甲基叔丁基醚诱导的HT-22细胞氧化应激体外研究

目的探讨甲基叔丁基醚(MTBE)能否诱导HT-22细胞发生氧化应激。方法 MTT法检测不同浓度的MTBE(0,0.5,1.0,2.5,5,10,25,50 mmol/L)染毒6 h,对HT-22细胞存活率的影响;用不同浓度的MTBE(0,0.5,1.0,2.5,5 mmol/L)处理细胞后6 h,检测细胞中氧化应激指标(ROS、SOD、GSH/GSSG)的变化。结果随着染毒剂量的增加,HT-22细胞存活率显著下降(P<0.05)。相对于对照组,仅0.5,1.0,2.5,5 mmol/L四个剂量组细胞的存活率在80%以上;选取这四个剂量组作为染毒剂量,检测MTBE染毒后6 h各剂量组细胞内氧化指标的改变,结果显示,与对照组相比,各剂量组内ROS荧光强度逐渐增强,氧化型GSSG含量明显升高(P<0.05),抗氧化酶SOD酶和GSH含量活力显著下降(P<0.05),呈明显的剂量反应关系。结论 MTBE可诱导HT-22细胞发生氧化应激,该作用可能是MTBE致神经系统损伤的重要途径。

鱼藤酮致帕金森病的机制研究进展

帕金森病（parkinson’s disease,PD）是一种常见的神经退行性疾病,主要症状是震颤,僵硬,运动迟缓,步态异常。主要病理改变是黑质致密部多巴胺（dopamine,DA）神经元退行性变和被称为路易氏小体（Lewy body,LB）的细胞包含物的形成,黑质神经元减少和不同程度的胶质细胞增生。研究显示,90%以上的PD患者的致病因素都与环境污染物密切相关,其中杀虫剂鱼藤酮接触尤为明显。

miR-138-5p在锰致SH-SY5Y细胞自噬中的作用

[目的]探讨miR-138-5p在氯化锰(MnCl_2)诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞自噬中的作用及其机制。[方法]以生理盐水处理组作为对照,0.125、0.25、0.5、1 mmol/L MnCl_2染毒SH-SY5Y细胞6 h后,利用MTT法检测细胞活力;0.25和0.5 mmol/L MnCl_2处理细胞6 h后,采用Western blot检测自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达;MnCl_2染毒6 h后,使用反转录PCR和Western blot检测miR-138-5p和组蛋白脱乙酰酶SIRT1 mRNA以及蛋白表达的变化;使用miRNA模拟物转染细胞实现miR-138-5p过表达,然后0.25 mmol/L MnCl_2染毒6 h,检测SIRT1 mRNA和蛋白的表达以及自噬相关蛋白LC3和Beclin1的变化。[结果]MnCl_2可剂量依赖性地降低SH-SY5Y细胞活力(趋势χ~2=12.42,P<0.05)。与对照组相比,0.25、0.5 mmol/L MnCl_2染毒后,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值和Beclin1表达水平明显增加(P<0.05);miR-138-5p表达下调,SIRT1 mRNA及蛋白表达上调(均P<0.05)。miR-138-5p过表达后,相比未过表达的MnCl_2染毒组,SIRT1 mRNA及蛋白表达均出现下调,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值及Beclin1蛋白表达也相应下调(P<0.05)。[结论]miR-138-5p过表达可通过调节SIRT1的表达抑制锰诱导的SH-SY5Y细胞自噬。