InsR/FoxO1信号通路对妊娠胆汁淤积症子代大鼠下丘脑中POMC表达的影响

目的:探讨胰岛素受体(InsR)/胰岛素调节转录因子(Fox O1)信号通路对妊娠肝内胆汁淤积症出生后6个月子代大鼠下丘脑中阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)表达的影响。方法:40只清洁级SD孕鼠随机分为2组,每组20只。孕第13天时,对照组孕鼠皮下注射精制植物油2.0ml/(kg·d),ICP组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇1.0mg/(kg·d),直至孕21天。从ICP组和对照组出生子代中各随机选取雌性20只喂养至6月龄。分别在出生后1个月、3个月、6个月断尾取血。6月龄时进行糖耐量实验,检测血糖水平的变化。6月龄处死子代提取下丘脑组织,PCR法检测InsR、Fox O1及POMC mRNA表达。应用免疫组化法检测POMC在下丘脑弓状核的表达。结果:ICP组子代大鼠在出生时、1个月时体重明显低于对照组(P<0.05),6个月时体重与对照组比较无明显差异。6月龄时进行糖耐量实验,ICP 6月龄子代血糖水平在不同时间段均高于对照组子代水平,差异有统计学意义(P<0.05)。ICP组6月龄子代大鼠下丘脑中InsR、Fox O1A、POMC mRNA相对含量与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示,ICP子代鼠下丘脑中POMC阳性细胞数明显低于对照组。结论:ICP组由于存在高胆酸水平和不良的胎儿宫内生长环境,引发子代下丘脑调控能量稳定的信号通路改变,抑制食欲细胞减少,表现为饥饿状态,导致体重增加和血糖变化明显。

妊娠期肝内胆汁淤积症孕鼠子代胆固醇代谢与胰岛素抵抗及相关基因在肝脏中的表达

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)孕鼠子代在出生后不同时期血清胆固醇、甘油三酯、瘦素、胰岛素、皮质醇、高密度脂蛋白与低密度脂蛋白水平的变化及胆固醇7-羟化酶(CYP7A1)、过氧化物酶增殖物激活受体(PPARγ)、低密度脂蛋白受体(LDLR)在12月龄鼠肝脏中的表达。方法选取40只清洁级SD孕鼠,随机分为对照组和ICP组,每组20只,自孕第13天起对照组孕鼠皮下注射精制植物油2.0 ml·kg-1·d-1;ICP组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇1.0 mg·kg-1·d-1至分娩。两组各随机选取低雌性和雄性小鼠各20只喂养至12月龄。分别在出生后1个月、3个月、6个月及12个月断尾取血,应用酶学反应方法检测血浆甘油三酯和胆固醇水平;应用特异的鼠放射免疫法测定血浆胰岛素、瘦素以及皮质醇水平;在6月龄时进行糖耐量实验,检测血糖水平的变化;在12月龄处死后提取肝脏组织,应用PCR检测CYP7A1、PPARγ、LDLR mRNA的表达。结果在子代6月龄时进行糖耐量实验,发现无论雌性和雄性鼠,ICP组6月龄子代血糖水平在不同时间段均高于对照组子代水平,差异有统计学意义(P<0.05)。ICP组12月龄子代雌性和雄性CYP7A1 mRNA、LDLR mRNA水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PPARγmRNA水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。随着月龄的增加,ICP组雌性和雄子代的血胆固醇、甘油三酯、瘦素、胰岛素、皮质醇、低密度脂蛋白水平逐渐升高,在6月龄和12月龄时与对照组子代相比,差异有统计学意义(P<0.05);高密度脂蛋白水平降低,在6月龄与12月龄时与对照组子代相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ICP存在高胆汁酸水平,会造成不良的胎儿宫内生长环境,是导致子代代谢疾病发生的原因之一。

雌激素受体α对胆汁酸转运相关基因的调控及其与孕鼠肝内胆汁淤积症发生的相关性

目的探讨雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)对参与调节胆汁酸转运相关的基因,如法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)、钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白(sodium taurocholate co-transprorting polypeptide,NTCP)、胆盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)的调控作用及其对孕鼠肝内胆汁淤积发生的影响。方法将40只SPF级SD孕鼠随机均分为4组。自孕第15 d起,对照组颈部皮下注射精制植物油2.0 m L/kg·d;低、中、高剂量组分别皮下注射17α-乙炔雌二醇1.0 mg/kg·d、1.25 mg/kg·d、1.5 mg/kg·d。于妊娠第21 d采血2 m L,后采用颈部脱臼法处死,提取母鼠肝脏行活体组织学检查。检测各组孕鼠血清中的生化指标及肝脏组织中各目的蛋白和mRNA表达量。结果生化指标:低、中、高剂量组孕鼠各蛋白表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),低、中、高剂量组组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);蛋白表达及mRNA的表达水平:ER在对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组的表达量依次升高,而FXR、NTCP、BSEP在对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组的表达量依次降低,各组目的基因表达量与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论随着雌激素剂量的增加,ERα表达水平升高,而FXR、NTCP、BSEP表达水平均降低,提示胆汁酸代谢转运功能降低,可能为雌激素诱导孕鼠肝内胆汁淤积的发生机制之一。