山西某地区汞环境污染及对居民肾功能的影响

[目的]探讨山西某地区土法炼金活动影响环境中汞(Hg)的分布以及对当地居民肾功能的影响。[方法]用原子荧光光谱法测定大气、水、粮食Hg含量以及居民尿Hg含量,尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)用速率法测定,尿β_2-微球蛋白(β_2-MG)和尿微量白蛋白(mALB)测定采用终点法。[结果]污染区一年四季监测的大气Hg浓度为79～240ng/m^3,远高于对照区(P<0.05);河水中Hg含量超标19倍,达到(0.025±0.006)μg/L。污染区所产的玉米和粟米Hg含量分别为(0.006±0.003)mg/kg和(0.013±0.006)mg/kg,高于对照区(P<0.05);污染区居民尿Hg为(1.24±3.80)μg/L、尿β_2-MG含量为(228.98±4.34)μg/g Cr,均明显高于对照区(P<0.05)。[结论]污染区炼金过程中产生的Hg对当地环境造成污染,并通过一定途径进入人体,引起当地人群体内Hg负荷水平的改变及肾功能异常。

预防医学专业毕业专题实习效果评价

毕业专题实习是医学教育中很重要的一个环节。根据预防医学专业的特点,经过多年的实践,逐步探索和完善了"课题研究"的毕业实习模式,对近5年预防医学专业毕业专题实习的效果进行了评价。

高效液相色谱-质谱联用分析法测定血清全氟辛烷磺酸

目的全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)是全氟表面活性剂,被广泛用于纺织、皮革、涂料、农药等生产中,具有较高的生物蓄积性和多种毒性,是目前最难降解的持久性环境有机污染物之一,由其造成的污染已经逐渐成为全球性的环境问题。建立高效液相色谱-质谱联用分析方法对于检测环境和生物体内的PFOS具有实际意义。方法样品经固相萃取、液相色谱分离后进行电喷雾质谱分析,在多反应监控(multiple reaction monitoring,MRM)模式下使用内标法测定PFOS。结果PFOS在质量浓度为0μg/L～120μg/L时有良好的线性关系,线性相关系数r=0.991039。由标准曲线计算PFOS的回收率为76.88%。结论用高效液相色谱-质谱联用内标法定量分析血清中PFOS的浓度灵敏度高,分析速度快,适于血清PFOS含量的测定。

石英对人胚肺成纤维细胞TrxR/Trx表达的影响

目的:观察石英粉尘诱导的RAW264.7上清液对HELFTrxR和Trx表达的影响。方法:MTT法测定HELF的增殖能力,TBA显色法测定MDA,DCFH-DA探针检测ROS,Realtime-qPCR法和WesternBlot法分别测定TrxR和Trx的mRNA和蛋白表达。结果:石英粉尘刺激的RAW264.7上清液可以促进HELF增殖,引起HELF内MDA和ROS的含量升高(P<0.05);HELF的TrxmRNA表达量随着石英浓度的升高呈现下降趋势;低剂量组TrxRmRNA表达量无明显改变,高剂量组的TrxRmRNA和蛋白表达则均明显下降(P<0.05)。结论:石英粉尘可能通过下调Trx系统表达Trx和TrxRmRNA,导致HELF内氧化产物ROS和MDA堆积,从而加重HELF的氧化损伤。

铅作业工人神经行为功能的因子分析

目的应用世界卫生组织神经行为核心测试组合(WHO/NCTB),研究铅改变工人神经行为功能的特异因子,并探讨其影响因素。方法对某蓄电池厂135名铅作业工人及当地某机械厂143名非铅接触者进行WHO/NCTB的测试。结果利用因子分析发现接触组和对照组在消极情感因子、积极情感因子及记忆因子、注意力因子间差异有统计学意义。各因子得分分别与血铅进行直线相关分析,结果显示消极情感因子、积极情感因子及记忆因子均与血铅有显著相关。应用多元逐步回归分析进一步发现消极情感因子的主要影响因素是血铅,积极情感因子的主要影响因素是受教育程度和血铅,影响记忆力的主要因素是年龄、血铅、接铅时间。结论铅接触对神经行为的影响主要反应在情感状态、记忆力以及注意力方面,且铅对神经行为功能的损伤程度与血铅、工龄有关。

