CD4^+CD25^+ Treg细胞与移植免疫耐受

诱导器官移植受者对供者抗原的免疫耐受是防治同种异型移植排斥反应的最理想途径。目前认为,免疫耐受形成的主要机制包括:胸腺及骨髓阴性选择引起的克隆清除(Clonal deletion)、组织特异性自身抗原低表达引起的克隆忽视(Clonal ignorance)、阻断T细胞共刺激信号引起的克隆无能(Clonal anergy)、嵌合体(Chimerism)的形成、调节性T细胞(Regulatory Tcell,Treg)介导的克隆抑制(Clonal suppression)等。近年来CD4+CD25+ Treg细胞的研究已成为免疫学界的热门课题之一。已知CD4+CD25+ Treg细胞存在于小鼠、大鼠和人体中,是机体自然存在的具有主动调节活性的T细胞,对维持自我耐受和控制自身免疫病发挥着重要作用。本文着重就CD4+CD25+ Treg细胞的免疫调节机制及其在诱导移植免疫耐受方面的研究进展做一综述。

自身免疫病免疫治疗的研究进展

自身免疫病的发病机制在于自我耐受的破坏以致于自身抗体或 /和致敏淋巴细胞损伤含有相应自身抗原的器官组织而引起临床症状。针对其发病机制 ,采用相应的免疫学方法来控制自身免疫病具有重要的临床意义。

环孢素对小鼠树突细胞体外成熟及同种免疫刺激活性的影响

目的:观察环孢素(cyclosprine A,CSA)对小鼠树突状细胞(dendritic ce ll,DC)体外成熟和免疫学功能的影响,以期进一步探讨CSA免疫抑制作用机理。方法:在小鼠DC体外培养时加入两种剂量(0.5μg/m l和1.0μg/m l)的CSA处理,观察DC的生成情况,以流式细胞仪分析各处理组细胞的免疫表型,并作体外混合淋巴细胞反应观察其对同种T细胞的刺激增殖能力。结果:经CSA培养后,DC的生成和形态没有影响,表达低水平的共刺激分子CD 40,CD 80,DC的抗原呈递功能和刺激同种T细胞的功能显著下降。结论:CSA在早期阶段干扰免疫应答是通过影响DC的活化而实现,DC是CSA最初的作用位点。

脑肿瘤患者脑脊液中补体和循环免疫复合物的变化

目的 为了解脑肿瘤患者肿瘤摘除前后脑脊液中补体 (C3 )和循环免疫复合物 (CIC)表达的变化 ,作者对 15例脑肿瘤病人手术前后脑脊液中C3和CIC进行测定。并相应观察血清中C3和CIC变化。方法 采用ELISA法对C3进行测定 ;以PEG直接沉淀试验进行CIC测定。结果 脑肿瘤病人手术前后脑脊液及血清中C3比较有显著差异 (P <0 .0 5 ) ,脑脊液及血清中CIC手术前后比较有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 脑脊液中C3的测定提示脑细胞分泌补体 ,C3参与脑内补体生物学功能 ;并且治疗前后有明显改变 ;脑脊液中CIC的存在 ,说明有持续性的CIC形成。通过C3和CIC表达在肿瘤治疗中的改变 ,结合临床其他指标 ,进而对临床提供治疗。

槲芪散及其君药槲寄生提取物对人肝癌细胞生长和端粒酶活性的影响

目的:研究槲芪散及其君药槲寄生对人肝癌细胞生长和端粒酶活性的影响。方法:用不同浓度的槲芪散及其君药槲寄生提取物作用于人肝癌细胞(SMMC-7721)后,用四甲基偶氮唑比色法(MTT)检测SMMC-7721细胞增殖。用实时荧光定量PCR法检测SMMC-7721的端粒酶活性。结果:(1)MTT结果显示槲芪散、槲寄生多糖和总碱能抑制SMMC-7721细胞,随药物作用时间的延长作用增强。(2)槲芪散、槲寄生多糖和槲寄生总碱能明显降低SMMC-7721端粒酶的活性。结论:槲芪散及槲寄生多糖和总碱均能抑制SMMC-7721增殖,降低SMMC-7721端粒酶的活性。

pPICZα-synBPI_(m600)酵母表达载体的构建和鉴定

为使rBPIm2 3 重组抗菌蛋白在毕赤酵母表达系统中分泌表达 ,拟构建synBPIm60 0 酵母表达载体。以pUC18 synBPI41 4 质粒为模板扩增synBPI2 0 0 基因片段 ,经XhoI/EcoRI双酶切获得synBPI1 85bp基因片段 ;EcoRI/SalI双酶切PBV2 2 0 BPIm60 0 质粒获得BPIm42 0 基因片段 ;将上述 2个基因片段连接后定向克隆到pPICZα酵母表达载体上。连接产物转化E .coliTOP 10F′ ,在含Zeocin的低盐LB固体培养基上筛选阳性转化子。阳性克隆菌经菌落PCR法鉴定、酶切分析和测序鉴定 ,结果与预期相符。提示 :成功构建了pPICZα synBPIm60 0

病因不明的神经系统疾病患者弓形虫抗体测定

弓形虫病是最常见的机会性寄生虫病。弓形虫在人体内寄生，可引起多种组织和器官的病变，而不同器官受损导致的后果则有很大差异。中枢神经系统弓形虫病是该病最为严重的一种类型，如能及早发现，及时治疗，则预后较好，若延误诊治，后果将很严重，甚至死亡［１］。为探讨...

