM33相对表达水平明显升高（P〈0.001）。（3）CCK-8实验表明，与空白对照组相比，TRIM33组的细胞增殖活力差异无统计学意义（P〉0.05）。（4）Transwell实验结果显示，TRIM33组的迁移及侵袭能力较空白对照组明显降低（均P〈0.05）。（5）Western blot结果显示，与空白对照组相比，EMT相关蛋白即波形蛋白、N-钙黏素表达水平均明显降低（均P〈0.01），E-钙黏素表达水平显著升高（P〈0.001）。结论在低氧条件下人脑胶质瘤U251细胞TRIM33表达发生下调，过表达TRIM33可以显著抑制低氧环境对U251细胞迁移、侵袭的影响，其可能是通过影响EMT实现的。TRIM33可作为拮抗低氧微环境的潜在基因治疗靶点。