RNAi构建parp-1基因低表达的石英恶性转化细胞模型

目的构建多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1〔poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1〕基因低表达的石英恶性转化人支气管上皮细胞(M-16HBE)模型。方法利用RNA干扰(RNA interferencing,RNAi)技术建立parp-1基因低表达的M-16HBE模型;采用反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)法检测不同组别(空白对照组、阴性对照组和质粒转染组)M-16HBE的parp-1基因mRNA表达情况;应用MTT方法检测细胞的增生活性;应用流式细胞术检测细胞周期的变化情况。结果质粒转染组M-16HBE的parp-1基因mRNA表达水平较空白对照组及阴性对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05),表达量约为正常细胞的45%;阴性对照组与空白对照组M-16HBE的parp-1基因mRNA表达量相比,差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组相比,质粒转染细胞的增生能力显著增强,S期细胞比例升高了7.8%,G2期细胞比例下降了5.8%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Parp-1基因低表达M-16HBE模型构建成功。

山西省某地环境汞污染对女性生殖健康影响

目的通过流行病学调查,分析山西省某地区环境中汞污染状况及对当地女性居民生殖健康影响。方法用原子荧光光谱法测定当地大气、水、粮食和居民尿中汞含量;通过问卷调查方法获得女性人群基本健康资料和生殖健康情况。结果污染区空气中汞含量为(0.11±0.01)μg/m3,明显高于对照区(P<0.05);污染区小米、玉米中汞含量分别为(0.013±0.006),(0.006±0.003)mg/kg,明显高于对照区(P<0.05);污染区女性尿汞含量为(1.06±1.23)μg/L,明显高于对照区(P<0.05);污染区女性月经异常检出率和妊娠结局异常率明显高于对照区女性(P<0.05);污染区女性妊娠合并高血压和新生儿死亡率明显高于对照区(P<0.05)。结论污染区环境(主要是空气、土壤和农作物)存在汞污染;污染区女性居民体内汞负荷增高;汞对污染区女性生殖健康有一定影响。

锰对大鼠空间学习记忆影响

目的探讨锰染毒大鼠空间学习记忆变化的规律。方法50只雄性大鼠适应性喂养1周后,随机分为5组,即生理盐水组(A组),Mn2+2.5,5,10,20 mg/kg(B、C、D、E组)。腹腔注射生理盐水或MnCl2溶液0.5 mL/d,共30 d。染毒结束后,采用Morris水迷宫试验测定大鼠潜伏期、总路程和穿台次数的变化。结果经多组比较的单因素方差分析,潜伏期、总路程、穿台次数各组均数间差异有统计学意义(F=7.813,P=0.000;F=8.190,P=0.000;F=3.461,P=0.000);与A组比较,B、C、D和E组潜伏期延长,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,D和E组潜伏期延长,差异有统计学意义(P<0.05)。与A组比较,C、D和E组总路程延长,差异有统计学意义(P<0.01);与B组比较,C、D和E组总路程延长,差异有统计学意义(P<0.01)。与A组比较,B、C、D、E 4组穿台次数减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论锰染毒可以引起大鼠空间学习记忆障碍。

铅接触对工人血清骨钙素水平的影响

目的研究铅接触对工人血清骨钙素(BGP)的影响。方法对某蓄电池厂73名铅作业工人及当地某机械厂73名非铅接触者进行血铅、尿铅、血清BGP水平的测定。结果铅作业工人血铅、尿铅水平显著高于对照组(P<0.01);铅接触组的血清BGP质量浓度(4.75±3.28)μg/L,显著低于对照组(7.91±3.56)μg/L(P<0.01);血清BGP与血铅水平有显著负相关(P<0.01),而与尿铅相关性无统计学意义(P>0.05);随接铅工龄的延长,BGP水平逐渐降低(P<0.01)。结论铅接触可引起工人血清BGP水平降低,提示铅可能引起成骨细胞的代谢异常。

5-氮杂-2′-脱氧胞苷对苯诱导大鼠骨髓细胞周期改变的体外试验

目的探讨甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza)对苯处理大鼠骨髓细胞(BMC)周期的影响及其作用机制。方法以指数生长期的正常大鼠BMC作为空白对照组,以10 mmol/L苯处理BMC 24 h为苯处理组,苯处理后用10μmol/L 5-aza处理72 h为苯+5-aza处理组;运用流式细胞术检测细胞周期变化,实时定量PCR检测Cyclin D1和p27mRNA表达的变化,Western blot检测Cyclin D1和p27蛋白表达的变化。结果与对照组比较,苯处理组细胞S期比例显著增高42.5%,G1期比例下降31.5%(P<0.01),同时伴随Cyclin D1 mRNA和蛋白表达显著增加,p27 mRNA和蛋白的表达显著下降(P<0.01);与苯处理组相比,苯+5-aza处理组G1期比例上升52.7%,S期比例下降56.2%(P<0.01),同时伴随Cyclin D1、p27 mRNA和蛋白的表达发生显著性的逆转(P<0.01)。结论 5-aza逆转苯所致的细胞周期改变,伴有Cyclin D1和p27表达改变。