类风湿关节炎小鼠关节浸润的T细胞克隆型分析

目的 :对一种自发性类风湿关节炎 (RA)小鼠 (SKG小鼠 )四肢足关节浸润的T细胞克隆型进行分析 ,以了解T细胞克隆型与RA的关系。方法 :采用RT PCR与单链构象多态性分析 (SSCP)相结合的方法。结果 :在SKG小鼠的四肢足关节Vβ2和Vβ8 2T细胞克隆型的一致率比较高 (分别为 6 8 1%和 5 9 2 % ) ,并且在被检测的所有小鼠的四肢足关节中都具有一致的Vβ2和Vβ8 2克隆型 (10 0 % )。DNA测序表明在SSCP中显示的来源于不同关节样品的共同的DNA带是相同的T细胞克隆型。T细胞转移试验表明关节聚集的T细胞克隆与RA的病变形成有关。结论 :TCR为Vβ2和Vβ8 2的T细胞可能在SKG小鼠的RA中具有重要作用。

阿尔茨海默病和血管性痴呆高龄患者的血小板功能

目的:观察阿尔茨海默病和血管性痴呆患者血小板功能变化,探讨血小板功能变化在两种疾病中的价值。方法:实验于2001-08/09在北京医院血液科实验室完成。血清标本均来自北京第一社会福利医院住院患者和健康体检者,按照临床阿尔茨海默病和血管性痴呆的诊断标准选取高龄阿尔茨海默病组患者15例,血管性痴呆组患者24例和高龄正常对照组25例。对受检者行肘静脉穿刺取血3mL,与抗凝剂充分混匀,室温静置1h后检测并计算血小板黏附率和血小板聚集率,并进行各组血小板黏附率和聚集率异常百分率的比较。结果:阿尔茨海默病组、血管性痴呆组和正常对照组血小板黏附功能异常比例分别为53%,71%,5%,血小板聚集功能异常比例分别为60%,67%,12%。卡方检验显示三组研究对象血小板黏附和血小板聚集功能异常明显(P<0.01)。结论:阿尔茨海默病患者和血管性痴呆高龄患者血小板黏附和血小板聚集功能异常百分率明显增高,可以作为临床辅助诊断,但是无法用于区分阿尔茨海默病和血管性痴呆患者。

头颈部肿瘤患者自然杀伤细胞活性及计数分析

本文对25例头颈部肿瘤患者的外周血NK细胞杀伤活性及NK细胞计数进行测定，其中有15例患者手术治疗切除肿瘤，于术后三周复查NK活性及NK计数，并与正常人组对照。实验结果显示：头颈部肿瘤患者NK活性及NK计数均低于正常人，两组比较均有极显著性差异（P＜0．01）；术后患者的NK活性比术前有明显提高，配对t检验P＜0．01，NK计数比术前也有所提高，配对t检验P＜0．05，有显著性差异；NK活性的水平与肿瘤的分期有相关性，晚期（T4期）癌症患者NK活性明显低于早期（T1、T2）患者，可以看出NK活性随着肿瘤的发展而降低，肿瘤对宿主有免疫抑制作用；NK活性与NK数量之间无显著的相关性，二者之间的相关系数r＝0．344。

BPI N端优势抗原表位的模拟合成及其人源抗体的筛选

杀菌／渗透增强蛋白（bactericidal／permeability increasing protein，BPI）是存在于人及哺乳动物多形核白细胞中的一种阳离子抗菌蛋白。研究证实BPI功能性氨基端片段（rBPl2。／rBPl23）具有与天然BPI55，相同的生物学活性，它们不仅能广谱杀伤G^-菌还能有效中和内毒素。

介绍一种定量检测细胞凋亡的方法

Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（毛喉萜）为二萜类有机化合物。已证实它能直接激活腺苷酸环化酶。使胞内ｃＡＭＰ浓度升高，导致胞内ＤＮＡ断裂，细胞呈现凋亡［１］。本文采用Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ介导小鼠胸腺细胞凋亡，并采用新的一种定量检测细胞凋亡的方法，呈现与流式细胞术（Ｆ...