5-氮杂-2’-脱氧胞苷对石英恶转细胞DNA依赖蛋白激酶基因去甲基化作用

目的研究甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dc)对石英恶性转化人支气管上皮细胞系(M-16HBE)DNA依赖的蛋白激酶复合物催化亚单位(DNA-PKcs)启动子区甲基化状态和mRNA表达的影响。方法应用不同浓度的5-Aza-dc(分别为5、10、20μmol/L)处理M-16HBE细胞后,用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation specific PCR,MSP)方法检测DNA-PKcs基因启动子区甲基化状态,用反转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)检测DNA-PKcs基因mRNA表达情况。结果对照组细胞未发生DNA-PKcs甲基化,而M-16HBE组发生了DNA-PKcs完全甲基化。5-Aza-dc处理M-16HBE细胞后,DNA-PKcs基因甲基化逐渐降低、mRNA表达水平则逐渐增高,并呈剂量依赖趋势。结论启动子区DNA高甲基化是M-16HBE细胞DNA-PKcs基因表达下调的主要原因之一,甲基化抑制剂5-Aza-dc可逆转DNA-PKcs甲基化状态,从而上调DNA-PKcs基因的表达。

bak基因干扰在铝致SH—SY5Y细胞凋亡中的作用

目的以铝致神经母细胞瘤细胞（SH—SY5Y）为模型，研究用RNA干扰的方法阻抑bak基因的表达，找到其最优的序列、最适的转染浓度和转染时间，以减少铝引起的神经细胞凋亡。方法将三对bak基因小干扰RNA（siRNA）序列用不同浓度铝染毒细胞，分别测定不同的siRNA序列、不同的转染浓度及不同的转染时间对细胞活力的影响。用荧光染色法计数转染效率，用荧光定量PCR法检测干扰效率，用免疫组织化学染色法测定阻抑Bak蛋白表达效果。最后，用选定的bak siRNAl作用于染铝后的神经瘤细胞，并检测其对细胞的凋亡率及坏死率的影响。结果siRNAI序列为最有效的序列，最适转染浓度为10nmol／L，最适作用时间为转染后24h。siRNA的转染效率〉90％，最大干扰效率为57．76％，并表现了对Bak蛋白表达的明显的阻抑效应。bak siRNAI作用于染铝后的神经瘤细胞，可以明显降低细胞的凋亡率，但对细胞的坏死率的影响并不明显。结论凋亡是铝致SH-SY5Y细胞死亡的重要途径，针对bak基因，用化学法合成siRNA并将其导人神经细胞，可以有效降低bak基因和Bak蛋白的表达，提高细胞活力和降低细胞的凋亡率，为预防及治疗铝诱导的神经细胞凋亡及神经退行性变的发生发展提供理论依据。

锰对大鼠大脑热休克蛋白27、70mRNA表达的影响

[目的]探讨锰染毒条件下大鼠大脑热休克蛋白27(HSP27)和70(HSP70)的变化规律。[方法]健康2月龄雄性SD大鼠50只,随机分为5组:生理盐水对照组和Mn2+染毒2.5、5.0、10.0、20.0mg/kg组(分别以A、B、C、D和E组表示)。每只大鼠每天腹腔注射染毒0.5mL,连续30d,处死大鼠后采用等离子体原子发射光谱(ICP-AES)测定脑组织锰含量。通过实时荧光定量PCR(QT-PCR)检测大鼠亚慢性锰染毒后脑组织中HSP27和HSP70mRNA的相对表达水平。[结果]不同剂量组脑组织中的锰含量与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,B、C、D、E组HSP27mRNA的相对表达量增加,分别为对照组的2.00、5.51、8.78和6.61倍;HSP70mRNA的相对表达量也增加,分别是对照组的1.68、10.27、22.88和2.20倍。[结论]锰可以调节大鼠脑组织HSP27和HSP70表达的变化。

靶向PTEN的肿瘤相关微小RNA

微小RNA（miRNA）是通过基因转录后沉默来调控基因表达的内源性非编码小RNA。其中miR-21、miR-17-92、miR-214、miR-26a、miR-221、miR-222等可以通过与PTENmRNA3＇-UTR互补结合来抑制PTEN磷酸水解酶表达，而PTEN在细胞的增殖、凋亡、转移与侵袭中发挥重要作用，其低表达会导致肿瘤发生发展。